一、苹果果肉中抗氰氧化酶(AOX)的分离鉴定（论文文献综述）
李欣[1]（2021）在《柑橘贮藏期线粒体响应低氧胁迫的生物学机制研究》文中研究说明采后打蜡造成的低氧环境容易加重柑橘果实的无氧呼吸,伴随乙醇和乙醛为主的异味物质快速积累会导致果实风味劣变、货架期缩短。线粒体作为感知环境信号的重要细胞器,在果实中不仅参与了能量合成,而且对果实的品质维持和胁迫应答都具有关键作用。然而,线粒体在采后柑橘果实低氧应答过程中的作用和机理知之甚少。据此,本研究在优化并建立了从不同柑橘中制备高纯度果肉线粒体的基础上,比较了它们的线粒体蛋白组,并利用柑橘果肉进行活细胞成像和线粒体制备,解析了涂蜡诱导的低氧胁迫对柑橘线粒体形态和蛋白组的影响。进一步,以筛选出的Cit12Cys2为切入点,初步解析了其响应低氧胁迫的生物学机制。主要研究结果如下:1.建立了不同柑橘高纯度果肉线粒体的分离纯化体系。以温州蜜柑（Citrus unshiu‘Guoqing No.1’）、椪柑（C.reticulata‘Egan No.1’）、纽荷尔脐橙（C.sinensis‘Newhall’）、沙田柚（C.grandis‘Guiyou No.1’）为实验材料,通过优化匀浆方式、提取缓冲液成分、离心步骤等,最终利用差速离心结合Percoll密度梯度离心从以上4种柑橘果肉中分离得到高纯度线粒体。蛋白印记分析和透射电镜观察均表明制备的线粒体纯度较高,因而为后续高通量表征线粒体功能奠定了方法学基础。2.线粒体能量代谢在不同柑橘间呈现一定保守性,而线粒体氨基酸和脂肪酸代谢在宽皮柑橘和紧皮柑橘间存在显着差异。在制备高纯度果肉线粒体的基础上,利用lable-free定量蛋白组学手段对4个品种的线粒体蛋白组进行了表征,共鉴定到3353个非冗余蛋白,其中在4个品种中均鉴定到的蛋白主要参与了与能量代谢相关的生物学过程,例如三羧酸循环、氧化磷酸化和丙酮酸代谢。与果实品质密切相关的代谢通路也被鉴定到,包括GABA支路代谢和次级代谢物（Vc、生物素、叶酸等）的合成等。另一方面,通过定量蛋白组学分析筛选到522个宽皮柑橘（温州蜜柑和椪柑）和紧皮柑橘（纽荷尔脐橙和沙田柚）之间的差异丰度蛋白（DAPs）。KEGG分析显示这些差异丰度蛋白主要与脂肪酸代谢和氨基酸代谢有关。部分DAPs的线粒体定位进一步通过亚细胞定位实验得到了验证。此外,将柑橘线粒体蛋白组与已发表的其他作物（拟南芥、水稻、马铃薯、玉米）线粒体蛋白组进行了比较,并发现了一些功能未知的线粒体蛋白。综上,本研究建立了线粒体代谢与不同类型柑橘果实贮藏性能间的联系,同时为探究植物线粒体的新功能提供了实验依据。3.线粒体通过形态变化和代谢调节,参与贮藏期果实对低氧胁迫的应答。以伦晚脐橙（Citrus sinensis‘Lane Late’）为实验材料,通过果面涂蜡模拟商业贮藏中的低氧环境,首次在果实中利用活细胞成像研究了线粒体形态在响应低氧胁迫过程中的动态变化。研究发现涂蜡诱导的低氧胁迫强烈促进了线粒体的分裂和碎片化,导致大量点状线粒体的形成。相应地,低氧造成了线粒体膜电势和运动速率的下降,能量水平（ATP和ADP）和辅酶含量（NAD（H）和NADP（H））也在涂蜡果实中有所降低。进一步,分离了涂蜡处理后的果肉线粒体,利用透射电镜观察其超微结构的变化:发现线粒体出现膨胀且形状变得不规则,嵴呈现碎片化甚至无法识别,基质变得澄清;贮藏后期,线粒体膜结构遭到破坏,甚至完全降解。此外,对线粒体蛋白组进行表征,并利用基因共表达网络分析（WGCNA）筛选到167个响应低氧的关键蛋白;KEGG分析表明这些蛋白主要与氨基酸代谢、脂肪酸代谢和有机酸代谢相关。部分低氧响应蛋白的线粒体定位进一步通过亚细胞定位实验得到了验证。代谢物分析表明,涂蜡处理显着诱导了一些厌氧代谢物的积累,例如乙醛、乙醇、琥珀酸和GABA。综上,本研究为线粒体参与果实贮藏过程中低氧胁迫的应答提供了细胞学和蛋白组学方面的实验依据。4.线粒体蛋白Cit12Cys2经低氧胁迫处理后显着上调表达,并通过降低ROS的积累来提高组织对低氧胁迫的抗性。以Cit12Cys2为靶基因,综合利用生物信息学、分子生物学和生理生化等手段解析了Cit12Cys2响应低氧胁迫的生物学机制。q RT-PCR结果表明低氧胁迫可显着上调Cit12Cys2的转录本丰度,生物信息学分析证实Cit12Cys2启动子区存在多个厌氧响应元件,烟草双荧光素酶实验和柑橘愈伤GUS染色实验均证明Cit12Cys2的启动子活性显着受到低氧胁迫的诱导。为表征Cit12Cys2在响应低氧胁迫中的功能,在柑橘愈伤和拟南芥中分别构建了Cit12Cys2的超表达系。低氧胁迫下,愈伤超表达系的H2O2积累量显着低于对照,拟南芥超表达系的生长状态比野生型好,存活率更高。综上所述,线粒体通过触发形态结构、代谢活性、膜电势、运动速率、ATP合成、氧化还原状态、ROS积累、基因表达等不同层面的一系列变化,从而对低氧胁迫做出应答。本研究为深化认识线粒体在果实成熟衰老、品质维持和胁迫响应中的作用提供了理论依据。
李彩云,李洁,严守雷,王清章[2]（2021）在《果蔬酶促褐变机理的研究进展》文中研究指明酶促褐变对果蔬在加工保鲜过程中的品质有重大影响,有关酶促褐变机理的相关研究也越来越多。本文整理归纳了国内外围绕褐变机理进行的多酚氧化酶和酚类底物的相关研究,包括对多酚氧化酶种类、催化位点、提取、分离、纯化、活性测定方法的介绍;酚类化合物种类、含量变化及其变化原因的阐述;酚类酶促氧化反应、醌的生成途径、次级代谢过程、氧化终产物特性以及抗褐变剂抑制酶促褐变机理的报道,以期为酶促褐变机理的系统深入研究提供借鉴与参考。
张俊虎[3]（2020）在《1-MCP处理对苹果后熟衰老过程中SOD家族基因表达的影响》文中研究表明本研究以苹果中的早熟品种‘金冠’（Malus domestica Borkh.）为试材,在常温贮藏（温度22±2℃,相对湿度50-55%）条件下,用浓度为1.0μL L-11-MCP密封熏蒸处理24 h,研究1-MCP处理对苹果果实采后贮藏品质及活性氧相关代谢的影响。同时,从苹果基因组中筛选出了在苹果果实上表达的SOD家族基因成员,并利用qPCR技术检测了它们在1-MCP处理下的表达情况。主要研究结果如下:1.1-MCP处理使果实保持了较好的贮藏品质并降低了果实贮藏期间的活性氧（reactive oxygen species,ROS）代谢水平。1-MCP处理后苹果果实在贮藏期间的乙烯释放量和呼吸速率被显着抑制,并且乙烯释放高峰和呼吸高峰出现的时间被推迟。与对照相比较而言,1-MCP处理并没有对果实乙烯释放高峰和呼吸高峰峰值产生显着影响。此外,1-MCP处理使果肉硬度得到有效保持,果实可溶性固形物含量（soluble solid content,SSC）较对照也有所提升。1-MCP处理果实后,显着提升了果肉和果皮组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性,且使果肉和果皮组织中过氧化氢（H2O2）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量上升受到抑制,超氧阴离子(O2·-)产生速率也被延缓。由此说明,1-MCP处理可降低ROS产生速率,减少细胞膜损伤,因而具有延缓果实衰老进程的积极作用。2.对苹果基因组中31个SOD家族基因成员进行鉴定发现,有14个SOD基因在果实的不同部位表达。Cu/ZnSOD2、Cu/ZnSOD3、Cu/ZnSOD6、Cu/ZnSOD8、MnSOD2、MnSOD4、MnSOD7、MnSOD9均在果实果肉和果皮组织中表达。Cu/ZnSOD5和Mn/FeSOD只在果肉组织中表达,Cu/ZnSOD9、Cu/ZnSOD10、FeSOD1和FeSOD5只在果皮组织中表达。3.运用q-PCR技术检测了上述14个SOD基因在1-MCP处理下的表达情况。结果表明,SOD基因家族成员在果肉和果皮中对1-MCP处理有不同的应答模式。与对照相比,1-MCP处理可使果肉组织中Cu/ZnSOD2、Cu/ZnSOD3、Cu/ZnSOD5、Cu/ZnSOD6、Cu/ZnSOD8、MnSOD2、MnSOD7的表达量在贮藏早期（第0 d至第21 d）上调,而在贮藏后期（第28 d至第35 d）则使它们的表达量下调。在果实贮藏早期,1-MCP处理不同程度地下调果皮组织中Cu/ZnSOD2、Cu/ZnSOD3、Cu/ZnSOD6、Cu/ZnSOD8、Cu/ZnSOD9、MnSOD2和MnSOD9的表达量。在果实贮藏后期,1-MCP处理上调了果皮组织中Cu/ZnSOD10、MnSOD4、MnSOD7和FeSOD5的表达量。在整个贮藏期间内,1-MCP处理上调了果皮组织中FeSOD1和FeSOD5的表达量。综上所述,1-MCP处理能有效保持苹果果实采后贮藏品质,并能显着降低果实体内产生的ROS累积,进而延缓采后苹果果实成熟衰老的速度,延长其贮藏期。1-MCP处理不同程度地调控苹果采后成熟衰老过程中SOD活性及基因的表达。
李辉,熊丽娇,刘苑琳,杨华,翟明,刘玲彦,柳志杰,许引虎[4]（2019）在《苹果的深加工技术与综合利用研究》文中研究指明苹果是世界四大水果之一,它具有非常高的种植价值和经济效益,我国的苹果种植面积和产量占全球一半以上。本文就苹果的果皮、果肉、果渣和果籽的营养成分和研究利用现状做了简要的综述。希望通过系统性的概述,能够对苹果——这一我国最重要的水果农产品的资源深加工和综合开发及利用起到推动和引领作用,从而促进农业供给侧及"三农"问题的解决。
奚宇[5]（2017）在《绿原酸对油桃和苹果果实采后成熟衰老的调控作用》文中研究说明酚类物质是植物体中重要的次级代谢产物,其在人体中的抗氧化、抗衰老、预防心血管疾病以及改善认知等作用已广泛获得研究者的关注,但是有关酚类物质对果实采后成熟衰老进程是否以及如何产生影响的研究还比较少。本文主要研究果实内源酚类物质如何对果实成熟衰老相关蛋白质的表达以及相应酶活性产生影响从而影响果实成熟衰老进程。研究内容与结果如下:实验发现相比于新绿原酸（油桃果实果肉组织中另一种主要酚类物质）,绿原酸可以更显着地减少油桃果肉切片乙烯释放量、延缓切片硬度和可溶性固形物含量下降。绿原酸可以显着降低油桃果实在贮藏期间的乙烯释放量、呼吸速率、软化程度、腐烂率和丙二醛含量。同时,绿原酸处理也延缓了贮藏期间油桃果实果皮颜色的转红、可滴定酸含量下降和可溶性固形物上升。研究还发现,绿原酸处理显着增强了果实的抗氧化活性、自由基清除能力和还原能力。实验利用双向电泳以及基质辅助激光解析电离飞行二级质谱（MALDI-TOF-TOF/MS）技术成功分离鉴定了油桃果实中74个与成熟衰老相关并受到绿原酸影响的蛋白质。其中参与果实呼吸作用的蛋白质NADP-苹果酸酶（NADP-ME）、苹果酸脱氢酶和NAD-依赖型苹果酸脱氢酶,其蛋白表达量都由于绿原酸处理出现明显下调;绿原酸处理使超氧化物歧化酶,过敏蛋白Prup1和病程相关蛋白10等具有防御性功能的蛋白表达量出现上调,;碳水化合物代谢相关蛋白质,包括α-淀粉酶,蔗糖合成酶、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶、UDP-糖基转移酶和α-半乳糖苷酶在油桃果实成熟过程中的表达量也明显受到绿原酸影响而有所下调。绿原酸还可以显着抑制1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶（ACO）在油桃果实采后成熟过程的蛋白表达量上升。使用iTRAQ定量蛋白组学技术分析苹果果肉组织中与苹果内源多酚具有亲和作用的蛋白质。分析得到157个目标蛋白质,其中包括与果实成熟衰老相关的脂氧合酶、糖基转移酶、αα-淀粉酶、淀粉支链酶、纤维素合成酶、蔗糖磷酸酶、β-半乳糖苷酶、1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶（ACS）、ACO和乙烯受体蛋白等。实验以苹果果肉切片作为模型来研究绿原酸对苹果果实衰老的影响。与对照组相比,绿原酸处理显着降低了苹果果肉切片乙烯释放量和呼吸速率,减缓果肉切片硬度和可溶性固形物含量的下降。十二烷基苯磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和MALDI-TOF/TOF分析显示,绿原酸处理显着降低了苹果果肉切片中脂肪氧合酶、β-半乳糖苷酶、NADP-ME、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶等蛋白的表达量,提高了类甜蛋白的蛋白表达量。在体外实验中发现,苹果多酚和绿原酸均可抑制ACS、ACO、α-淀粉酶、脂氧合酶、β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷糖、聚半乳糖醛酸酶（PG）、果胶甲酯酶（PME）、NADP-ME、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）的酶活性,并且绿原酸对这些酶活性的抑制效果与苹果多酚相比没有显着差异。进一步实验发现,当苹果果肉切片经过绿原酸处理后,其中ACO、ACS、α-淀粉酶、脂氧合酶、β-葡糖糖苷酶、β-半乳糖苷酶、NADP-苹果酸酶、POD、PPO的酶活性在切片孵育观察过程中会显着下降,而PG和PME酶活性没有受到明显的影响。
潘俨[6]（2016）在《库尔勒香梨果实发育及采后糖代谢与呼吸代谢关系的研究》文中研究表明本研究以探知果实发育和采后衰老过程中,糖代谢与呼吸代谢的互作对糖分品质构成、积累和劣变影响的机理为目标,研究库尔勒香梨（Pyrus sinkiangensis Yu）果实采前与采后不同时期、不同部位的糖组分含量、不同途径呼吸速率、代谢酶活性的变化与相互关联;分析和阐释果实糖分品质发育与采后衰老过程糖代谢与呼吸代谢响应时序特征以及部位间差异,以明确果实采前品质构成与采后品质劣变重要阶段的糖代谢与呼吸代谢的联结热点路径,为库尔勒香梨果实糖分品质发育与采后品质维持的调控可能途径提供理论依据。主要研究结果如下:1、库尔勒香梨盛花期后60-150 d的果实发育过程中,果心和果肉的糖代谢与呼吸代谢从花后90d分为2种不同的响应模式,果皮的代谢间响应在花后120 d明显变化;各个部位以果糖和葡萄糖为主效糖分积累、构成典型的内在品质。2、花后60-80 d,果心的蔗糖、山梨醇代谢与TCAC、AP途径的呼吸代谢关联,以淀粉、蔗糖、山梨醇依次作为主效糖分转换积累;花后90-150 d,果心质量增至7.0 g以上,淀粉、蔗糖、山梨醇代谢与PPP、EMP途径、CP途径的呼吸代谢关联,主效糖分由葡萄糖转换为果糖完成积累。3、花后60-80 d,果肉以淀粉、蔗糖、山梨醇的代谢关联,淀粉为主效糖分;花后90-150 d、果肉质量增至50.0100.0 g以上,蔗糖代谢与EMP、TCAC、CP、AP途径的代谢关联,由山梨醇转换为蔗糖、葡萄糖、果糖为主效糖分完成积累。4、花后60-120 d,果皮的淀粉、山梨醇代谢与PPP、EMP、TCAC呼吸代谢关联,以山梨醇和蔗糖为主效糖分积累;花后130-150 d、果皮质量增至17.0 g以上,淀粉、蔗糖代谢与TCAC、AP、CP代谢关联,由淀粉转换为葡萄糖、果糖为主效糖分完成积累。GPI与COX是果实发育末期果心、果肉和果皮呼吸代谢与糖代谢的响应关键酶。5、花后130 d、140 d和150 d采收3个成熟度果实,采后5℃贮藏120 d期间果实各个部位的淀粉含量下降明显、可溶性糖分含量增加,依然以果糖的含量最高、对甜度的贡献最大。果实采后以果皮的总呼吸及不同途径的呼吸速率最高、均属于峰型曲线,果实采后的呼吸跃变是果皮多途径呼吸峰叠加的效应。6、果实采后衰老过程,果肉的呼吸代谢以放热耗能优先,放热呼吸阶段以有机酸为底物、产能呼吸阶段主要以葡萄糖为底物;采收成熟度高的果实以蔗糖或山梨醇来源的底物参与果肉采后不同阶段的呼吸代谢;采收成熟度低的果实、采后果肉的放热呼吸与产能呼吸趋于同步。果心与果皮的呼吸代谢采后均以能量合成优先,果实的采收成熟度越高、采后果心的能量代谢转换至放热呼吸阶段的速度越快,代谢底物由淀粉代谢与山梨醇代谢的转化产物转换为蔗糖代谢产物。果皮的代谢质心由EMP、TCAC与CP产能呼吸的多个代谢热点联结,快速转换至AP放热呼吸、并与少数代谢热点响应,成为呼吸跃变的显着特征;该过程以淀粉、蔗糖和山梨醇代谢转化产物及有机酸为底物;采收成熟度低的果实、采后果皮的产能呼吸与放热呼吸的代谢切换被推迟。7、果实采后果心、果肉和果皮均呈现糖代谢与呼吸代谢的热点响应由紧变疏、聚合度下降和代谢热点静息的趋势,末端电子传递AOX是代谢响应转换过程的关键酶。果实发育过程中各个部位积累最多的果糖,采后并未作为主效糖分直接被呼吸代谢大量消耗而明显下降;而淀粉、山梨醇、葡萄糖和蔗糖被时序化的选择为呼吸底物的主效组分被消耗利用,是库尔勒香梨果实采后保持甜度和糖分品质的原因。以花后140 d采收的果实采后果皮呼吸峰出现时间较晚,果肉糖代谢与呼吸代谢响应关联的持续时间较长、贮运适宜性较高。
康若祎[7]（2016）在《桃果实成熟期间及采后NO处理的蛋白质组学研究》文中研究表明桃是世界和我国最主要和最具经济价值的核果类水果,江浙一带的优质水蜜桃常温条件下极不耐贮藏,保鲜技术不够完善导致产品在市场上流通和供应期受到限制。因此,桃果实成熟衰老机理及其保鲜技术研究备受重视。本研究通过桃果实成熟期间和采后NO处理后果实蛋白质组学的研究,对分析获得的显着差异蛋白点进行功能鉴定、归类和分析讨论,获得桃果实成熟衰老和NO调节成熟衰老的分子机制,为深入阐释桃果实成熟衰老分子机理提供参考。主要研究结果如下:1.不同发育和成熟度的’霞晖8号’桃果实经蛋白质组学iTRAQ技术分析,有5047个不重复蛋白质,其中1207个蛋白质被鉴定为3个生物重复样品所共有,蛋白丰度变化大于1.2倍的蛋白有387个（其中2-fold以上差异表达的蛋白点79个,1.5倍-2倍差异蛋白数有62个）,分属21个功能类别。主要参与了蛋白质翻译后修饰与转运和分子伴侣（12.81%）、碳水化合物运输与代谢（11.70%）、氨基酸运输与代谢（7.80%）、翻译和核糖体结构及生物合成（6.13%）和能源产生与转化（6.13%）。2.比较不同发育和成熟阶段’霞晖8号’果实的差异蛋白显示,C/A、C/B、D/C、E/C和F/C组中,2倍以上差异蛋白个数分别为23个、1个、23个、42个和3个,其中以C/A和E/C组参与的功能类别为多。C/A组1.2倍以上差异蛋白个数是C/B组的5倍多（165/32）,2倍以上差异蛋白点是C/B组的23倍（23/1）;E/C组1.2倍以上蛋白差异个数分别是D/C和F/C组的2.90倍（203/70）和5.34倍（203/38）,2倍以上差异蛋白点是D/C和F/C组的1.83倍（42/23）和14倍（42/3）。以上结果表明,不同阶段的桃果实生物学变化存在显着差别。3.差异蛋白功能分析揭示,桃果实成熟衰老期间其生物学代谢途径、方向和强度及效能发生显着变化。桃果实采前以糖类和碳水化合物合成、蛋白翻译和表达及修饰为主,具有强大的离子和物质运输能力,有效保持渗透平衡,进行旺盛的氧化还原反应;接近采收的果实中Rubisco开始降解,为合成反应提供氮源;采收时果实氧化磷酸化作用呈上升趋势,呼吸作用加剧,氨基酸代谢加剧,糖类及碳水化合物代谢转而以分解为主;成熟后期果实氧化还原反应和氧化磷酸化反应显着增强,并具有较强的物质运输能力,脂类代谢和蛋白质翻译表达活动极为活跃,细胞壁降解速度加快,能量利用率趋于降低。4.以’霞辉5号’水蜜桃为试材,对NO处理（10μL/L,室温20-25℃,3h）和对照桃果实常温贮藏后进行2-DE蛋白电泳,以获得的电泳图进行比较,对差异蛋白进行质谱鉴定和数据库匹配。结果显示,鉴定出的104个（>2-fold）差异蛋白点参与了不同的代谢过程,按照其功能可以分为7类,30.77%参与能量和代谢、25.00%参与应激反应和防御、8.65%与细胞结构有关、8.65%与蛋白质命运有关、6.73%参与运输和转导、5.77%与成熟和衰老有关等。差异蛋白中与能量和代谢相关的蛋白所占比例最大,其次是参与能量产生、物质（碳水化合物、氨基酸、蛋白质、脂质）和次生代谢。这些结果表明,NO处理显着影响了能量和代谢及相关应激反应和防御相关蛋白质的表达,进而参与了桃果实的成熟过程。5.差异蛋白细胞定位结果显示,大部分蛋白位于细胞质（40个）和叶绿体中（34个）,其他蛋白位于细胞核（10个）、线粒体（8个）、细胞外空间（3个）、液泡（2个）、有色体（1个）和内质网腔（1个）,表明NO影响蛋白表达与众多细胞器有关。6.蛋白功能分析结果表明,NO调控桃果实成熟的机理复杂,包括通过提高SOD和热休克蛋白70提高防御能力、形成ACO-NO-ACC复合物影响乙烯生物合成、减少细胞色素c氧化酶进而抑制电子运输和耗氧量、加强profilins以抑制细胞壁的降解。另外,NO增加了 SOD和抗坏血酸-谷胱甘肽循环中酶活性而抑制ROS的生成、减少Ca2+离子和其它结构组件损失而抑制细胞壁降解,维持细胞结构和功能。
郭丽芳[8]（2013）在《不同温度和含氧量对猕猴桃采后生理及能量相关基因表达的影响》文中指出能量是维系生物体一切生命活动的基础，组织能量亏损是加速采后园艺作物衰老和品质劣变的重要因素。而能量对于园艺作物采后贮藏寿命的影响又是一个相对复杂的过程，目前对于有关能量代谢的生理生化和分子机制还不十分明确，特别是能量代谢的调控方式。深入揭示这些问题，可减少园艺作物采后呼吸底物消耗和提高组织能量形成，进而延长园艺作物贮运保鲜期。实验分析测定了不同温度和不同含氧量这两个影响果实呼吸的关键因素对采后猕猴桃的呼吸速率、乙烯产生速率等生理指标，能量水平以及SnRK基因、AtpB基因、ACC基因、AOX基因和PUMP基因等能量相关基因的表达的影响。主要研究结果如下：1.利用RACE技术克隆到3个AAC基因，1个AtpB基因、1个AOX基因、1个PUMP基因和1个SnRK基因，分别命名为AdAAC1、AdAAC2、AdAAC3、AdAtpB、AdAOX、AdPUMP和AdSnRK。2.相较于常温，低温保持了较高的硬度及较低的TSS水平；抑制了猕猴桃果实的呼吸速率和乙烯产生速率，降低了ATP、ADP、AMP水平、能荷、ATP/ADP比率以及腺苷酸总水平；提高了AdAAC1、AdAAC2、AdAtpB、AdAOX、AdPUMP及AdSnRK基因的表达，抑制了AdAAC3基因的表达。3.相较于对照，长期100%N2处理保持了较高的硬度及较低的TSS水平，抑制了果实的衰老，抑制了猕猴桃果实的呼吸速率和乙烯产生速率，降低了ATP、ADP、AMP水平以及腺苷酸总水平；长期100%O2处理则加速了猕猴桃果实的衰老，促进了猕猴桃果实的呼吸速率和乙烯产生速率，增加了ADP、AMP水平以及腺苷酸总水平，降低了能荷及ATP/ADP比率。4、在采后猕猴桃成熟衰老的过程中，AdAAC1、AdAAC2、AdAtpB及AdSnRK基因的表达趋势相同，且这4个基因出现表达高峰和低谷的时间基本一致。AdAOX和AdPUMP基因的表达在长期100%O2处理的果实中，在贮藏期第1天表达量明显高于其它贮藏期。5、在猕猴桃采后衰老过程中，其ATP、ADP和AMP水平都会出现一个先增加后减小的趋势，且出现高峰水平的时间顺序分别是AMP、ADP和ATP。综上所述，采后猕猴桃能量水平与呼吸强度密切相关，而果实的成熟衰老受到能量水平的调节。AdAAC1、AdAAC2、AdAtpB、AdSnRK、AdAOX和AdPUMP基因在维持正常的能量水平上起着重要作用。
李彬,齐鑫,贺蔡明,魏冬梅[9]（2012）在《交替氧化酶的原核表达、纯化及活性研究》文中认为利用原核表达系统BL21和FN102表达交替氧化酶,用镍-NTA（Ni-NTA）琼脂糖凝胶层析柱纯化交替氧化酶可溶蛋白,利用SDS-PAGE检测纯化蛋白电泳纯度,用分光光度法测蛋白活性。结果表明:FN102表达的交替氧化酶量高于BL21;在BL21表达系统中的蛋白电泳纯度<10%,而在FN102中表达的纯化蛋白电泳纯度达到90%～95%;BL21中表达交替氧化酶纯化蛋白活性为165.1 nmol/（min.mg）,FN102中表达的交替氧化酶纯化蛋白活性为64.0 nmol/（min.mg）。
吕新刚[10]（2012）在《采后处理对苹果虎皮病防治效果及机理研究》文中进行了进一步梳理虎皮病是苹果低温贮藏中、后期易发的生理病害，多数品种易感染此病，一旦发生，果实外观受损，食用品质下降，商品价值降低。为寻求安全有效的防治方法及进一步明确该病的发生机理，本文采用壳聚糖涂膜、间歇升温、1‐MCP和乙烯利等处理，系统研究了红富士苹果经不同处理后虎皮病发生状况及响应机制，从氧化胁迫角度，系统分析了α-法尼烯生成和氧化、活性氧代谢、抗氧化系统的交互作用关系及在虎皮病发生过程中所起的作用，以期找到安全有效的防治方法，并为深入认识虎皮病发病机理、寻求有效的控制措施提供技术和理论依据。研究取得以下主要结果：（1）通过对不同采收期红富士苹果在低温及常温下生理变化的研究发现，果实对虎皮病的敏感性受采收成熟度的影响。成熟度低果实抗氧化能力低，对氧化胁迫抵御能力差，H2O2和丙二醛（MDA）积累量大，果实发病早且发病程度高；成熟度高的果实抗氧化能力强，活性氧（ROS）代谢失衡发生迟，H2O2和MDA累积量随时间延迟增幅小，发病晚且发病程度低。此外，虎皮病发生表现出明显的阶段性，具体表现为低温下氧化损伤缓慢累积与常温下症状快速表现。常温贮藏条件下虎皮病症状的快速表现与低温下H2O2和MDA积累相关的氧化损伤有关。低温贮藏阶段，虎皮病发生状况与H2O2和MDA积累显着相关，多酚氧化酶（PPO）作用较小；常温流通阶段，虎皮病症状的快速表现与PPO的相关性更大。（2）通过对经壳聚糖涂膜处理的红富士苹果在低温冷藏条件下生理变化的研究发现，壳聚糖涂膜处理可以抑制果实呼吸强度和乙烯释放，降低α-法尼烯生成及氧化，减弱膜脂过氧化作用，抑制PPO活性，控制虎皮病的发生；2%壳聚糖涂膜对虎皮病的防治作用最好，发病率和病情指数较对照分别降低了66.2%和84.8%。（3）通过对经不同时间冷藏后再升温处理的红富士苹果生理变化的研究发现，间歇升温通过刺激乙烯生成，使α-法尼烯和共轭三烯的积累量在贮藏前期较高，在贮藏后期较低；间歇升温提高了果实的抗氧化能力，且贮藏前期显着高于贮藏后期，使果实在贮藏前期保持更高的抵抗与共轭三烯和H2O2积累相关的氧化胁迫的能力，氧化损伤程度低，虎皮病发病较低。其中冷藏4周后升温5d处理对红富士苹果虎皮病的抑制效果最好，发病率和病情指数较对照大约可降低85%和61%。结合虎皮病发病阶段性特点概括认为，间歇升温通过减轻低温诱导发病阶段共轭三烯及ROS等对果实的氧化损伤，有效降低了虎皮病的发生。（4）不同采收期红富士苹果经1-MCP处理后在冷藏过程中硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量及总酚、类黄酮、总抗坏血酸、总谷胱甘肽及总抗氧化能力（TAA）变化表明，无论采收期早晚及贮藏时间长短，1-MCP处理均可以显着提高采后红富士苹果的综合品质。1-MCP处理对红富士苹果果皮中抗氧化物含量及TAA的保持作用显着，但对果肉作用较弱。果皮中TAA与总酚、类黄酮、抗坏血酸和谷胱甘肽含量均显着正相关；而果肉中TAA仅与总酚含量显着相关，与其它抗氧化物不相关。虎皮病与各抗氧化物含量和TAA均显着相关，果皮中TAA值的高低可以用来判定红富士苹果对虎皮病的敏感性。（5）通过对不同采收期红富士苹果经1-MCP和乙烯利处理后在低温贮藏条件下生理变化的研究发现，1-MCP和乙烯利处理对α-法尼烯产生和氧化、H2O2积累及抗氧化能力的作用受果实成熟度的影响。1-MCP处理抑制了α-法尼烯产生和氧化、H2O2积累和虎皮病的发生；降低了成熟度低果实的TAA，但保持了成熟度高果实的TAA。乙烯利处理促进了α-法尼烯产生，但提高了成熟度低果实的TAA，α-法尼烯氧化及H2O2积累量降低，虎皮病发病降低；对成熟度高果实TAA无影响，使α-法尼烯氧化及H2O2积累量增大，虎皮病发病严重。虎皮病的发生并不仅仅依赖α-法尼烯产生或氧化、ROS积累或抗氧化等单一因素；虎皮病发生的氧化胁迫程度取决于与α-法尼烯氧化或共轭三烯积累有关的ROS的产生和清除的平衡。控制α-法尼烯氧化，以避免其氧化过程中产生的ROS诱发氧化胁迫的发生是控制虎皮病发生的关键。（6）对采后第1d、4d和7d使用1-MCP处理的‘Cortland’和‘Delicious’苹果进行重复处理的结果表明，当果实采后经1-MCP立即处理可以有效控制虎皮病发生时，1-MCP重复处理对控制虎皮病发生无额外效果；当1-MCP被延迟使用时，1-MCP重复处理可强化其对虎皮病的抑制作用，但作用效果取决于重复处理的时间，重复处理时间延迟越长，效果越低。1-MCP重复处理通过降低α-法尼烯生成和氧化而控制虎皮病的发生。
二、苹果果肉中抗氰氧化酶(AOX)的分离鉴定（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、苹果果肉中抗氰氧化酶(AOX)的分离鉴定（论文提纲范文）
（1）柑橘贮藏期线粒体响应低氧胁迫的生物学机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表(Abbreviations) |
| 第一章 文献综述 |
| 1 课题的提出 |
| 2 前人研究进展 |
| 2.1 柑橘概述 |
| 2.2 柑橘果实采后损失的成因及防控 |
| 2.2.1 侵染性病害引起的采后损失 |
| 2.2.2 生理紊乱引起的采后损失 |
| 2.2.3 衰老引起的采后损失 |
| 2.2.4 柑橘果实采后减损的措施 |
| 2.3 果实响应低氧胁迫的研究进展 |
| 2.3.1 果实非生物胁迫概述 |
| 2.3.2 果实低氧胁迫的成因 |
| 2.3.3 低氧环境对果实成熟衰老和贮藏品质的影响 |
| 2.3.4 果实对低氧胁迫的应答机理 |
| 2.4 线粒体与果实成熟衰老及胁迫响应 |
| 2.4.1 线粒体概述 |
| 2.4.2 线粒体与果实能量代谢 |
| 2.4.3 线粒体与果实初生和次生代谢 |
| 2.4.4 线粒体与果实活性氧代谢 |
| 2.4.5 线粒体与果实胁迫响应 |
| 2.5 植物线粒体分离纯化技术及应用 |
| 2.5.1 植物线粒体分离纯化及纯度评价 |
| 2.5.2 果实线粒体分离纯化 |
| 2.5.3 果实线粒体分离纯化的难点及关键点 |
| 2.5.4 制备线粒体在果实成熟衰老研究中的应用 |
| 3 本研究的目的和内容 |
| 第二章 柑橘果肉高纯度线粒体的制备 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 果肉线粒体分离和纯化 |
| 2.2.2 线粒体蛋白的提取 |
| 2.2.3 线粒体纯度的评价 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 柑橘果肉线粒体分离纯化体系的建立 |
| 3.2 柑橘果肉线粒体纯度评价 |
| 4 讨论 |
| 4.1 柑橘果肉高纯度线粒体提纯体系的优化 |
| 4.2 柑橘果肉线粒体的纯度评价 |
| 5 小结 |
| 第三章 不同柑橘果实线粒体蛋白组的表征和比较 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 果肉线粒体分离和纯化 |
| 2.2.2 线粒体蛋白的提取 |
| 2.2.3 质谱样品制备及分析 |
| 2.2.4 线粒体蛋白的鉴定 |
| 2.2.5 生物信息学分析 |
| 2.2.6 候选蛋白的亚细胞定位分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 柑橘果肉线粒体蛋白组的表征 |
| 3.2 柑橘果肉线粒体蛋白组的亚细胞定位评估 |
| 3.3 不同品种线粒体蛋白组的定量分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 不同柑橘果肉线粒体蛋白组的比较 |
| 4.2 不同植物线粒体蛋白组的比较 |
| 5 小结 |
| 第四章 涂蜡处理后柑橘线粒体响应低氧胁迫的生物学机制 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 采后涂蜡处理及取样 |
| 2.2.2 失重率测定 |
| 2.2.3 呼吸速率测定 |
| 2.2.4 可溶性固形物和可滴定酸含量测定 |
| 2.2.5 异味物质含量测定 |
| 2.2.6 初生代谢物含量测定 |
| 2.2.7 ATP、ADP和 AMP含量测定 |
| 2.2.8 NAD(H)和NADP(H)含量测定 |
| 2.2.9 果肉原生质体分离及线粒体染色 |
| 2.2.10 线粒体的分离和纯化 |
| 2.2.11 线粒体超微结构观察 |
| 2.2.12 线粒体蛋白的提取 |
| 2.2.13 质谱样品制备及分析 |
| 2.2.14 线粒体蛋白的鉴定 |
| 2.2.15 生物信息学分析 |
| 2.2.16 候选蛋白的亚细胞定位分析 |
| 2.2.17 数据处理与统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 涂蜡处理对果实生理和品质的影响 |
| 3.2 涂蜡处理对果实初生代谢物的影响 |
| 3.3 涂蜡处理对果实线粒体形态和超微结构的影响 |
| 3.4 涂蜡处理对果实能量状态和氧化还原性能的影响 |
| 3.5 涂蜡果实线粒体蛋白组表征 |
| 3.6 基因共表达网络分析筛选响应低氧胁迫的关键蛋白 |
| 3.7 候选蛋白的亚细胞定位分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 采后涂蜡对果实贮藏品质的影响 |
| 4.2 低氧胁迫对线粒体结构及生理生化特性的影响 |
| 4.3 低氧胁迫对线粒体代谢的影响 |
| 5 小结 |
| 第五章 柑橘Cit12Cys2 响应低氧胁迫的功能解析 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 植物材料低氧处理及取样 |
| 2.2.2 果实生理和品质指标测定 |
| 2.2.3 RNA提取、cDNA合成及实时定量PCR分析 |
| 2.2.4 生物信息学分析 |
| 2.2.5 基因克隆及序列分析 |
| 2.2.6 DNA提取、启动子克隆及序列分析 |
| 2.2.7 载体构建 |
| 2.2.8 植物材料遗传转化 |
| 2.2.9 转基因材料阳性鉴定和表达量分析 |
| 2.2.10 转基因材料抗性评价 |
| 2.2.11 启动子活性分析 |
| 2.2.12 数据处理与统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 低氧处理对果实生理和品质的影响 |
| 3.2 低氧处理对Cit12Cys表达的影响 |
| 3.3 柑橘CHCH家族蛋白的序列分析 |
| 3.4 Cit12Cys全长克隆及序列分析 |
| 3.5 Cit12Cys2 转化柑橘愈伤功能分析 |
| 3.5.1 H_2O_2含量测定 |
| 3.6 Cit12Cys2 转化拟南芥功能分析 |
| 3.6.1 转基因拟南芥低氧耐受能力分析 |
| 3.7 Cit12Cys启动子活性分析 |
| 3.7.1 Cit12Cys启动子克隆及序列分析 |
| 3.7.2 瞬时转化烟草验证启动子活性 |
| 3.7.3 稳定转化愈伤验证启动子活性 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第六章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录A 部分溶液和培养基配方 |
| 附录B 部分实验图表 |
| 附录C 第二章和第三章亚细胞定位实验所用引物 |
| 附录D 博士期间研究成果 |
| 致谢 |
（2）果蔬酶促褐变机理的研究进展（论文提纲范文）
| 1 PPO相关研究进展 |
| 1.1 PPO分类 |
| 1.2 PPO催化位点 |
| 1.3 PPO提取、分离、纯化、纯度鉴定、活性测定的方法 |
| 2 酚类底物相关研究进展 |
| 2.1 多酚种类 |
| 2.2 影响植物组织多酚种类和含量变化的因素 |
| 3 酚类化合物的酶促氧化 |
| 3.1 醌的生成途径及其次级代谢 |
| 3.1.1 醌的不同生成途径 |
| 3.1.2 醌的耦合氧化反应 |
| 3.1.2. 1 醌与酚类化合物的耦合氧化 |
| 3.1.2. 2 醌与非酚类化合物的耦合氧化 |
| 3.1.2. 3 醌与蛋白质的相互作用 |
| 3.2 氧化终产物特性 |
| 4 褐变抑制剂控制酶促褐变的机理研究 |
| 5 结语 |
（3）1-MCP处理对苹果后熟衰老过程中SOD家族基因表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 苹果采后贮藏特性 |
| 1.2 植物中SOD的研究进展 |
| 1.2.1 SOD的分类及性质 |
| 1.2.2 SOD与植物活性氧代谢 |
| 1.2.3 植物SOD分子克隆研究进展 |
| 1.3 植物SOD活性及其基因表达的调控 |
| 1.3.1 不同植物激素对SOD活性及其基因表达的调控 |
| 1.3.2 逆境胁迫对植物SOD活性及其基因表达的调控 |
| 1.4 1-MCP在果蔬采后保鲜上的研究进展 |
| 1.4.1 1-MCP的性质及作用机理 |
| 1.4.2 1-MCP对果蔬采后贮藏品质的影响 |
| 1.4.3 1-MCP对果蔬采后生理的影响 |
| 1.5 研究背景、意义及内容 |
| 1.5.1 研究背景及意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 第二章 1-MCP处理对苹果采后贮藏品质及活性氧相关代谢的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 仪器与设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 处理 |
| 2.2.2 取样 |
| 2.2.3 果肉硬度测定 |
| 2.2.4 SSC测定 |
| 2.2.5 乙烯释放速率测定 |
| 2.2.6 呼吸速率测定 |
| 2.2.7 O_2~(·-)产生速率测定 |
| 2.2.8 H_2O_2 含量测定 |
| 2.2.9 SOD活性测定 |
| 2.2.10 MDA含量测定 |
| 2.2.11 数据分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 1-MCP处理对苹果果肉硬度的影响 |
| 2.3.2 1-MCP处理对苹果果实乙烯释放速率的影响 |
| 2.3.3 1-MCP处理对苹果果实呼吸速率的影响 |
| 2.3.4 1-MCP处理对苹果果实可溶性固形物含量(SSC)的影响 |
| 2.3.5 1-MCP处理对苹果果实超氧阴离子(O_2~(·-))产生速率的影响 |
| 2.3.6 1-MCP处理对苹果果实H_2O_2 含量的影响 |
| 2.3.7 1-MCP处理对苹果果实SOD活性的影响 |
| 2.3.8 1-MCP处理对苹果果实MDA含量的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 苹果果实成熟衰老过程中SOD基因家族成员的分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 仪器与设备 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 果肉和果皮总RNA提取 |
| 3.2.2 果肉和果皮RNA浓度检测 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶制作 |
| 3.2.4 RNA完整性及纯度检测 |
| 3.2.5 cDNA链的合成 |
| 3.2.6 基因特异引物设计 |
| 3.2.7 SOD基因家族成员筛选 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 1-MCP处理对采后苹果果实成熟衰老过程中SOD基因家族成员表达的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 仪器与设备 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 果实总RNA的提取 |
| 4.2.2 果肉和果皮RNA浓度和纯度检测 |
| 4.2.3 cDNA第一链的合成 |
| 4.2.4 引物设计与退火温度筛选 |
| 4.2.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) |
| 4.2.6 数据分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 1-MCP处理对苹果果肉Cu/ZnSODs基因表达的影响 |
| 4.3.2 1-MCP处理对苹果果肉MnSODs和Mn/FeSOD基因表达的影响 |
| 4.3.3 1-MCP处理对苹果果皮Cu/ZnSODs基因表达量的影响 |
| 4.3.4 1-MCP处理对苹果果皮MnSODs和FeSODs基因表达的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 结论、创新点与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词中英文对照表 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（4）苹果的深加工技术与综合利用研究（论文提纲范文）
| 1 苹果皮的研究进展 |
| 1.1 色素的提取 |
| 1.2 香精的回收 |
| 1.3 苹果皮果醋的研制 |
| 1.4 其他方面 |
| 2 苹果果肉的利用研究 |
| 2.1 果汁类产品的加工 |
| 2.2 苹果酒的生产 |
| 2.3 苹果罐头 |
| 2.4 苹果脯 |
| 2.5 苹果脆片 |
| 3 苹果渣的开发利用 |
| 3.1 加工生产饲料 |
| 3.2 食用菌的生产 |
| 3.3 发酵生产酒精类产物[15] |
| 3.4 酶解制备柠檬酸 |
| 3.5 制取果胶 |
| 3.6 加工制备苹果纤维粉 |
| 3.7 提取天然防腐剂——果胶酶解物 |
| 3.8 生产带肉果汁 |
| 4 苹果果籽的研究进展 |
| 4.1 苹果果籽的成分分析 |
| 4.2 苹果籽油的提取 |
| 5 展望 |
（5）绿原酸对油桃和苹果果实采后成熟衰老的调控作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述与立题依据 |
| 1.1 植物多酚生物活性研究进展 |
| 1.1.1 抗氧化、抗衰老 |
| 1.1.2 抑菌消炎 |
| 1.1.3 预防心血管疾病 |
| 1.1.4 抗肿瘤抗诱变 |
| 1.1.5 降脂降血糖 |
| 1.1.6 改善认知 |
| 1.1.7 防晒 |
| 1.2 酚类物质在果实中研究进展 |
| 1.2.1 果实中酚类物质的组成与含量 |
| 1.2.2 果实贮藏过程中酚类物质的变化 |
| 1.2.3 多酚类物质与果实抗逆境之间的关系 |
| 1.2.4 多酚类物质与果实褐变之间关系 |
| 1.2.5 酚类物质与果实病害之间的关系 |
| 1.2.6 酚类物质在果实采后贮藏中的应用 |
| 1.3 果实在成熟衰老过程中的生理生化变化的研究进展 |
| 1.3.1 乙烯释放量与呼吸速率 |
| 1.3.2 品质指标 |
| 1.3.3 活性氧代谢 |
| 1.4 果实成熟衰老过程中蛋白表达研究进展 |
| 1.4.1 果实样品蛋白质制备 |
| 1.4.2 质谱技术 |
| 1.4.3 果实成熟衰老相关蛋白的研究 |
| 1.4.4 采后处理对果实成熟衰老过程中蛋白表达的影响 |
| 1.5 本课题的研究目的与意义 |
| 1.6 本课题的研究内容 |
| 1.6.1 绿原酸对油桃果实采后品质及抗氧化能力的影响 |
| 1.6.2 绿原酸处理对采后油桃蛋白表达的调控作用 |
| 1.6.3 苹果内源多酚与内源蛋白亲和作用的iTRAQ蛋白组分析 |
| 1.6.4 绿原酸对苹果衰老的调节作用 |
| 第二章 绿原酸对油桃采后品质及抗氧化能力的影响 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与试剂 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 试剂与仪器 |
| 2.2.3 油桃果肉组织切片制备与处理 |
| 2.2.4 油桃果肉组织切片生理指标的测定 |
| 2.2.5 油桃果实的处理 |
| 2.2.6 油桃果实采后呼吸速率和乙烯释放量的测定 |
| 2.2.7 油桃果实品质的测定 |
| 2.2.8 酚含量及抗氧化能力分析 |
| 2.2.9 数据统计和分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 油桃自身酚类物质对油桃果肉切片的作用 |
| 2.3.2 绿原酸对油桃果实乙烯释放量和呼吸速率的影响 |
| 2.3.3 绿原酸对油桃果实品质的影响 |
| 2.3.4 绿原酸对油桃果实中酚类含量变化的影响 |
| 2.3.5 绿原酸对油桃果实抗氧化能力的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 总结 |
| 第三章 绿原酸对采后油桃蛋白表达的调控作用 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 试剂与仪器 |
| 3.2.3 油桃果实处理 |
| 3.2.4 蛋白质提取 |
| 3.2.5 双向电泳 |
| 3.2.6 凝胶的图像采集与分析 |
| 3.2.7 质谱分析 |
| 3.2.8 数据统计和分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 油桃果实成熟过程中蛋白组变化 |
| 3.3.2 蛋白质亚细胞定位推测 |
| 3.3.3 油桃果实中受绿原酸调控与能量代谢相关的蛋白 |
| 3.3.4 油桃果实中受绿原酸调控与应激反应相关的蛋白 |
| 3.3.5 油桃果实中受绿原酸调控与碳水化合物代谢相关的蛋白 |
| 3.3.6 油桃果实中受绿原酸调控与果实软化和乙烯代谢相关的蛋白 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 总结 |
| 第四章 苹果内源多酚与内源蛋白亲和作用的iTRAQ蛋白组分析 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 试剂与仪器 |
| 4.2.3 蛋白质提取 |
| 4.2.4 苹果酚类物质提取 |
| 4.2.5 酚类物质与蛋白质结合反应 |
| 4.2.6 SDS-PAGE(十二烷基苯磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶)电泳分析 |
| 4.2.7 iTRAQ定量蛋白组学实验方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 提取pH值对油桃果实果肉组织蛋白提取的影响 |
| 4.3.2 PVPP添加量对油桃果实果肉组织蛋白提取的影响 |
| 4.3.3 透析与离心处理对油桃果实果肉组织蛋白提取的影响 |
| 4.3.4 简单提取法与酚提取法对油桃果实果肉组织蛋白提取的比较 |
| 4.3.5 简单提取法在不同果实果肉组织蛋白提取中的应用 |
| 4.3.6 SDS-PAGE分析苹果果肉组织中与苹果多酚结合蛋白质 |
| 4.3.7 iTRAQ定量蛋白组分析苹果果肉组织中与苹果多酚结合的蛋白质 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 绿原酸对苹果衰老的调节作用 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 材料 |
| 5.2.2 试剂与仪器 |
| 5.2.3 苹果果肉组织切片制备与处理 |
| 5.2.4 苹果果肉组织切片生理指标的测定 |
| 5.2.5 酚含量分析 |
| 5.2.6 蛋白质提取以及聚丙烯凝胶电泳分析 |
| 5.2.7 目标蛋白质谱分析 |
| 5.2.8 多克隆抗体的制备 |
| 5.2.9 Western blotting免疫印迹 |
| 5.2.10 成熟衰老相关酶的提取和测定 |
| 5.2.11 "富士"苹果果肉多酚和绿原酸对成熟衰老相关酶的活性的影响 |
| 5.2.12 数据统计和分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 "黄元帅"苹果果肉组织中酚类 |
| 5.3.2 绿原酸对"黄元帅"果肉切片衰老的作用 |
| 5.3.3 SDS-PAGE与native-PAGE条带二次电泳识别"黄元帅"苹果果肉切片中衰老相关蛋白 |
| 5.3.4 "黄元帅"苹果果肉切片中衰老相关蛋白的质谱分析 |
| 5.3.5 绿原酸对"黄元帅"苹果果肉切片中衰老相关蛋白含量和酶活性的影响 |
| 5.3.6 多酚提取液(APE)与绿原酸(CHA)对苹果成熟衰老相关酶类活性的影响 |
| 5.3.7 绿原酸对"富士"苹果果肉切片孵育过程中衰老相关酶类活性的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 总结 |
| 第六章 全文总结与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简介 |
（6）库尔勒香梨果实发育及采后糖代谢与呼吸代谢关系的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 新疆库尔勒香梨产业概况与研究现状 |
| 1.2 库尔勒香梨果实的品质特征 |
| 1.2.1 果实质量与外观特征 |
| 1.2.2 果实的内在品质特征 |
| 1.3 果实的糖代谢 |
| 1.3.1 果实发育过程中糖分的来源、运转与积累 |
| 1.3.2 果实采后糖分的变化 |
| 1.3.3 果实糖分的代谢转化与代谢酶 |
| 1.4 果实的呼吸代谢 |
| 1.4.1 果实的呼吸类型与呼吸途径的多样性 |
| 1.4.2 呼吸代谢酶 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 第2章 库尔勒香梨果实发育过程中外观品质与糖代谢生理的变化 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 果实发育过程中不同部位质量和体积的变化 |
| 2.2.2 果实发育过程中表皮色泽与果肉硬度的变化 |
| 2.2.3 可溶性糖组分高效液相色谱法（HPLC）的分离和测定效果 |
| 2.2.4 果实发育过程中可溶性糖组分含量的变化特征 |
| 2.2.5 果实发育过程中不同部位糖组分的差异 |
| 2.2.6 果实发育过程中不同部位的糖代谢酶活性变化特征 |
| 2.3 小结与讨论 |
| 第3章 库尔勒香梨果实发育过程中呼吸代谢的变化 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 果实发育过程中不同途径呼吸速率的变化特征 |
| 3.2.2 果实发育过程中不同部位的呼吸主路径差异 |
| 3.2.3 果实发育过程中呼吸代谢酶活性的变化 |
| 3.3 小结与讨论 |
| 第4章 库尔勒香梨果实发育过程中糖代谢与呼吸代谢的响应 |
| 4.1 方法 |
| 4.1.1 分阶聚类（Hierarchical Cluster） |
| 4.1.2 主成分分析（Principal component analysis） |
| 4.1.3 糖代谢和呼吸代谢关联机制的分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 果实发育过程中糖代谢与呼吸代谢的响应 |
| 4.2.2 果实发育成熟过程糖代谢与呼吸代谢的关联机制 |
| 4.3 小结与讨论 |
| 第5章 库尔勒香梨不同成熟度果实采后外观品质与糖代谢变化 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 不同成熟度果实采后外观品质的变化 |
| 5.2.2 不同成熟度果实采后糖组分含量的变化 |
| 5.2.3 不同成熟度果实采后糖组分差异 |
| 5.2.4 不同成熟度果实采后糖代谢酶活性的差异 |
| 5.3 小结与讨论 |
| 第6章 库尔勒香梨不同成熟度果实采后呼吸代谢的变化和差异 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 成熟度1果实采后的呼吸速率变化 |
| 6.2.2 成熟度2果实采后呼吸速率的变化 |
| 6.2.3 成熟度3果实采后呼吸速率的变化 |
| 6.2.4 不同成熟度果实采后不同途径呼吸的强弱差异 |
| 6.2.5 不同成熟度果实采后不同途径呼吸的模型拟合 |
| 6.2.6 不同成熟度果实采后呼吸代谢酶活性的差异 |
| 6.3 小结与讨论 |
| 第7章 库尔勒香梨不同成熟度果实采后糖代谢与呼吸代谢响应特征的差异 |
| 7.1 方法 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 不同成熟度果实采后果心糖代谢与呼吸代谢响应特征的差异 |
| 7.2.2 不同成熟度果实采后果肉糖代谢与呼吸代谢响应特征的差异 |
| 7.2.3 不同成熟度果实采后果皮糖代谢与呼吸代谢响应特征的差异 |
| 7.3 小结与讨论 |
| 第8章 结论与展望 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）桃果实成熟期间及采后NO处理的蛋白质组学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 果实成熟过程中生理生化和分子机制相关研究 |
| 1.1 呼吸代谢 |
| 1.2 乙烯的变化 |
| 1.3 活性氧代谢 |
| 1.4 碳水化合物代谢 |
| 1.5 细胞壁代谢 |
| 2 采后处理技术 |
| 2.1 热处理 |
| 2.2 1-MCP |
| 2.3 NO |
| 3 蛋白质组学与果实成熟衰老 |
| 3.1 果实成熟衰老机制 |
| 3.2 采后处理技术调控果实成熟衰老机制 |
| 4 本文的研究目的和主要内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 桃果实成熟期间蛋白表达的变化研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 样品制备 |
| 1.3 SDS电泳 |
| 1.4 蛋白质酶解 |
| 1.5 iTRAQ标记 |
| 1.6 SCX分离 |
| 1.7 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MSMS分析 |
| 1.8 质谱数据处理与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 果实成熟期间差异蛋白数量与类别及变化 |
| 2.2 不同贮藏期差异蛋白数量与类别 |
| 2.3 差异蛋白的功能分类 |
| 3 讨论 |
| 3.1 参与能源产生与转化的蛋白 |
| 3.2 参与氨基酸运输与代谢的蛋白 |
| 3.3 参与碳水化合物运输与代谢的蛋白 |
| 3.4 参与脂类运输与代谢的蛋白 |
| 3.5 参与翻译、核糖体结构和生物合成的蛋白 |
| 3.6 参与胞壁/膜生物发生的蛋白 |
| 3.7 参与蛋白质翻译后修饰与转运、分子伴侣的蛋白 |
| 3.8 参与信号转导机制的蛋白 |
| 3.9 参与其他功能的蛋白 |
| 3.10 成熟期间桃果实差异蛋白功能分析 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 NO处理对采后成熟桃果实蛋白质组变化的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料处理 |
| 1.2 化学试剂 |
| 1.3 仪器设备 |
| 1.4 蛋白质的分离提取 |
| 1.5 等电聚焦和双向电泳 |
| 1.6 凝胶的图像采集与分析 |
| 1.7 蛋白质谱鉴定与数据处理与统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 参与胁迫响应和防御的蛋白质 |
| 3.2 参与乙烯合成的蛋白 |
| 3.3 参与呼吸作用的蛋白质 |
| 3.4 参与细胞结构的蛋白 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 存在的问题及展望 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 致谢 |
| 博士学习期间发表的学术论文 |
（8）不同温度和含氧量对猕猴桃采后生理及能量相关基因表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表及中英文对照 |
| 目录 |
| 1 前言 |
| 1.1 植物体内的能量及能量代谢 |
| 1.2 能量代谢与园艺作物采后衰老 |
| 1.3 能量代谢的调节研究 |
| 1.4 猕猴桃采后生物学研究概况 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验处理 |
| 2.3 猕猴桃硬度和 TSS 的测定 |
| 2.4 猕猴桃呼吸速率的测定 |
| 2.5 猕猴桃乙烯产生速率的测定 |
| 2.6 猕猴桃能量（ATP、ADP、AMP）的测定 |
| 2.7 猕猴桃能量相关基因 cDNA 分离 |
| 2.8 猕猴桃能量相关基因 cDNA3 末端克隆 |
| 2.9 猕猴桃能量相关基因荧光定量表达 |
| 2.10 数据统计处理方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 贮藏温度对猕猴桃采后生理及能量调控的影响 |
| 3.2 长期 N_2、O_2处理对猕猴桃采后生理及能量调控的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 猕猴桃采后能量代谢与果实成熟衰老的关系 |
| 4.2 猕猴桃采后能量代谢与呼吸的关系 |
| 4.3 猕猴桃采后能量代谢调节 |
| 4.4 研究展望 |
| 4.5 本研究的创新之处 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 在学期间发表论文清单 |
| 致谢 |
（9）交替氧化酶的原核表达、纯化及活性研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 质粒转化大肠杆菌 |
| 1.2.2 交替氧化酶融合蛋白表达 |
| 1.2.3 可溶性膜蛋白的制备 (大肠杆菌膜的溶解) |
| 1.2.4 可溶蛋白纯化 |
| 1.2.5 纯化蛋白活性测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 交替氧化酶的原核表达 |
| 2.2 交替氧化酶的纯化 |
| 3 结论 |
（10）采后处理对苹果虎皮病防治效果及机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 苹果虎皮病简介 |
| 1.2 虎皮病研究进展 |
| 1.2.1 虎皮病的症状特点及发病规律 |
| 1.2.2 虎皮病发病机理研究进展 |
| 1.3 影响虎皮病发病的因素研究 |
| 1.3.1 品种敏感性 |
| 1.3.2 采前因素 |
| 1.3.3 采后因素 |
| 1.4 虎皮病的防治措施 |
| 1.4.1 化学防治 |
| 1.4.2 非化学防治 |
| 1.5 研究的目的、意义和主要内容 |
| 1.5.1 目的和意义 |
| 1.5.2 主要研究内容 |
| 第二章 基于不同采收成熟度的苹果虎皮病发病进程研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料及处理 |
| 2.1.2 试剂与药品 |
| 2.1.3 仪器与设备 |
| 2.1.4 测定指标及方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 冷藏条件下不同采收成熟度苹果虎皮病发病状况及相关生理指标的变化 |
| 2.2.2 常温条件下不同采收成熟度苹果虎皮病发病状况及相关生理指标的变化 |
| 2.2.3 发病组织和正常组织的生理差异 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 冷藏条件下虎皮病发生状况与 H_2O_2、MDA 和 PPO 的关系 |
| 2.3.2 常温条件下虎皮病发生状况与 H_2O_2、MDA 和 PPO 的关系 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 壳聚糖涂膜处理对苹果虎皮病防治效果及机理 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料及处理 |
| 3.1.2 试剂与药品 |
| 3.1.3 仪器与设备 |
| 3.1.4 测定指标及方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 壳聚糖涂膜处理对虎皮病发病率和病情指数的影响 |
| 3.2.2 壳聚糖涂膜处理对呼吸强度和乙烯释放量的影响 |
| 3.2.3 壳聚糖涂膜处理对α-法尼烯和共轭三烯含量的影响 |
| 3.2.4 壳聚糖涂膜处理对 MDA 含量和细胞膜透性的影响 |
| 3.2.5 壳聚糖涂膜处理对 PPO 活性的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 间歇升温处理对苹果虎皮病防治效果及机理 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料及处理 |
| 4.1.2 试剂与药品 |
| 4.1.3 仪器与设备 |
| 4.1.4 测定指标及方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 间歇升温处理对虎皮病发病状况的影响 |
| 4.2.2 间歇升温处理对内源乙烯含量的影响 |
| 4.2.3 间歇升温处理对α-法尼烯和共轭三烯含量的影响 |
| 4.2.4 间歇升温处理对抗氧化酶活性的影响 |
| 4.2.5 间歇升温处理对总酚含量和 TAA 的影响 |
| 4.2.6 间歇升温处理对共轭三烯、H_2O_2和 MDA 含量的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 间歇升温对乙烯、α-法尼烯和共轭三烯的影响 |
| 4.3.2 间歇升温对氧化胁迫和抗氧化的影响 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 1-MCP 处理对苹果贮藏品质及抗氧化性的影响 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料及处理 |
| 5.1.2 试剂与药品 |
| 5.1.3 仪器与设备 |
| 5.1.4 测定指标及方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 1-MCP 处理对红富士苹果贮藏品质的影响 |
| 5.2.2 1-MCP 处理对红富士苹果抗氧化物含量及 TAA 的影响 |
| 5.2.3 红富士苹果综合品质的主成分分析 |
| 5.2.4 相关性分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 1-MCP 和乙烯利处理对苹果虎皮病防治效果及机理 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 材料及处理 |
| 6.1.2 试剂与药品 |
| 6.1.3 仪器与设备 |
| 6.1.4 测定指标及方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 1-MCP 和乙烯利处理对虎皮病发病状况的影响 |
| 6.2.2 1-MCP 和乙烯利处理对内源乙烯含量的影响 |
| 6.2.3 1-MCP 和乙烯利处理对α-法尼烯含量的影响 |
| 6.2.4 1-MCP 和乙烯利处理对共轭三烯含量的影响 |
| 6.2.5 1-MCP 和乙烯利处理对 H_2O_2含量的影响 |
| 6.2.6 1-MCP 和乙烯利处理对 TAA 的影响 |
| 6.2.7 1-MCP 和乙烯利处理对抗氧化酶活性的影响 |
| 6.2.8 整个贮藏期内各因素的相关性分析 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 α-法尼烯、共轭三烯和 TAA 的关系 |
| 6.3.2 H_2O_2含量与抗氧化酶活性的关系 |
| 6.4 小结 |
| 第七章 1-MCP 重复处理对苹果虎皮病防治效果及机理 |
| 7.1 材料与方法 |
| 7.1.1 材料及处理 |
| 7.1.2 试剂与药品 |
| 7.1.3 仪器与设备 |
| 7.1.4 测定指标和方法 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 采收时果实内源物含量 |
| 7.2.2 1-MCP 处理对内源乙烯含量的影响 |
| 7.2.3 1-MCP 处理对α-法尼烯和共轭三烯含量的影响 |
| 7.2.4 1-MCP 处理对虎皮病发病状况的影响 |
| 7.2.5 相关性分析 |
| 7.3 讨论 |
| 7.3.1 1-MCP 重复处理对内源乙烯含量的影响 |
| 7.3.2 1-MCP 重复处理对α-法尼烯和共轭三烯含量及虎皮病发生状况的影响 |
| 7.4 小结 |
| 第八章 结论与创新点 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、苹果果肉中抗氰氧化酶(AOX)的分离鉴定（论文参考文献）
- [1]柑橘贮藏期线粒体响应低氧胁迫的生物学机制研究[D]. 李欣. 华中农业大学, 2021
- [2]果蔬酶促褐变机理的研究进展[J]. 李彩云,李洁,严守雷,王清章. 食品科学, 2021(09)
- [3]1-MCP处理对苹果后熟衰老过程中SOD家族基因表达的影响[D]. 张俊虎. 渤海大学, 2020(12)
- [4]苹果的深加工技术与综合利用研究[J]. 李辉,熊丽娇,刘苑琳,杨华,翟明,刘玲彦,柳志杰,许引虎. 酿酒科技, 2019(09)
- [5]绿原酸对油桃和苹果果实采后成熟衰老的调控作用[D]. 奚宇. 中国农业大学, 2017(07)
- [6]库尔勒香梨果实发育及采后糖代谢与呼吸代谢关系的研究[D]. 潘俨. 新疆农业大学, 2016(05)
- [7]桃果实成熟期间及采后NO处理的蛋白质组学研究[D]. 康若祎. 南京农业大学, 2016(01)
- [8]不同温度和含氧量对猕猴桃采后生理及能量相关基因表达的影响[D]. 郭丽芳. 暨南大学, 2013(02)
- [9]交替氧化酶的原核表达、纯化及活性研究[J]. 李彬,齐鑫,贺蔡明,魏冬梅. 江苏农业科学, 2012(12)
- [10]采后处理对苹果虎皮病防治效果及机理研究[D]. 吕新刚. 西北农林科技大学, 2012(06)