一、Expression changes in tau and microtubule-associated proteins in rat testicular interstitium（论文文献综述）
薛帅东[1]（2020）在《含KIF3A的ARF6上游激活诸亚网诱导学习的源头调控分子和知识系统》文中指出本论文从先前建立的GRNInfer分子库中,构建了含KIF3A的人左脑高表达ARF6上游激活诸分子亚网;从先前提取的DAVID知识库中,分别计算了其诸亚网的共同细胞定位和组织分布,提出并验证了如下假说:（1）从质膜微管相关蛋白1B（MAP1B2）到驱动蛋白家族成员3A（KIF3A）诱导的学习,包括H10776亚网特别存在于睾丸|皮肤|婴儿（<3岁）发育|肺|乳房（乳腺）癌|食管肿瘤|睾丸间质性|睾丸间质细胞,和MEIS3P1亚网特别存在于肺|皮肤。（2）从整合膜黑素瘤抑制蛋白3（MIA3）到驱动蛋白家族成员3A（KIF3A）诱导的学习,包括RASGRP1亚网特别存在于胰腺|小肠|肾肿瘤|血液,和SEL1L亚网特别存在于乳房（乳腺）癌。（3）从整合膜 DEAD-box 解旋酶 19A（DDX19A）或 AW043812到驱动蛋白家族成员3A（KIF3A）诱导的学习,包括MAP1B2亚网特别存在于阑尾|睫状神经节|肾|结肠直肠腺癌|嗅球|脑|胚胎发育。（4）从微管蛋白γ复合物相关蛋白4（TUBGCP42）或H10776到驱动蛋白家族成员3A（KIF3A）诱导的学习,包括DDX19A亚网特别存在于脂肪细胞|胎盘|白血病早幼粒细胞（HL60）|肾上腺|淋巴结|胰腺|小肠|肾肿瘤|血液。（5）从H10776到驱动蛋白家族成员3A（KIF3A）诱导的学习,包括SPAG9亚网特别存在于睾丸间质性|睾丸间质细胞|婴儿（<3岁）发育。（6）从正自反馈微管细胞骨架到驱动蛋白家族成员3A（KIF3A）诱导的学习,包括AW043812亚网特别存在于脂肪细胞|白血病早幼粒细胞（HL60）|胎盘|肾上腺|淋巴结。
胡正威[2]（2020）在《CHIP蛋白过表达对阿尔茨海默病和帕金森病小鼠模型的保护作用》文中研究说明背景神经退行性疾病（Neurodegenerative disease,NDD）是一类由神经元变性、死亡引起的疾病,与年龄密切相关。随着人口老龄化的发展,神经退行性疾病的发病率逐渐上升,已成为重要的社会和医疗问题,给患者、家庭和社会造成了沉重的负担。阿尔茨海默病和帕金森病是最常见的两种神经退行性疾病,目前尚无彻底根治或逆转进展的药物,现有的治疗手段仅能缓解疾病相关的临床症状。因此,针对其发病机制和治疗靶点的研究具有重要意义。热休克蛋白70叛基末端相互作用蛋白（Carboxyl terminus of the Hsp70 interacting protein,CHIP）是由STUB1基因编码的蛋白质,在脑、骨骼肌、睾丸、心脏等组织中大量表达。CHIP蛋白同时具有分子伴侣辅因子和E3泛素连接酶功能,是蛋白质质量控制系统中的关键分子。CHIP蛋白能够调节神经元氧化还原过程,应激状态下被募集到线粒体,在生物体能量代谢中具有重要作用。CHIP蛋白异常参与多种神经退行性疾病发病。CHIP蛋白突变可引起认知功能障碍,同时伴有共济失调、性腺发育不全等症状;CHIP点突变大鼠表现出明显的认知功能下降,病理学结果显示海马区神经元丢失,蛋白质组学分析发现CHIP点突变大鼠脑组织中CHIP蛋白水平下降,Tau、PDE9A等与阿尔茨海默病相关的蛋白明显升高。痴呆模型小鼠中,随年龄增长及症状进展,脑组织内CHIP蛋白水平逐渐降低。因此,上调CHIP蛋白表达可能对阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病起到保护作用。腺相关病毒（Adeno-associated virus,AAV）是基因治疗中常用的载体工具,具有安全性高、免疫原性低等特点,能够介导外源基因长期表达。不同血清型AAV的组织亲和性及表达效率有所差异,但由于血脑屏障的存在,载体难以通过血液循环进入中枢神经系统。AAV/BBB是一种可透过血脑屏障的新血清型,其介导CHIP蛋白在大鼠脑组织过表达,能够有效改善实验性脑出血大鼠模型的行为学与病理损伤,但AAV/BBB在神经退行性疾病中的应用尚未见报道。本研究分别采用可透过血脑屏障的腺相关病毒AAV/BBB介导CHIP蛋白在APPswe/PS1AE9阿尔茨海默病小鼠模型和MPTP诱导的帕金森病小鼠模型中过表达,研究CHIP蛋白过表达对这两种动物模型行为学、病理学和相关蛋白的影响,探讨CHIP蛋白对阿尔茨海默病、帕金森病的保护作用。目的1.使用AAV载体介导CHIP蛋白在APPswe/PS1ΔE9阿尔茨海默病小鼠模型中过表达,分析CHIP蛋白对阿尔茨海默病模型小鼠行为学、组织病理学和蛋白表达水平的影响;2.使用AAV载体介导CHIP蛋白在野生型小鼠中过表达,而后构建MPTP诱导的急性帕金森病动物模型,研究CHIP蛋白对帕金森病小鼠行为学、组织病理学和蛋白表达水平的影响。方法1.尾静脉注射AAV介导CHIP蛋白在小鼠脑组织中过表达;2.筑巢实验、Morris水迷宫实验检测APPswe/PS1ΔE9小鼠行为学变化,爬杆实验、疲劳转棒实验、旷场实验检测MPTP诱导急性帕金森病小鼠的行为学改变;3.免疫荧光、免疫组化检测两种动物模型的组织病理学改变,rt-PCR、Western Blot检测mRNA及蛋白表达水平。结果1.通过尾静脉注射AAV/BBB载体病毒使CHIP蛋白在APPswe/PSΔE9阿尔茨海默病模型小鼠脑组织中过表达;2.行为学实验中,CHIP蛋白过表达改善了 APPswe/PS1ΔE9小鼠筑巢能力,缩短了 Morris水迷宫定位航行实验潜伏期,增加了空间探索实验中穿越平台所在位置的次数;3.CHIP蛋白过表达减少了 APPswe/PS1ΔE9小鼠皮质与海马中淀粉样斑块,降低了 Aβ、Tau蛋白、磷酸化Tau蛋白水平;4.CHIP蛋白过表达抑制β-分泌酶BACE1水平,对α-分泌酶ADAM10、Y-分泌酶PS1、Aβ降解酶IDE、NEP没有显着影响;5.通过尾静脉注射AAV/BBB载体病毒使CHIP蛋白在野生型小鼠脑组织中过表达,腹腔注射MPTP后成功构建急性帕金森病小鼠模型;6.CHIP蛋白过表达不影响野生型小鼠行为学表现,缩短了 MPTP诱导的急性帕金森病小鼠爬杆实验所用时间,疲劳转棒实验掉落潜伏期延长、旷场实验中自发活动增加;7.CHIP蛋白过表达能够改善MPTP引起的中脑黑质区多巴胺能神经元死亡、TH蛋白降低;8.CHIP蛋白过表达能够抑制MPTP引起的中脑黑质及纹状体线粒体分裂相关蛋白DRP1水平升高。结论1.CHIP蛋白过表达能够提高APPswe/PS1ΔE9阿尔茨海默病模型小鼠的社会行为与认知功能,改善阿尔茨海默病相关蛋白的表达及组织病理学表现,对阿尔茨海默病模型小鼠具有保护作用;2.CHIP蛋白过表达能够改善MPTP引起的小鼠运动功能障碍,减轻多巴胺能神经元损伤,抑制线粒体分裂相关蛋白DRP1升高,对MPTP诱导的急性帕金森病小鼠模型具有保护作用。
杨永妍[3]（2020）在《睾酮通过调节GSK3β减轻七氟烷导致的Tau磷酸化及认知障碍》文中指出七氟烷（Sevoflurane）麻醉引起Tau蛋白过度磷酸化和认知障碍是七氟烷的神经毒性重点研究的机制之一,其可能途径之一是通过增强GSK3β激酶活性及引起GSK3β和Tau之间的相互作用增强。睾酮水平影响着男性的认知能力表现,有研究指出睾酮对GSK3β的磷酸化存在调节作用,此外我们推测睾酮可能影响GSK3β和Tau之间的相互作用。相对于成年小鼠,七氟烷对幼年小鼠的Tau磷酸化和认知功能损伤更严重,因此小鼠自出生到青春期期间睾酮保护作用不足可能是导致幼年小鼠对麻醉药物损伤的敏感性更高的原因之一。本课题以GSK3β激酶活性及蛋白结合力两个机制为切入点,利用动物及细胞七氟烷麻醉模型及睾酮给药预处理,探索睾酮对多次七氟烷麻醉引起的Tau蛋白过度磷酸化、幼年小鼠认知功能改变及神经功能损伤的保护作用,并深入探究其调节GSK3β的分子机制。实验一:幼年及成年小鼠中睾酮的含量差异及多次七氟烷麻醉对Tau蛋白表达、认知功能的不同影响目的:本实验拟探讨幼年（Postnatal day 6,P6）及成年（P60）雄性C57BL/6小鼠中睾酮的含量差异及多次七氟烷麻醉（2h×3d）对幼年小鼠及成年小鼠大脑Tau蛋白表达及磷酸化、认知功能的不同影响。方法:将P6幼年雄性小鼠及P60成年雄性小鼠分别随机分为2组:对照组（Control）和麻醉组（Sevoflurane）。麻醉组连续3天给予3%七氟烷麻醉2小时,对照组在同样条件下连续3天吸入40%O22小时。各组进行对照或麻醉处理后当日（幼年P8,成年P62）取脑组织应用Western blot检测Tau-Ser202/Thr205及total Tau蛋白表达情况,应用ELISA检测各组小鼠的睾酮激素水平,应用Morris水迷宫检测小鼠认知功能情况。此外,为了记录C57BL/6小鼠自出生至成年（P60）阶段的脑组织睾酮激素水平的变化趋势,选取P0-60的多个时间点处死小鼠取脑,应用ELISA技术检测睾酮激素水平。结果:1.多次七氟烷麻醉使幼年雄性小鼠脑组织中Tau-Ser202/Thr205磷酸化明显升高,而成年雄性小鼠脑组织中Tau-Ser202/Thr205磷酸化水平无改变;2.Morris水迷宫实验中,多次七氟烷麻醉使幼年雄性小鼠出现学习记忆等认知功能损伤,而对成年小鼠无影响;3.P6雄性小鼠的大脑海马区组织睾酮含量远远低于成年雄性小鼠（P60）脑组织中的睾酮含量;4.连续3天七氟烷麻醉对小鼠的脑组织睾酮含量没有明显作用;5.随着年龄增长,小鼠脑组织睾酮变化趋势为:新生0-1天,脑组织睾酮含量较高,之后迅速降低,在P6-10天约为P60小鼠的14%,自P25-30开始明显回升,P40左右达到高峰,逐渐稳定。结论:多次七氟烷麻醉可造成幼年（P6）小鼠的Tau蛋白过度磷酸化和远期认知功能障碍,而对P60小鼠没有影响。P6小鼠大脑睾酮含量明显低于P60小鼠,且幼年期睾酮水平始终处于低值。因此,幼年小鼠易受七氟烷麻醉神经毒性损伤可能与其睾酮激素水平不足有关。实验二:睾酮对多次七氟烷麻醉引起的SH-Sy5y细胞系及原代神经元Tau蛋白磷酸化异常、细胞功能损伤的保护作用目的:本实验拟探讨七氟烷麻醉通过调节GSK3β激酶活性对SH-Sy5y细胞系及原代神经元的Tau蛋白表达及磷酸化、细胞活性及功能的损伤以及睾酮在此机制中的保护作用。方法:1.SH-Sy5y细胞:首先确定睾酮给药浓度,之后随机将SH-Sy5y细胞分为对照组（Control+Vehicle）、对照+睾酮组（Control+Testosterone）、麻醉组（Sevoflurane+Vehicle）和麻醉+睾酮组（Sevoflurane+Testosterone）4组,对照+睾酮组及麻醉+睾酮组给予100n M睾酮,预处理1小时后麻醉组及麻醉+睾酮组4%七氟烷麻醉6小时,对照组及对照+睾酮组置于培养箱中,停止麻醉后,各组应用Western blot技术检测Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262、total Tau、GSK3β-Ser 9、GSK3β-Tyr 216、total GSK3β蛋白表达水平,应用免疫荧光技术检测Tau-Ser202/Thr205蛋白表达水平,应用Live/dead细胞活性试剂盒检测细胞活性。2.原代神经元细胞:随机将神经元细胞分为对照组、对照+睾酮组、麻醉组和麻醉+睾酮组4组。对照+睾酮组及麻醉+睾酮组给予100n M睾酮,孵育1小时后对麻醉组及麻醉+睾酮组进行3%七氟烷麻醉2小时,对照组及对照+睾酮组置于培养箱,连续3天处理后各组应用Western blot技术检测Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262、total Tau、GSK3β-Ser 9、GSK3β-Tyr 216、total GSK3β、PSD-95蛋白表达水平,应用免疫荧光技术检测Tau-Ser202/Thr205蛋白表达水平,应用Live/dead细胞活性试剂盒检测细胞活性,应用全细胞膜片钳技术记录各组细胞兴奋性突触后电流（s EPSCs）的活动情况。结果:1.4%七氟烷麻醉6小时使SH-Sy5y细胞中的Tau-Ser202/Thr205表达明显增加、GSK3β-Ser9表达降低,睾酮预处理可以降低Tau-Ser202/Thr205表达、升高GSK3β-Ser9表达,Tau-Ser262、GSK3β-Tyr 216磷酸化水平未见明显改变;而连续3天3%七氟烷麻醉2小时使神经元细胞的Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262表达明显增加,使GSK3β-Ser9、PSD-95表达降低、GSK3β-Tyr 216升高,睾酮预处理可以降低Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262、GSK3β-Tyr 216表达,升高GSK3β-Ser9、PSD-95表达;2.七氟烷麻醉或睾酮预处理没有改变SH-Sy5y细胞及神经元的细胞活性;3.多次七氟烷麻醉抑制神经元s EPSCs的幅度及频率,睾酮预处理可以使神经元s EPSCs的幅度及频率有所恢复。结论:七氟烷麻醉可以导致SH-Sy5y细胞、原代神经元中的GSK3β激酶活性增加及Tau蛋白过度磷酸化,睾酮可以逆转七氟烷引起的神经毒性,抑制GSK3β激酶活性,降低Tau蛋白磷酸化水平,保护神经元突触功能,起到神经保护作用。实验三:睾酮对多次七氟烷麻醉引起的幼年小鼠Tau蛋白表达、认知功能障碍的保护作用目的:本实验拟探讨睾酮是否能够通过调节GSK3β激酶活性对多次七氟烷麻醉引起的幼年小鼠（P6）大脑Tau蛋白过磷酸化及认知功能障碍起到保护作用。方法:将幼年（P6）雄性小鼠随机分为对照组（Control+Vehicle）、对照+睾酮组（Control+Testosterone）、麻醉组（Sevoflurane+Vehicle）和麻醉+睾酮组（Sevoflurane+Testosterone）。对照+睾酮组和麻醉+睾酮组皮下注射100μg睾酮溶液,对照组及麻醉组皮下注射等量玉米油,1小时后麻醉组和麻醉+睾酮组进行3%七氟烷麻醉2小时,对照组及对照+睾酮组在同样条件下吸入40%O22小时,连续3天麻醉及给药处理结束后各组小鼠取脑组织应用Western blot技术检测Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262、total Tau、GSK3β-Ser 9、GSK3β-Tyr 216、total GSK3β蛋白表达水平;应用ELISA技术检测睾酮水平;应用HE染色技术观察大脑结构变化;应用Morris水迷宫实验测试各组小鼠海马区认知能力改变。结果:1.睾酮注射后1小时小鼠脑组织中的睾酮含量即可出现明显上升,而第3次给药后24h后小鼠脑组织中的睾酮含量基本下降至正常水平,之后睾酮含量与对照组相比均没有差异;2.麻醉或睾酮给药并没有直接造成大脑海马组织的形态学改变;3.多次七氟烷麻醉使幼鼠皮质及海马组织中Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262表达明显增加,GSK3β-Ser9表达降低,皮质中GSK3β-Tyr 216未见改变,海马中GSK3β-Tyr 216表达增加;睾酮预处理使Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262、GSK3β-Tyr 216表达降低,GSK3β-Ser9表达增加;4.Morris水迷宫实验中,睾酮预处理可以逆转多次七氟烷麻醉造成的幼鼠海马区认知功能损伤。结论:睾酮多次给药能暂时性增加小鼠脑组织中的睾酮含量,未出现长期作用,且未造成脑结构的变化。然而睾酮预处理可以抑制幼年小鼠大脑皮质、海马区中因多次七氟烷麻醉而激活的GSK3β的激酶活性,降低Tau-Ser202/Thr205、Tau-Ser262的表达,进而对多次七氟烷麻醉引起的幼年小鼠的海马区认知功能改变具有保护作用。实验四:七氟烷及睾酮对Tau蛋白与GSK3β蛋白结合力的相反作用目的:本实验拟探讨七氟烷和睾酮对GSK3β和Tau的蛋白结合力的不同作用。方法:1.SH-Sy5y细胞分组及处理方法见实验二,处理结束后后,各组应用免疫共沉淀技术检测各组Tau蛋白与GSK3β蛋白的结合情况。2.P8 C57BL/6小鼠取脑组织分离提纯Tau蛋白与GSK3β进行Nano-chip蛋白相互作用力的探测。结果:1.七氟烷麻醉使Tau蛋白和GSK3β蛋白的结合增多,而睾酮预处理减少了Tau蛋白与GSK3β蛋白的结合;2.睾酮使Tau与激活态GSK3β之间的蛋白结合力减弱。结论:七氟烷使GSK3β和Tau蛋白间的相互作用力增强进而容易引起Tau蛋白各个位点的磷酸化。而睾酮会抑制七氟烷引起的强相互作用力,使二者不易结合,进而降低Tau蛋白各个位点磷酸化的可能。
樊云霞[4]（2020）在《PCB153通过Mark4诱导睾丸间质细胞氧化应激抑制睾酮合成》文中认为目的:在雄性生殖内分泌中,睾酮（Testosterone,T）是最重要的一种类固醇激素,在精子发生和维持雄性第二性征中发挥至关重要的作用。在体内,睾酮生成整个过程受下丘脑-垂体-性腺轴的调控,主要在睾丸间质细胞中由各种类固醇生成酶催化生成。多氯联苯（Polychlorinated biphenyls,PCBs）是一种被广泛应用于生活中的难以降解的环境污染物,能通过不同的途径在人体富集,给人类的健康带来威胁,尤其是对生殖系统。已有研究发现,高暴露于多氯联苯能显着降低血清睾酮水平、破坏血睾屏障、降低睾丸相对质量及精子数目和质量,多方面影响雄性生殖能力,而其干扰睾丸间质细胞睾酮分泌的具体分子机制还有待进一步阐明。微管亲和调节激酶4（Microtubule affinity regulating kinases 4,Mark4）是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,已被证明在脂肪细胞中能促进脂肪积累、诱导氧化应激和炎症反应,而在类固醇代谢中未见相关报道。我们在前期研究中发现,PCB153可上调睾丸间质细胞Mark4的水平,由此我们提出Mark4可能参与PCB153对睾丸间质细胞功能的影响过程。本研究拟选用多氯联苯单品PCB153作为处理因素,通过体内外实验探究Mark4在PCB153影响睾丸间质细胞睾酮合成过程中发挥的作用。方法:1.筛选没有明显致死效应的PCB153细胞处理剂量。用不同浓度的PCB153处理小鼠睾丸间质细胞TM3细胞系,依次于6、12、24、48 h使用CCK-8试剂盒检测细胞存活率。2.PCB153对小鼠睾丸间质细胞TM3细胞睾酮合成的影响。使用筛选出来的PCB153处理浓度,即5、10、20μg/ml处理TM3后,进行（1）在不同时间点分别检测培养液中睾酮浓度;（2）免疫印迹检测Mark4、类固醇生成相关酶表达,凋亡相关蛋白表达及相关信号通路的激活情况;（3）检测试剂盒PCB153处理后细胞活性氧（ROS）水平、过氧化氢酶（CAT）活性变化;（4）JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位。3.体内实验探究PCB153对睾酮合成和精子发生的影响。选取成年SD大鼠,腹腔注射PCB153染毒后,收集血清、睾丸组织,进行（1）ELISA检测血清睾酮（Testosterone,T）、雌二醇（Estradiol,E2）、促黄体生成素（Luteinizing Hormone,LH）水平;（2）制作石蜡切片,HE染色计数Ⅷ期生精小管数量;（3）透射电镜观察睾丸间质细胞线粒体结构完整性。4.敲低Mark4表达对PCB153抑制TM3细胞睾酮分泌的影响。Mark4 siRNA与PCB153联合处理,检测细胞增殖、睾酮合成、ROS、CAT活性等上述指标的变化。5.NF-κB抑制剂对PCB153诱导TM3细胞氧化应激、降低睾酮合成的影响。筛选刚好能抑制PCB153对NF-κB信号通路激活作用的PDTC细胞处理浓度。使用10μM的PDTC提前处理细胞2 h后,加入20μg/ml PCB153处理24 h,检测上述指标的变化。6.大鼠体内抑制NF-κB活性后PCB153对大鼠睾酮分泌的影响。选用不同浓度的PDTC联合PCB153大鼠腹腔注射,WB检测睾丸组织NF-κB信号通路激活情况,ELISA检测大鼠血清T、LH、E2水平变化。结果:1.PCB153抑制TM3细胞存活和睾酮分泌:CCK-8实验结果显示PCB153处理后,TM3细胞存活受到影响。ELISA检测培养液中睾酮浓度,10、20μg/ml PCB153能显着抑制TM3细胞睾酮分泌;WB结果显示类固醇生成酶StAR和3β-HSD下降,Mark4表达水平升高,抗凋亡蛋白Bcl-2水平显着下降。2.PCB153激活NF-κB诱导TM3细胞产生氧化应激、影响线粒体功能:WB结果发现PCB153处理后p-p65/p65比值升高,NF-κB信号通路被激活;试剂盒检测发现细胞ROS显着上升,CAT活性下降;JC-1检测结果显示细胞内绿色荧光显着增加,线粒体膜电位下降。3.PCB153降低大鼠体内睾酮生成并影响精子发生:与对照组相比,大鼠PCB153体内处理组血清睾酮水平下降,LH水平上升,睾丸组织HE染色发现Ⅷ期生精小管数量下降,精子发生受到影响;透射电镜结果显示睾丸间质细胞线粒体肿胀,密度降低,线粒体结构受损。4.敲低Mark4表达可部分拮抗PCB153对睾酮生成的抑制作用:Mark4 siRNA转染TM3细胞降低Mark4表达,联合PCB153处理,发现与Ctrl siRNA+PCB153组相比,Mark4 si RNA+PCB153组PCB153不能使StAR水平降低,也不能显着激活NF-κB信号通路,但PCB153处理仍能降低Bcl-2水平;同时,敲低Mark4表达后,PCB153不能诱导细胞氧化应激升高,PCB153引起的CAT活性和线粒体膜电位降低也被缓解,PCB153对睾酮生成的抑制作用被部分拮抗。5.NF-κB信号通路抑制剂可部分缓解PCB153对睾酮合成的抑制作用:使用刚好能抑制PCB153对TM3细胞NF-κB信号通路激活作用的PDTC浓度,即10μM PDTC预处理细胞2 h后,PCB153联合处理24 h,ELISA检测培养上清睾酮发现抑制NF-κB信号通路能在一定程度上缓解PCB153对TM3细胞睾酮合成的抑制作用;ROS检测发现,PDTC+PCB153处理组PCB153仍能诱导氧化应激升高但与PCB153组相比显着缓解;PDTC抑制NF-κB信号通路后,PCB153不能降低CAT活性;JC-1检测线粒体膜电位发现,PDTC+PCB153处理组PCB153仍能降低线粒体膜电位但降低程度低于PCB153处理组。体内实验中,抑制NF-κB信号通路能显着缓解PCB153对大鼠血清睾酮合成的抑制作用。结论:多氯联苯PCB153通过促进Mark4蛋白表达激活NF-κB信号通路,诱导睾丸间质细胞产生氧化应激,造成睾酮合成障碍。
王祥[5]（2020）在《轻型颅脑损伤（TBI）血清Tau蛋白变化与损伤程度和预后的相关性的研究》文中研究指明目的颅脑损伤（TBI）是一种常见的多发病,其发生率仅次于四肢骨折,但残死率居首位。然而轻度颅脑损伤（m TBI）的发病机制目前尚未明确,因此到目前为止还没有明确的诊断标准、鉴别和治疗策略。由于目前各种类型颅脑损伤的诊断是基于临床表现或格拉斯哥昏迷评分系统（GCS）或神经系统体格检查或者脑部CT的成像扫描都具有其自身的的局限性,故最近越来越多的学者从细胞分子水平进一步研究m TBI的血液标志物,大量的研究表明,TBI是阿尔茨海默病的危险因素之一,而血清Tau蛋白的异常集聚已被证实与阿尔茨海默病息息相关,故本课题探究轻型急性颅脑损伤（TBI）血清Tau蛋白变化与损伤程度和预后的相关性,为临床早期诊疗提供参考。方法本次试验选取安医大附属巢湖医院神经外科自2017年12月至2018年12月间收治的60例急性颅脑损伤（TBI）患者作为观察对象（观察组）,并且所有急性颅脑损伤（TBI）患者入院时GCS评分均处于13-15分区间内,再选取同时期入院的与TBI一般资料相匹配的患者家属或其他健康志愿者作为对照组,并签署知情同意书。分别于受伤后1、3、5、7、14d对观察组和对照组对象进行血清Tau含量检测,伤后6个月随访时利用GOS评分对患者预后情况进行评估,1-3分为预后不良组,4-5分为预后良好组,并对两组采用生活质量SF-36评分进行评估分析。最后采用SPSS 21.00软件分析轻度急性颅脑损伤血清Tau蛋白不同时间段变化与对照组的相关性及预后情况。结果TBI组患者伤后1、3、5、7、14 d血清Tau蛋白含量均明显高于对照组试验健康人员,（P<0.05）;根据TBI组患者预后不同时间段格拉斯哥预后评分（GOS）评分将其分为预后不良组（7例）、预后良好组（52例）和1例失联,其中预后不良组不同预后时间段血清Tau蛋白含量均明显高于预后良好组患者,（P<0.05）;预后良好组患者不同预后时间段生活质量SF-36评分均明显高于预后不良组患者,（P<0.05）,血清Tau蛋白与生活质量具有较好的相关性。结论实践证明,轻度颅脑损伤在当前的临床医学领域中较为常见,不过实际的诊断和治疗存在较大的难度,尽管这些创伤相对来说较轻,但是往往会体现较强的渐进性,可能会伴随部分副作用和后遗症,由此看出研究轻型颅脑损伤具有至关重要的作用。持续的m TBI可慢慢的发展为慢性创伤性脑病（CTE）,在CTE中脑血管周围的神经元内,相应的Tau蛋白发生聚合反应,或是脑沟底部的细胞出现Tau蛋白的汇集现象。因此对血清Tau的动态监测来反应慢性创伤性脑病进行诊断和监测具有重要意义和应用前景。本课题通过实验数据得出在不同的时间段轻型颅脑损伤血清的Tau蛋白明显高于对照组,表明血清Tau蛋白具有较好的敏感性,由此可见,借助血清Tau蛋白浓度的监测可以对CTE病情进行有效的预防和治疗,具有良好的发展和应用前景。本次试验TBI中预后不良组不同预后时间段血清Tau蛋白含量均明显高于预后良好组和预后良好组患者不同预后时间段生活质量SF-36评分均明显高于预后不良组患者,这两组试验反映了TBI血清Tau蛋白与患者预后也密切相关。
叶冠琛,王一如,徐立红[6]（2019）在《微囊藻毒素对多种靶器官的毒性作用研究进展》文中研究说明微囊藻毒素是一类主要由微囊藻产生的单环七肽毒素。近年来,大量文献与研究表明,微囊藻毒素具有胚胎发育和生殖毒性,可以导致胚胎死亡、畸形或发育迟缓,影响生殖激素水平,对生殖系统产生负面效应。此外,微囊藻毒素还对神经系统、免疫系统产生影响包括诱导细胞凋亡、氧化应激以及引起线粒体功能改变等。该文总结了上述相关内容的最新研究进展,并展望了未来的研究方向。
徐婉[7]（2019）在《孕期DEHP暴露对胎盘组织结构的影响及作用机制》文中认为背景邻苯二甲酸二脂（2-乙基己基）[di（2-ethylhexyl）phthalate,DEHP]是一种无色透明、有特殊气味的有机化合物,广泛应用于工农业生产中。人可通过饮食、呼吸、皮肤接触等多种方式摄入DEHP,DEHP进入机体后可产生一系列危害,并且其作用可随着DEHP在机体内部的不断蓄积而增强。当人体短期内吸收大量的DEHP后,可导致急性毒性反应。研究表明,DEHP对于人体健康的危害主要体现在急性毒性作用及对于各器官系统的慢性损伤。相对于一般人群,孕妇和胎儿对DEHP更加敏感。DEHP过度暴露可导致多种妊娠和胚胎发育的异常。目的本课题的目的是利用不同剂量DEHP作用于妊娠大鼠,分析DEHP暴露对胎盘组织结构和胚胎大鼠生长发育的影响,进一步利用基因芯片技术和分子生物学方法研究DEHP暴露对大鼠胎盘组织基因表达谱的影响,分析不同剂量DEHP暴露对胎盘组织结构的影响及其作用机制。方法60只妊娠Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组、DEHP低剂量组、DEHP中剂量组和DEHP高剂量组,每组15只,其中对照组给予玉米油灌胃,DEHP暴露组分别给予100 mg/kg（低剂量组）、500 mg/kg（中剂量组）和1000 mg/kg（高剂量组）的DEHP灌胃给药,从大鼠妊娠12 d起开始给药,每日1次,连续给药7d后处死动物。检测各组妊娠大鼠的胚胎发育和胎鼠情况,包括胎盘质量、存活胎数、畸形胚胎数量、胚胎大鼠的身长、尾长、体重及各个器官的重量,分析比较各组妊娠大鼠之间各项指标的差异;HE染色观察胎盘组织结构;收集各组大鼠新鲜胎盘组织,利用基因芯片检测各组妊娠大鼠胎盘组织基因表达谱的差异,进一步用real time RT-PCR及Western Blot方法对基因芯片检测结果中差异明显基因AKr7a3、ugt2b37、GSTA5、Sult2a1、Fmo1、Maob、Aldh1a3和cyp2f4进行m RNA和蛋白质水平的验证。结果1各组妊娠大鼠一般情况良好,摄食和饮水量无异常,动作行为正常;给DEHP处理前各组大鼠的体重无明显差异性,在给予DEHP处理期间,不同剂量的3组大鼠的体重增加速度均小于正常对照组（P<0.05）;高剂量组大鼠体重增加速度低于中剂量组和低剂量组,而中剂量组的体重增加速度又低于低剂量组,体重变化值具有DEHP剂量依赖性（P<0.05）。2对照组孕鼠的胎盘形状为椭圆形、边缘薄中间厚、暗红色,胎盘的胎儿面覆盖有半透明状羊膜,羊膜表面光滑;低剂量DEHP处理组孕鼠的胎盘外观与对照组相比变化不明显;中剂量DEHP处理组孕鼠的胎盘色泽较灰暗,胎盘的重量和体积较对照组及低剂量DEHP处理组有所减轻,胎盘中间的厚度变薄;高剂量DEHP处理组孕鼠的胎盘变化更显着,显示出不同程度的淤血水肿,羊膜颜色发黄,透光性变的很差。通过HE染色结果可以看到,对照组孕鼠胎盘结构层次清楚,细胞形态规则,绒毛膜滋养细胞排列紧密整齐;低剂量DEHP处理组孕鼠的胎盘组织结构基本正常;中剂量DEHP处理组胎盘海绵滋养层（Sp）变薄,滋养细胞体积变小,迷路带中可见红细胞增多;高剂量DEHP处理组胎盘各层细胞的界限变得模糊,海绵滋养细胞层显着变薄,部分细胞的胞浆出现网状空泡状改变。3各组妊娠大鼠的胚胎数量及性别比例无显着差异,但中剂量DEHP处理组和高剂量DEHP处理组妊娠大鼠的活胎数明显低于对照组（P<0.05）。DEHP处理组胚胎的体重、身长及尾长均显着低于对照组（P<0.05）;而且不同DEHP处剂量组之间的胚胎体重、身长和尾长也有明显差异,变化趋势呈现剂量依赖性（P<0.05）。各组胚胎大鼠的脏器系数比较结果显示,实验组胎鼠明显小于对照组（P<0.05）。4对各组妊娠大鼠胎盘组织进行基因芯片检测显示,AKr7a3、ugt2b37、GSTA5、Sult2a1、Fmo1、Maob、Aldh1a3和Cyp2f4基因的表达水平与DEHP浓度呈剂量相关性。5 real time RT-PCR结果显示,与对照组相比,DEHP处理组妊娠大鼠的胎盘组织中Sult2a1m RNA、Maob m RNA表达量随着DEHP浓度的增加而升高（P<0.05）。AKr7a3m RNA、ugt2b37 m RNA、GSTA5m RNA、Fmo1 m RNA、Aldh1a3m RNA、Cyp2f4 m RNA的表达量则随着DEHP浓度的增加而降低（P<0.05）。6 Western Blot结果显示,AKr7a3蛋白在各组之间差异不明显。该结果与real time RT-PCR分析结果不一致,AKr7a3蛋白与DEHP引起胚胎发育的毒性相关性还有待进一步研究。而Sult2a1蛋白、Maob蛋白的表达水平与DEHP的浓度呈剂量相关性,DEHP处理各组Sult2a1蛋白、Maob蛋白的表达水平均高于对照组（P<0.05）。其变化趋势呈浓度依赖性,即随着DEHP的浓度增高,Sult2a1蛋白、Maob蛋白的表达水平也相应增高。该结果与荧光定量PCR分析结果一致。结论DEHP暴露可引起胚胎大鼠生长发育迟缓和畸形;引起胎盘、淤血水肿、细胞凋亡等变化;基因表达谱分析显示DEHP暴露可导致大鼠胎盘组织多种基因表达改变;对部分基因进行m RNA和蛋白水平验证,发现AKr7a3、ugt2b37、GSTA5、Sult2a1、Fmo1、Maob、Aldh1a3和Cyp2f4基因的表达水平随着DEHP浓度增加而降低,Sult2a1、Maob基因表达水平随着DEHP浓度增加而升高。
严丹丹[8]（2019）在《丙烯酰胺对大鼠学习记忆的影响及机制研究》文中研究指明丙烯酰胺（Acrylamide,ACR）作为一种食品加工副产物广泛存在于各类食品中,是确认的人类周围神经毒物,但ACR对学习记忆的影响及机制研究报道极少。本研究以体内体外实验相结合,研究ACR亚慢性经口染毒对大鼠学习记忆的影响及分子机制和信号通路机制,为深化ACR神经毒性及机制,为防控ACR毒性分子靶点奠定基础。第一部分丙烯酰胺对大鼠学习记忆能力的影响目的:以神经行为学和病理学改变为观察指标,采用经口灌胃染毒方式,建立亚慢性ACR染毒模型,探讨ACR对大鼠学习记忆能力的影响。方法:SPF级健康成年雄性SD大鼠36只,体重140 g160 g,随机分为3组,对照组（12只）、ACR1组（5 mg/kg ACR,12只）、ACR2组（10 mg/kg ACR,12只）,连续灌胃染毒14周;每周称量大鼠体重、评估大鼠步态评分,第13周时进行Morris水迷宫试验（MWM）,第14周时测量大鼠后肢抓力以及后肢撑力指数。14周染毒结束后,处死所有动物,称量主要脏器并计算脏器系数。HE染色观察海马神经元结构,免疫组织化学观察NeuN+细胞数,免疫荧光观察神经元胶质化,透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果:（1）整体毒性:染毒期间各组大鼠一般情况良好,无异常大鼠死亡。染毒期间各组大鼠体重无明显差异（P>0.05）,各组大鼠脏各器系数无明显差异（P>0.05）。（2）步态和肌张力改变:ACR1组大鼠在染毒第1013周出现轻微步态异常（P<0.05）,后肢抓力和撑力指数无明显变化（P>0.05）;ACR2组在染毒第613周出现轻度到中度步态异常（P<0.05）,后肢抓力明显降低（P<0.01）,后肢撑力指数明显增加（P<0.01）。（3）学习记忆能力变化:（1）定位航行试验中,三组大鼠的游泳速度无明显差异（P>0.05）;ACR1组大鼠逃避潜伏期无明显改变（P>0.05）;ACR2组大鼠逃避潜伏期显着延长（P<0.01）。（2）空间探索试验中,ACR1组和ACR2组大鼠在目标象限的游泳距离和时间均明显减少（P<0.05）。（4）一般病理学变化:（1）HE染色:ACR1和ACR2组海马区神经元数量减少,部分神经元细胞膜、核膜界限不明显,有少量坏死神经元。（2）NeuN免疫组化:ACR1组海马CA1和DG区NeuN+细胞明显减少（P<0.05）,ACR2组海马CA1、CA3和DG区NeuN+细胞数量也明显减少（P<0.01）。（3）神经元胶质细胞增生:ACR1组CA1区星形胶质细胞明显增生（P<0.05）,CA3区星形胶质细胞和小胶质细胞均明显增生（both P<0.05）;ACR2组CA1和CA3区星形胶质细胞和小胶质细胞均明显增生（all P<0.001）。（5）超微病理学改变:（1）突触结构的改变:ACR1组和ACR2组突触结构不完整,突触间隙变模糊,突触后膜密度下降。（2）髓鞘结构改变:ACR1组髓鞘的板层结构分离,ACR2组髓鞘板层结构明显分离伴少量脱髓鞘。（3）神经丝的改变:ACR1组神经丝分布较密集,ACR2组神经丝大量聚集。结论:ACR在5、10 mg/kg剂量下染毒14周可导致大鼠学习记忆能力受损;海马神经元的丢失、胶质细胞的增生、突触结构的破坏是ACR导致大鼠学习记忆能力损伤的病理学基础。第二部分丙烯酰胺导致大鼠学习记忆损伤的机制目的:围绕与学习记忆密切相关的tau蛋白、CREB-BDNF及其下游的突触囊泡蛋白（Synaptic vesicle protein,SVP）突触素-1（Synapsin-1,SY-1）和突触小泡蛋白（Synaptophysin,SYN）,以及PERK-e IF2α和ALP信号通路,研究ACR导致大鼠学习记忆损伤的潜在机制。方法:动物分组与处理同上,免疫组织化学检测海马区AT8（p S202/p T205）的表达与分布,Western blot检测海马组织中tau蛋白及其激酶、SY-1、SYN、PERK-e IF2α和ALP信号通路中各相关蛋白的表达量。结果:（1）磷酸化tau蛋白的变化:（1）AT8的表达与分布:ACR1组和ACR2组海马CA1、CA3和DG区可见棕黄色AT8免疫阳性细胞分布,阳性细胞计数显着增加（all P<0.001）。（2）tau蛋白的表达量变化:ACR1组AT8、p S262的蛋白表达显着增加（both P<0.01）,ACR2组AT8、p S396、p S262的表达量均显着高于对照组和ACR1组（all P<0.05）。（3）蛋白激酶GSK-3β和Cdk5的变化:ACR1组和ACR2组抑制性P-GSK-3β（Ser9）的表达量均明显降低（P<0.01）,p25/p35的表达量均明显增加（P<0.01）。（4）蛋白磷酸酶PP2A的变化:ACR1和ACR2组抑制性p-PP2Ac Tyr307的表达量显着增加（both P<0.05）。（2）SVP表达水平的变化:（1）SY-1、SYN的蛋白表达变化:ACR1组SY-1蛋白表达量无显着变化（P>0.05）,SYN蛋白的表达显着降低（P<0.05）,ACR2组SY-1、SYN的蛋白表达明显低于对照组和ACR1组（all P<0.01）。（2）CREBBDNF的表达量变化:ACR1、ACR2组P-CREB和BDNF的蛋白表达与对照组相比显着降低（all P<0.05）。（3）PERK-e IF2α信号通路:ACR1和ACR2组海马GRP78、P-PERK、Pe IF2α、ATF4、CHOP的表达量与对照组相比均明显增加（all P<0.05）;且与ACR1组相比,ACR2组GRP78、P-e IF2α、ATF4的表达量均明显增加（all P<0.05）。（4）ALP信号通路:ACR1组中p62的表达量明显增加（P<0.05）,成熟型Cathepsin-D的表达量明显降低（P<0.05）;ACR2组LC3-II/I显着增加（P<0.01）、p62的表达量显着升高（P<0.001）,成熟型Cathepsin-D的表达量显着降低（P<0.001）。结论:海马tau蛋白磷酸化水平增加、CREB-BDNF及其下游SY-1和SYN表达降低是ACR导致学习记忆损伤的分子机制。PERK-e IF2α和ALP信号通路可参与调控ACR导致学习记忆的损伤。第三部分PERK和ALP在丙烯酰胺损伤学习记忆中的作用目的:在细胞水平,采用特异性抑制剂和激动剂进行干预实验,研究PERKe IF2α和ALP信号通路在ACR导致学习记忆损伤中的调控作用,为防控ACR神经毒性提供新的分子靶点。方法:细胞染毒处理:010 mmol/L ACR处理SH-SY5Y细胞24 h;CCK8法测细胞的存活率;相差显微镜观察细胞形态。激动剂或抑制剂处理:ALP激动剂（200 nmol/L Rapa）或PERK抑制剂（0.5μmol/L GSK2606414）分别预处理细胞2 h后,再以2.5 mmol/L ACR染毒24 h;Western blot测定ALP和PERK-e IF2α信号通路关键蛋白表达量以及磷酸化tau蛋白和SVP的表达水平;免疫荧光观察细胞内磷酸化tau蛋白的表达与分布;LC3免疫荧光标记自噬体,吖啶橙标记自噬溶酶体,溶酶体探针（Lyso Tracker Red）标记细胞内溶酶体,激光共聚焦技术观察细胞内自噬体、自噬溶酶体和溶酶体的数量,检测自噬流。结果:（1）细胞存活率:2.5、5 mmol/L ACR染毒24 h后,细胞数目减少,贴壁能力减弱,神经突收缩,少部分细胞呈球状漂浮,细胞存活率明显降低（P<0.001）,且具有剂量-效应关系。（2）磷酸化tau蛋白和SVP的变化:（1）磷酸化tau蛋白:2.5、5 mmol/L ACR组p S396、p S262和AT8的蛋白表达显着增加（all P<0.001）,抑制性P-GSK-3βSer9的表达显着降低（P<0.05）;（2）SVP的改变:2.5、5 mmol/L ACR组SY-1、SYN、P-CREB和BDNF的表达量显着减少（all P<0.05）。（3）PERK-e IF2α和ALP信号通路:（1）PERK-e IF2α信号通路的变化:2.5、5 mmol/L ACR组GRP78、P-PERK、P-e IF2α、ATF4和CHOP的表达量显着增加（P<0.05）,且具有剂量-效应关系。（2）ALP的变化:2.5、5 mmol/L ACR组LC3-II/I和p62的表达量显着增加（both P<0.05）,成熟型Cathepsins-D的表达量显着降低（P<0.05）。（4）PERK-e IF2α干预试验:与ACR组相比,PERK抑制剂GSK2606414预处理2 h后,（1）可显着降低P-PERK的表达水平（P<0.05）,且其下游靶蛋白Pe IF2α、ATF4和CHOP的表达量也明显降低（all P<0.05）;（2）可显着降低p S396、p S262和AT8的表达量（all P<0.05）;（3）可显着增加P-CREB和BDNF的表达水平（both P<0.05）;（4）突触囊泡蛋白SYN和SY-1的表达量无明显变化（P>0.05）。（5）ALP干预试验:与ACR组相比,Rapa预处理2 h后,（1）显着降低p62表达量（P<0.01）,增加成熟型Cathepsins-D的表达水平（P<0.01）,自噬溶酶体和溶酶体的聚集增加;（2）显着降低p S396、p S262和AT8的表达量（all P<0.01）;（3）明显增加BDNF的表达量（P<0.05）;（4）突触囊泡蛋白SYN和SY-1的表达量无明显变化（P>0.05）。结论:PERK-e IF2α的激活和ALP的抑制介导了ACR导致的磷酸化tau蛋白的增加以及BDNF的降低,但未参与ACR介导突触囊泡蛋白SYN和SY-1表达降低的调节。
阮俊勇[9]（2019）在《急性低压低氧环境下膜法氧气机富氧干预对大鼠认知功能及海马结构的影响》文中指出高原地区自然环境特殊,对人体影响较大的主要气候特征表现为低气温、强紫外线辐射、低大气压和低氧分压等,其中低氧分压对人体健康威胁最大。急进高原早期,机体对低氧环境的习服机制尚未建立,极易引发急性高原反应（acute mountain sickness,AMS）。在人体所有系统中,中枢神经系统对低氧环境最为敏感。目前研究发现,高原急性低氧环境几乎能影响机体所有的功能活动,高级神经活动的改变往往在低氧刺激初期就会出现。结合时间因素,轻微的低氧刺激就可能引起不同程度的神经元细胞损伤,严重的低氧刺激会导致神经元细胞产生不可逆损伤甚至死亡。且急性低氧引发的认知功能损伤严重威胁着急进高原人群的作业效能和身心健康,更有甚者会危及生命。随着我国高原医学的发展,高原抗缺氧技术和装备研究随之不断进步,目前已有研究证实了高原富氧干预对急进高原人群的心、肺等组织器官的生理功能和结构有一定的预防保护作用,但是有关高原富氧干预是如何影响机体的认知功能和脑部结构目前仍鲜有研究报道。因此,探索富氧干预对高原急性低氧所致认知功能障碍及脑部结构损伤的预防保护作用在保障急进高原人群生理健康和工作效率方面具有重要意义。本研究首先建立了平原条件下的弥散富氧环境、模拟高原低压低氧环境以及模拟高原低压低氧条件下的弥散富氧环境实验平台,并分别对三种平台的氧气浓度、海拔、温度等参数进行了连续测试,结果表明上述三套系统均可连续运行12 h以上,且氧气浓度和温度能够保持稳定;同时建立了急性缺氧大鼠模型,通过对其自发协调性活动检测,验证了三种环境能影响大鼠的自发协调性活动和认知功能,为后续动物实验的开展提供了科学有效的实验平台保障。其次,本实验使用便携式膜法氧气机对急性缺氧动物模型进行了有效富氧干预,探索了在模拟高原急性低压低氧环境下膜法氧气机的富氧干预对于大鼠的空间学习记忆能力、海马组织结构、神经细胞形态和Tau蛋白磷酸化表达水平的影响,发现富氧干预能显着降低急性低压低氧环境造成的大鼠空间学习记忆功能障碍以及对海马结构和神经细胞超微结构的损伤。该研究为弥散富氧改善急进高原人群的生理和心理健康提供了理论依据,也为后续抗缺氧系列装备在高原地区的进一步推广与应用提供了科学使用方法与实验依据。本实验研究分为以下两部分:第一部分:模拟高原低压低氧条件下弥散富氧环境和急性缺氧动物模型的建立背景:大量研究表明高原低氧环境会严重影响急进高原人群的神经、呼吸、消化、泌尿、循环等系统的正常生理功能,因此,系统研究低氧对机体损伤的机制并探寻科学有效的富氧干预方法,对于维护人体正常生理功能和健康具有重要意义。为此,建立一种科学有效的急性缺氧动物模型并构建与其相对应的弥散富氧环境对于研究急进高原机体损伤机制并探索相关干预方法具有重要价值。方法:首先,通过将便携式膜法氧气机的出气端与大鼠独立通气笼具（individual ventilated cages,IVC）笼具的进气口相接,构建弥散富氧环境,以模拟高原富氧室;随后,将富氧笼置于低压舱内,协同运行低压舱及膜法氧气机。至此,模拟高原低压低氧条件下的弥散富氧环境构建完毕。随后在各海拔高度下对富氧笼内的氧气浓度和温度进行测试。随后建立急性缺氧大鼠模型,并对其在富氧干预后的自发协调性活动进行检测。结果:氧气浓度测试结果显示,在平原条件下,富氧笼内氧浓度于20 min内即可达到30.72%,且稳定性较好。模拟高原环境时,低压舱内氧浓度始终保持在20.9%,与平原状态一致,但压力值显着降低。而富氧笼内氧浓度随海拔高度的上升略呈下降趋势,但是在模拟海拔6000 m时仍能维持在28.41%,且在固定海拔高度时富氧笼内氧浓度基本能够保持稳定在12 h以上。此外,富氧干预能有效改善急性缺氧对大鼠体重以及水平和垂直活跃度的影响。结论:本部分实验分别构建了科学有效的平原弥散富氧环境、模拟高原低压低氧环境以及模拟高原低压低氧条件下的弥散富氧环境三种氧环境,并建立了相对应的急性缺氧动物模型,为后续深入研究富氧干预对和大鼠空间学习记忆相关的认知功能及脑部结构的影响提供了科学有效的方法学保障。第二部分:急性低压低氧环境下膜法氧气机富氧干预对大鼠空间学习记忆能力及海马结构的影响背景:目前针对富氧环境对机体影响的基础研究大都集中在心肺功能方向,而有关富氧干预能否改善因急性低氧引发的脑部结构损伤和学习记忆能力下降,尤其是富氧干预对其作用机制迄今仍未见研究报道。方法:通过Morris水迷宫进行定位航行训练后,对大鼠进行急性低压低氧处理和富氧干预,随后检测其空间学习记忆能力,并分别观察急性低氧与富氧干预对于大鼠海马组织结构和神经细胞超微结构的影响,同时在分子水平上对于与认知功能密切相关的Tau蛋白在四个重要位点的磷酸化表达水平进行Western Blot半定量分析。结果:空间探索能力测试结果表明,急性低氧处理会显着降低大鼠穿越Morris水迷宫水下平台的次数,而富氧干预则会扭转这种负向影响。HE染色结果表明,低氧处理会导致大鼠海马CA1区锥体细胞排列散乱,胞核体积缩小,染色加深,与胞质界线不清,出现大量空泡样变,且变性锥体细胞数量显着增多,而富氧干预组大鼠相关结构损伤明显减轻。透射电镜结果表明,低氧处理会显着破坏神经元细胞结构和线粒体形态,而富氧干预能有效缓解低氧引发的神经细胞损伤。Western Blot结果表明,进行低氧和富氧干预对于海马组织内总Tau蛋白的表达无显着影响,但急性低压低氧处理会造成Tau蛋白在不同位点的异常磷酸化表达,而有效富氧干预则会显着降低其在不同位点的磷酸化表达水平。结论:采用膜法氧气机进行富氧干预能够显着减轻急性低压低氧环境导致的大鼠空间学习记忆功能障碍以及海马组织结构、神经细胞形态和线粒体结构的损伤,并且对大鼠的认知功能具有显着的保护作用。
李红威[10]（2019）在《甲醇致恒河猴认知障碍模型的建立与相关机制研究》文中进行了进一步梳理背景 认知障碍是脑疾病中诊治最困难的疾病之一,阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）是老年人最常见的以认知功能障碍为主要表现的神经退行性疾病。近年来研究发现,长期暴露于浓度超标的甲醛环境,会损伤人的学习记忆、情感认知等功能,也有报道称AD病人和小鼠模型尿液和脑组织中内源性甲醛含量均升高。甲醇是一种毒性物质,有研究认为它在体内发挥毒性主要通过中间代谢产物甲醛,低浓度甲醇慢性喂养恒河猴,可以引起认知障碍和磷酸化tau蛋白的增多。但甲醇/内源性甲醛引起认知损伤的机制尚不确定,对于甲醇慢性暴露造成的机体损伤尚无研究全面阐述。本课题拟通过体外实验探讨甲醛对神经细胞的损伤作用,通过体内恒河猴实验建立认知障碍模型,并分析其机制及甲醇慢性暴露对机体的影响。方法 在体外细胞水平,将SH-SY5Y神经瘤细胞暴露于不同浓度的甲醛。采用细胞划痕实验、细胞活性实验检测细胞迁移、形态、活性和增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;透射电镜观察超微结构改变;多因子检测技术检测细胞上清炎性因子;Western Blotting检测细胞内磷酸化tau蛋白、Aβ及线粒体分裂相关蛋白的表达。在体内动物水平,将3-6岁、雄性恒河猴分为实验组和对照组,每组6只,实验组给予低浓度甲醇自由饮用,对照组给普通饮水。处理不同时间进行可变空间延迟反应任务、物体识别实验、取物实验以及Viewpoint等行为学检测;采集动物的脑脊液、血液、尿液、粪便,进行血常规、尿常规、血生化等检测,通过HPLC检测尿液中甲醛含量;甲醇处理3个月、9个月时取脑、肝、肾、胃肠等脏器进行病理学及分子生物学检测;多因子检测技术检测血清、脑脊液及脑组织的炎性细胞因子水平。最后,通过16S rRNA高通量测序技术比较不同组恒河猴肠道菌群丰度及构成的差异,通过LC-MS技术对恒河猴尿液代谢组学进行研究。结果 0.05 mM甲醛即可抑制细胞迁移,0.1 mM作用4小时即可降低细胞活性和增殖能力,与甲醛剂量和作用时间呈正相关;甲醛可以诱导神经细胞凋亡,增加线粒体分裂,使超微结构损伤,上调tau蛋白的磷酸化水平。长期饮用低浓度甲醇可以导致恒河猴认知功能障碍。在病理学方面,大脑轻度萎缩,Aβ阳性斑块增多,磷酸化tau蛋白表达量升高,神经突触显着丢失、神经元数量减少,伴胶质细胞增多,以上改变均与尿液甲醛水平呈正相关。甲醇/内源性甲醛可导致恒河猴肝脏、肾脏、及胃肠道慢性损伤;脑组织、肝脏线粒体超微结构受损明显;可上调自噬相关蛋白和线粒体裂解相关蛋白的表达;另外,甲醇/内源性甲醛可以破坏肠道菌群结构,诱发Firmicutes/Bacteroidetes 比例失衡及代谢紊乱。结论 本研究发现甲醛可以通过抑制迁移,降低生存活性,增加线粒体裂解,促进凋亡等多种途径对神经细胞造成损伤,显着上调神经细胞tau蛋白的磷酸化水平;内源性甲醛通过增强自噬和依赖线粒体的凋亡途径损伤神经系统;可以导致恒河猴认知障碍,具有Aβ阳性斑块和磷酸化tau蛋白增多、神经元减少、突触丢失、胶质细胞增生等AD样病理特征。甲醇/内源性甲醛对机体肝肾及胃肠道会产生慢性损伤,可破坏肠粘膜屏障结构,使肠道菌群失调;同时使恒河猴代谢紊乱,谷氨酸代谢通路异常可能参与了甲醇/内源性甲醛导致的认知障碍。
二、Expression changes in tau and microtubule-associated proteins in rat testicular interstitium（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Expression changes in tau and microtubule-associated proteins in rat testicular interstitium（论文提纲范文）
（1）含KIF3A的ARF6上游激活诸亚网诱导学习的源头调控分子和知识系统（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 含KIF3A的ARF6上游激活网络的研究现状 |
| 1.1.1 ARF6上游激活MAP1B_2亚网 |
| 1.1.2 ARF6上游激活DDX19A亚网 |
| 1.1.3 ARF6上游激活RASGRP1亚网 |
| 1.1.4 ARF6上游激活H10776亚网 |
| 1.1.5 ARF6上游激活SPAG9亚网 |
| 1.1.6 ARF6上游激活AW043812亚网 |
| 1.1.7 ARF6上游激活MEIS3P1亚网 |
| 1.1.8 ARF6上游激活SEL1L亚网 |
| 1.2 含KIF3A的ARF6上游激活网络的研究方法 |
| 1.3 章节安排 |
| 第2章 构建含KIF3A的高表达ARF6上游激活源头调控分子和知识网络 |
| 2.1 ARF6上游激活MAP1B_2亚网 |
| 2.2 ARF6上游激活DDX19A亚网 |
| 2.3 ARF6上游激活RASGRP1亚网 |
| 2.4 ARF6上游激活H10776亚网 |
| 2.5 ARF6上游激活SPAG9亚网 |
| 2.6 ARF6上游激活AW043812亚网 |
| 2.7 ARF6上游激活MEIS3P1亚网 |
| 2.8 ARF6上游激活SEL1L亚网 |
| 2.9 小结 |
| 第3章 分析含KIF3A的高表达ARF6上游激活源头调控分子和知识网络 |
| 3.1 ARF6上游激活MAP1B_2亚网 |
| 3.2 ARF6上游激活DDX19A亚网 |
| 3.3 ARF6上游激活RASGRP1亚网 |
| 3.4 ARF6上游激活H10776亚网 |
| 3.5 ARF6上游激活SPAG9亚网 |
| 3.6 ARF6上游激活AW043812亚网 |
| 3.7 ARF6上游激活MEIS3P1亚网 |
| 3.8 ARF6上游激活SEL1L亚网 |
| 3.9 小结 |
| 第4章 总结与展望 |
| 4.1 总结 |
| 4.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
（2）CHIP蛋白过表达对阿尔茨海默病和帕金森病小鼠模型的保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 CHIP蛋白过表达对APPswe/PS1ΔE9阿尔茨海默病小鼠模型的保护作用 |
| 1.1 背景与目的 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 本部分小结 |
| 第二部分 CHIP蛋白过表达对MPTP诱导急性帕金森病小鼠模型的保护作用 |
| 2.1 背景与目的 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本部分小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 E3泛素连接酶在阿尔茨海默病中的作用 |
| 参考文献 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
（3）睾酮通过调节GSK3β减轻七氟烷导致的Tau磷酸化及认知障碍（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、幼年及成年小鼠中睾酮的含量差异及多次七氟烷麻醉对Tau蛋白表达、认知功能的不同影响 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 材料与仪器 |
| 1.1.3 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 Western blot实验 |
| 1.2.2 睾酮含量ELISA检测 |
| 1.2.3 Morris水迷宫实验 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 多次七氟烷麻醉动物模型 |
| 1.3.2 睾酮含量的年龄差异及其对认知功能的影响 |
| 1.4 小结 |
| 二、睾酮对七氟烷麻醉引起的SH-Sy5y细胞及原代神经元Tau蛋白过度磷酸化及功能损伤的保护作用 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 材料与仪器 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 SH-Sy5y细胞实验结果 |
| 2.2.2 原代神经元实验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 多次七氟烷麻醉细胞模型 |
| 2.3.2 GSK3β在 Tau蛋白磷酸化中的作用 |
| 2.3.3 睾酮对多次七氟烷麻醉造成的神经元毒性具有保护作用 |
| 2.4 小结 |
| 三、睾酮对多次七氟烷麻醉引起的幼年小鼠Tau蛋白表达、认知功能障碍的保护作用 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 材料与仪器 |
| 3.1.3 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 睾酮给药剂量测定 |
| 3.2.2 睾酮含量ELISA检测 |
| 3.2.3 Western blot实验 |
| 3.2.4 海马区结构HE染色 |
| 3.2.5 Morris 水迷宫 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 幼年小鼠多次睾酮给药模型 |
| 3.3.2 睾酮减轻多次七氟烷麻醉在幼年小鼠中造成的GSK3β激酶活性增加及Tau蛋白过度磷酸化 |
| 3.3.3 睾酮对多次七氟烷麻醉导致的幼年小鼠行为学改变具有保护作用 |
| 3.4 小结 |
| 四、七氟烷及睾酮对Tau蛋白与GSK3β蛋白结合力的作用 |
| 4.1 对象和方法 |
| 4.1.1 实验细胞 |
| 4.1.2 实验动物 |
| 4.1.3 材料与仪器 |
| 4.1.4 实验方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 免疫共沉淀 |
| 4.2.2 Nano-chip蛋白结合力检测 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 Tau蛋白与GSK3β的结合作用以及七氟烷、睾酮对其调节作用 |
| 4.3.2 Nano-chip蛋白结合力检测 |
| 4.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 睾酮在大脑发育及认知功能中的作用 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）PCB153通过Mark4诱导睾丸间质细胞氧化应激抑制睾酮合成（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞毒性试验 |
| 2.2.2 睾酮(T)浓度测定 |
| 2.2.3 免疫印迹(WB) |
| 2.2.4 线粒体膜电位检测(JC-1) |
| 2.2.5 活性氧(ROS)检测 |
| 2.2.6 过氧化氢酶(CAT)活性检测 |
| 2.2.7 siRNA干扰 |
| 2.2.8 大鼠体内实验 |
| 2.2.9 HE染色 |
| 2.2.10 透射电镜(TEM) |
| 2.2.11 数据分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 PCB153抑制睾丸间质细胞的睾酮合成功能 |
| 3.1.1 PCB153抑制TM3细胞睾酮分泌 |
| 3.1.2 PCB153诱导TM3细胞氧化应激及线粒体损伤 |
| 3.1.3 PCB153诱导TM3细胞类固醇生成相关酶合成水平降低 |
| 3.1.4 体内PCB153处理降低大鼠血清睾酮水平并影响精子发生 |
| 3.2 敲低Mark4 表达可抑制PCB153 引起的TM3 细胞睾酮合成障碍 |
| 3.2.1 敲低Mark4 可抑制PCB153 引起的睾酮水平下降 |
| 3.2.2 敲低Mark4 表达可缓解PCB153 诱导的氧化应激及线粒体损伤 |
| 3.3 NF-κB信号通路抑制剂可缓解PCB153 引起的TM3 细胞睾酮合成障碍 |
| 3.3.1 NF-κB信号通路抑制剂可部分拮抗PCB153 引起的睾酮合成障碍 |
| 3.3.2 NF-κB信号通路抑制剂可缓解PCB153 诱导的氧化应激改变 |
| 3.3.3 大鼠体内抑制NF-κB信号通路可缓解 PCB153 诱导的睾酮合成障碍 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）轻型颅脑损伤（TBI）血清Tau蛋白变化与损伤程度和预后的相关性的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 材料及方法 |
| 2.1 研究对象的选择 |
| 2.2 标本的采集及检测 |
| 2.3 预后的评估方法 |
| 2.4 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 一般资料比较 |
| 3.2 ELISA法对比两组TBI后血清Tau蛋白含量变化情况 |
| 3.3 对比TBI组不同时间段下患者血清Tau蛋白浓度(单位为pg/ml)的变化情况 |
| 3.4 对比TBI组不同时间段下生活质量(SF-36) |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 Tau蛋白与颅脑损伤研究的新进展 |
| 参考文献 |
（6）微囊藻毒素对多种靶器官的毒性作用研究进展（论文提纲范文）
| 1 微囊藻毒素的肝肾毒性新进展 |
| 1.1 微囊藻毒素导致肝脏脂质代谢紊乱 |
| 1.2 微囊藻毒素干扰肝脏代谢功能 |
| 1.3 微囊藻毒素促进肝肾肿瘤的形成 |
| 2 微囊藻毒素的胚胎发育毒性 |
| 2.1 PP2A抑制导致胚胎肝脏糖原含量下降及细胞骨架破坏 |
| 2.2 细胞凋亡增加影响胚胎心脏的发育 |
| 2.3 甲状腺轴基因表达异常干扰胚胎内分泌系统 |
| 3 微囊藻毒素的生殖毒性 |
| 3.1 微囊藻毒素导致睾丸受损及精子生成障碍 |
| 3.2 微囊藻毒素导致卵巢受损及卵子生成障碍 |
| 3.3 微囊藻毒素引起睾酮与雌二醇水平紊乱 |
| 4 微囊藻毒素的神经毒性 |
| 4.1 微囊藻毒素通过有机阴离子转运多肽入脑 |
| 4.2 微囊藻毒素破坏神经细胞的细胞骨架 |
| 4.3 微囊藻毒素触发CaN信号诱导凋亡 |
| 4.4 微囊藻毒素扰乱神经递质系统 |
| 5 微囊藻毒素的免疫毒性 |
| 5.1 脾脏出现病理损伤和免疫反应 |
| 5.2 细胞因子分泌和免疫细胞增殖异常 |
| 6 结语和展望 |
（7）孕期DEHP暴露对胎盘组织结构的影响及作用机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 DEHP暴露对胎鼠生长发育的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 DEHP暴露对胎盘组织基因表达谱的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 从mRNA和蛋白水平分析DEHP暴露引起胎盘组织结构改变的机制 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（8）丙烯酰胺对大鼠学习记忆的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 全文缩写词 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 丙烯酰胺对大鼠学习记忆能力的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 丙烯酰胺导致大鼠学习记忆损伤的机制 |
| 前言 |
| 材料与和法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 PERK和 ALP在丙烯酰胺损伤学习记忆中的作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 局限性 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（9）急性低压低氧环境下膜法氧气机富氧干预对大鼠认知功能及海马结构的影响（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 一、我国高原地理环境及人群现状 |
| 二、急性低压低氧环境对认知功能及大脑结构的影响 |
| 1 急性低压低氧环境对认知功能的影响 |
| 1.1 对动物认知功能的影响 |
| 1.2 对人体认知功能的影响 |
| 2 急性低压低氧环境对大脑结构的影响 |
| 3 急性低压低氧环境对认知功能及大脑结构影响的相关分子生物学机制 |
| 三、我国高原抗缺氧装备的研制及应用 |
| 1 加压增氧 |
| 1.1 高压氧舱 |
| 1.2 增压舱 |
| 1.3 增压帐篷 |
| 1.4 单兵高压氧衣 |
| 1.5 单兵高原增氧呼吸器 |
| 2 富氧增氧 |
| 2.1 富氧室 |
| 2.2 富氧帐篷 |
| 2.3 高原便携式单兵/车载富氧机 |
| 课题总体设计方案 |
| 第一部分 模拟高原低压低氧条件下弥散富氧环境和急性缺氧动物模型的建立 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 模拟高原低压低氧条件下弥散富氧环境的建立与测试 |
| 2.1.1 平原条件下弥散富氧环境的建立及测试 |
| 2.1.2 模拟高原低压低氧环境的建立及测试 |
| 2.1.3 模拟高原低压低氧条件下弥散富氧环境的建立及测试 |
| 2.2 实验分组与富氧干预 |
| 2.3 大鼠自发协调性活动检测 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 模拟高原低压低氧环境及弥散富氧环境数据测试 |
| 3.2 急性低压低氧暴露及富氧干预对大鼠体重的影响 |
| 3.3 急性低压低氧暴露及富氧干预对大鼠自发活动的影响 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 急性低压低氧环境下膜法氧气机富氧干预对大鼠空间学习记忆能力及海马结构的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂 |
| 1.3 实验主要设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 定位航行训练 |
| 2.3 分组干预 |
| 2.4 空间探索能力测试 |
| 2.5 大鼠海马组织结构观察 |
| 2.5.1 大鼠海马组织CA1 区形态结构观察 |
| 2.5.2 神经细胞超微结构观察 |
| 2.6 蛋白质印迹法(Western Blot)检测海马组织Tau蛋白表达水平 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 认知功能测试 |
| 3.1.1 定位航行训练 |
| 3.1.2 空间学习记忆能力测试 |
| 3.2 大鼠海马组织结构观察 |
| 3.2.1 大鼠海马组织CA1 区形态结构观察 |
| 3.2.2 神经细胞超微结构观察 |
| 3.3 大鼠海马组织Tau蛋白表达分析 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（10）甲醇致恒河猴认知障碍模型的建立与相关机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 甲醛对SH-SY5Y细胞的损伤作用 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 细胞系来源 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器设备和耗材 |
| 1.4 主要试剂配制 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 细胞实验分组与处理 |
| 2.3 细胞划痕实验 |
| 2.4 细胞活性检测实验 |
| 2.5 细胞凋亡检测 |
| 2.6 细胞炎性因子检测 |
| 2.7 透射电镜观察细胞超微结构 |
| 2.8 免疫印迹法检测相关蛋白表达情况 |
| 3. 统计方法 |
| 结果 |
| 1. 甲醛对SH-SY5Y细胞迁移能力的影响 |
| 2. 甲醛对SH-SY5Y细胞活性的影响 |
| 3. 甲醛促进SH-SY5Y细胞凋亡 |
| 4. 甲醛对SH-SY5Y细胞炎性因子的影响 |
| 5. 甲醛促进SH-SY5Y细胞超微结构的损伤 |
| 6. 甲醛上调SH-SY5Y细胞磷酸化tau蛋白及线粒体裂解相关蛋白 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 甲醇致恒河猴认知障碍模型的建立与相关机制研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要抗体 |
| 1.4 主要仪器设备 |
| 1.5 主要耗材 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 恒河猴分组与处理 |
| 2.2 行为学训练及实验 |
| 2.3 恒河猴标本采集(血液、脑脊液、尿液及粪便) |
| 2.4 尿液甲醛含量检测 |
| 2.5 病理学方法检测 |
| 2.6 炎性多因子检测 |
| 2.7 免疫印迹法检测脑组织蛋白表达 |
| 2.8 恒河猴肠道微生物菌群检测 |
| 2.9 恒河猴尿液代谢组学检测 |
| 3. 统计方法 |
| 结果 |
| 1. 行为学结果 |
| 1.1 VSDRT检测到恒河猴记忆能力下降 |
| 1.2 空间识别转换任务结果 |
| 1.3 ORT实验检测到恒河猴认知能力下降 |
| 1.4 OR实验检测到恒河猴认知能力下降 |
| 1.5 Viewpoint测试检测到恒河猴运动量的增加 |
| 1.6 Viewpoint测试未检测到恒河猴睡眠障碍 |
| 2. 病理学检测结果 |
| 3. 尿液甲醛含量检测结果 |
| 4. 炎性多因子检测结果 |
| 5. 血常规及生化、便常规及镜检检测结果 |
| 6. 免疫印迹检测结果 |
| 7. 恒河猴肠道微生物菌群检测结果 |
| 7.1 物种相对丰度分析 |
| 7.2 组间差异物种分析 |
| 7.3 组间肠道菌群差异分析(T-test检验法) |
| 8. 恒河猴尿液代谢组学检测结果 |
| 8.1 恒河猴尿液差异代谢物分析 |
| 8.2 恒河猴尿液差异代谢物KEGG通路分析 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
四、Expression changes in tau and microtubule-associated proteins in rat testicular interstitium（论文参考文献）
- [1]含KIF3A的ARF6上游激活诸亚网诱导学习的源头调控分子和知识系统[D]. 薛帅东. 北京邮电大学, 2020(05)
- [2]CHIP蛋白过表达对阿尔茨海默病和帕金森病小鼠模型的保护作用[D]. 胡正威. 郑州大学, 2020(02)
- [3]睾酮通过调节GSK3β减轻七氟烷导致的Tau磷酸化及认知障碍[D]. 杨永妍. 天津医科大学, 2020(06)
- [4]PCB153通过Mark4诱导睾丸间质细胞氧化应激抑制睾酮合成[D]. 樊云霞. 中国医科大学, 2020(01)
- [5]轻型颅脑损伤（TBI）血清Tau蛋白变化与损伤程度和预后的相关性的研究[D]. 王祥. 安徽医科大学, 2020(02)
- [6]微囊藻毒素对多种靶器官的毒性作用研究进展[J]. 叶冠琛,王一如,徐立红. 中国细胞生物学学报, 2019(06)
- [7]孕期DEHP暴露对胎盘组织结构的影响及作用机制[D]. 徐婉. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [8]丙烯酰胺对大鼠学习记忆的影响及机制研究[D]. 严丹丹. 华中科技大学, 2019(03)
- [9]急性低压低氧环境下膜法氧气机富氧干预对大鼠认知功能及海马结构的影响[D]. 阮俊勇. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [10]甲醇致恒河猴认知障碍模型的建立与相关机制研究[D]. 李红威. 北京协和医学院, 2019(02)