一、热休克蛋白70对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用（论文文献综述）
邓爽,蒲锐,陈子扬,张建超,袁凌燕[1]（2022）在《运动预适应干预压力超负荷心肌重构模型小鼠的心肌功能及细胞凋亡》文中研究指明背景:研究已表明长期规律有氧运动不仅能降低血压,还具有改善高血压病理性心肌肥厚、心肌纤维化致心室重构的作用。目的:探讨游泳运动预处理对压力超负荷代偿期小鼠心肌凋亡与心肌重构的影响。方法:选取六七周龄雄性C57B/L6小鼠随机分为对照组、运动组、手术组、手术运动组。运动组和手术运动组小鼠进行4周的游泳运动（90 min/次,2次/d,7 d/周）;在完成游泳运动后,手术组和手术运动组2组小鼠进行主动脉缩窄手术建立压力超负荷心肌重构模型,采用27G针头结扎,使主动脉缩窄70%以上;对照组小鼠进行假手术只穿线不结扎。2周后进行心脏超声检测并取材,观察心肌细胞的凋亡情况。采用Western Blot方法检测小鼠心肌组织中热休克蛋白70、P53蛋白的表达水平;RT-PCR方法检测小鼠P53、Bcl-2、Bax基因的表达水平。结果与结论:（1）主动脉缩窄手术后2周小鼠心脏处于代偿期,与对照组相比,手术组的心重指数,左室短轴缩窄率均明显升高（P <0.01）,心室壁厚度与心肌纤维化显着增加（P <0.01）,心功能无显着下降;手术运动组心室壁厚度明显小于手术组（P <0.05）,心肌纤维化水平与凋亡细胞计数显着降低（P <0.01）;（2）与对照组相比,手术组P53蛋白表达量显着增加（P <0.01）,热休克蛋白70蛋白表达量显着下降（P <0.01）;与手术组相比,手术运动组P53蛋白表达量下降（P<0.05）,热休克蛋白70蛋白表达量升高（P<0.05）;（3）与对照组相比,手术组Bax mRNA和P53 mRNA表达增多（P <0.01）,而Bcl-2 mRNA表达量和Bcl-2/Bax值下降（P <0.01）;与手术组相比,手术运动组Bax mRNA表达水平下降（P <0.05）,P53 mRNA表达水平下降（P <0.01）,Bcl-2 mRNA表达水平和Bcl-2/Bax比值明显升高（P <0.01）;（4）结果提示,小鼠心脏在2周的主动脉缩窄手术后处于病理性心肌肥厚的代偿期,4周的运动预适应可增强压力超负荷早期小鼠的心功能,维持并延缓早期心肌代偿重构发生的病理发展。运动预适应诱导的心肌保护作用可能与上调心肌保护蛋白热休克蛋白70、促进心肌抗凋亡因子Bcl-2、抑制促凋亡因子P53和Bax表达有关,从而抑制心肌细胞凋亡。
闫玉雪[2]（2021）在《亚硒酸钠对氯化汞所致鸡心肌毒性的拮抗作用研究》文中提出汞（Hg）是一种具有生物毒性的重金属并广泛存在于自然界,各种形式的汞可以通过食物链富集进入畜禽体内,从而造成其生产性能的下降。硒（Se）是动物机体必需的微量元素,以硒蛋白的形式发挥生物学的功能,同时还具有缓解重金属毒性的作用。近年来,已有研究表明Se缓解重金属导致的组织及器官损伤,但Se拮抗氯化汞（Hg Cl2）导致的鸡心肌组织的损伤作用机制尚不明确。因此本试验建立亚硒酸钠（Na2Se O3）拮抗Hg Cl2损伤鸡心肌模型来探讨其作用机制。90只1日龄海兰褐雏鸡,随机分为Con组、Hg Cl2组和Hg Cl2+Se组,每组30只。Con组饲喂标准商品日粮和饮用水;Hg Cl2组饲喂标准商品日粮和添加含量为250 mg/L Hg Cl2的饮用水;Hg Cl2+Se组饲喂添加含量为10 mg/kg的Na2Se O3的商品日粮和添加含量为250 mg/L Hg Cl2的饮用水。在试验7周后处死所有鸡,并采集心肌样品。采用HE染色观察鸡心肌病理组织学变化。采用试剂盒检测血清酶肌酸激酶（CK）,乳酸脱氢酶（LDH）的活性和氧化应激指标（MDA、GSH-PX和T-SOD）。采用蛋白质印迹法（WB）对细胞Ca2+通道相关受体蛋白（IP3R1、RYR2、PLN、SERCA2、STIM2、Orai1、CAMK2D、CAMK2G、NCX1和PMCA）、内质网应激相关蛋白（GRP78、PERK、e If2α、ATF4、ATF6、XBP1和CHOP）、细胞凋亡相关蛋白（Bak1和Caspase-3）、热休克蛋白（HSP27、HSP40、HSP60和HSP70）和内质网定居硒蛋白（SELENOK、SELENOM、SELENON和SELENOS）表达水平进行检测。试验结果显示:Se缓解鸡心肌纤维的溶解和减少,抑制血清酶CK和LDH的活性,缓解Hg Cl2暴露导致鸡心肌组织的损伤。Se抑制Bak1和Caspase-3蛋白表达水平上调,拮抗Hg Cl2暴露导致鸡心肌组织的凋亡。Se提高抗氧化酶T-SOD和GSH-PX的活性,降低MDA的含量,缓解Hg Cl2暴露导致鸡心肌组织的氧化应激。Se抑制PERK-ATF4-CHOP通路,缓解Hg Cl2暴露导致鸡心肌组织的内质网应激。Se抑制HSP27、HSP40、HSP60和HSP70蛋白表达水平的上调,抑制Hg Cl2暴露导致鸡心肌组织热休克蛋白的激活。Se调节细胞膜、胞浆和内质网上Ca2+相关受体蛋白的表达,缓解Hg Cl2暴露导致的鸡心肌组织[Ca2+]ER耗竭和[Ca2+]c超载。Se调节内质网驻留的硒蛋白SELENOK、SELENOM、SELENON和SELENOS的表达,拮抗Hg Cl2暴露导致鸡心肌损伤作用。结论:Se拮抗Hg Cl2暴露导致鸡心肌组织[Ca2+]ER耗竭介导的氧化应激和内质网应激引起的细胞凋亡。
张加勇[3]（2020）在《鸡饲料铅污染调查与硒颉颃铅致鸡脾脏毒性效应的评价》文中研究指明随着饲料业迅速发展,中国已成为世界上最大饲料生产国。饲料质量与畜牧业息息相关,其中包括畜禽健康和畜产品的安全性。铅是主要的环境污染物之一,含铅的“工业三废”排放均会污染环境和饲料原料,经由动物采食后进入生物链,进而蓄积体内,造成多个组织器官损伤。硒是机体必需的微量元素,具有抗衰老、增强机体免疫力、抗氧化和抗肿瘤等功效,对重金属具有排毒解毒的作用,被誉为“重金属的天然解毒剂”。为评估饲料铅的污染状况,本试验采用原子吸收光谱法对2014年-2016年黑龙江省部分地区的饲料进行抽检。此外,为探究饲料铅暴露对鸡脾脏细胞的毒性作用及硒对铅诱导脾脏毒性的保护作用,我们建立硒颉颃铅诱导鸡脾脏损伤模型,观察鸡脾脏组织的显微结构变化并检测铅和硒的含量、氧化应激水平、程序性坏死相关通路的m RNA和蛋白水平以及热休克蛋白的m RNA和蛋白水平,并开展了体外试验对上述结果进行验证,旨在从为硒颉颃铅诱导的鸡脾脏细胞毒性作用机制的研究提供理论依据。结果表明:（1）2014年-2016年各地的饲料抽检样品中,肉鸡饲料214份,铅含量超标率为18.22%;蛋鸡饲料226份,铅含量超标率为0.00%。（2）与正常组相比,硒组脾脏组织和细胞中检测的所有指标均差异不显着（p>0.05）,铅组脾脏中铅硒含量和氧化应激水平的检测结果均差异极显着（p<0.05）;硒铅组病理学、组织中铅硒含量、氧化应激水平、NF-κB通路和MAPK通路的检测结果介于对照组和铅组之间,统计学上均表现为显着差异,说明铅对鸡脾脏细胞具有毒性作用,并且硒可以缓解铅的毒性。（3）AO/EB双重荧光染色和流式细胞术结果显示,铅可以诱导鸡脾淋巴细胞发生程序性坏死,添加硒可以在一定程度上缓解淋巴细胞的坏死率。（4）通过对程序性坏死相关通路的基因（MLKL、RIP 1、RIP 3、FADD和Caspase-8）m RNA和蛋白水平的检测,结果发现,硒铅组和铅组MLKL、RIP 1、RIP 3和FADD的m RNA和蛋白水平均显着增加（p<0.05）,并且铅组的m RNA和蛋白水平增加的最多;硒铅组和铅组Caspase-8的m RNA和蛋白水平均显着降低（p<0.05）,并且在铅组的m RNA和蛋白水平达到了最低;进一步证实了饲料中添加硒可以显着改善铅诱导的鸡脾细胞程序性坏死。（5）通过对热休克蛋白相关基因（HSP 27、HSP 40、HSP 60、HSP 70和HSP 90）m RNA和蛋白水平的检测,发现铅可以诱导热休克蛋白相关基因在m RNA和蛋白水平的增加,添加硒可以缓解热休克蛋白相关基因在m RNA和蛋白水平的增加,提示铅可以通过激活热休克蛋白家族诱导脾脏组织和细胞发生应激。而硒的添加在一定程度上通过抑制热休克蛋白家族的激活缓解了铅诱导的鸡脾脏组织和细胞的应激。综上所述,肉鸡饲料存在铅含量超标现象,饲料中铅的过量对鸡脾脏具有毒性作用,表现为过量铅可以引起鸡脾脏病理学结构的改变,诱导脾脏细胞发生氧化应激,进而激活NF-κB信号通路和MAPK信号通路,导致脾脏细胞发生炎症反应和程序性坏死,并诱导热休克蛋白家族基因的表达,硒的添加可以在一定程度上缓解组织病理学改变、氧化应激、炎症反应和程序性坏死的发生,说明硒可以作为动物生产中铅的有效解毒剂。
周桐[4]（2020）在《双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血再灌注后VCAM-1及IL-1β的影响实验研究》文中研究指明目的:本实验通过观察测定双参通脉颗粒干预心肌缺血再灌注造模后的大鼠血清中血管细胞粘附分子VCAM-1及白细胞介素IL-1β的含量变化,然后在光学显微镜下观察大鼠心肌细胞的形态学改变。探讨双参通脉颗粒对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞的作用及可能的作用机制,验证双参通脉颗粒治疗此类心血管疾病的有效作用,并为临床推广此类中医药疗法治疗疾病提供理论依据。材料与方法:制备院内中药制剂双参通脉颗粒。将大鼠随机分为六组:对照组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组,每组十只大鼠。其中西药组予合心爽,中药组予不同剂量的双参通脉颗粒,每日1次进行药物灌胃,其余两组予等量的生理盐水灌胃,连续两周。之后通过结扎左冠状动脉前降支对大鼠进行造模手术,其中对照组只做开胸手术不做结扎手术,从而复制大鼠心肌缺血再灌注损伤的模型。从大鼠腹主动脉采集血清,分别按照VCAM-1及IL-1β的试剂盒要求,采用ELISA法测定各组指标含量,并用HE染色法制作心肌组织切片,在光学显微镜下观察形态学变化。结果:1.VCAM-1:与对照组比较,模型组及各个用药组VCAM-1水平明显提高（P<0.05）;与模型组比较,各个用药组VCAM-1水平明显下降（P<0.05）;与中药低剂量组相比,中药中剂量和高剂量组VCAM-1水平下降（P<0.05）;2.IL-1β:与对照组比较,模型组及各个用药组IL-1β水平明显提高（P<0.05）;与模型组比较,各个用药组IL-1β水平明显降低（P<0.05）;与中药低剂量组相比,中药中剂量和高剂量组IL-1β水平下降（P<0.05）;3.光学显微镜观察到,模型组大鼠细胞核肿胀变圆,心肌间质水肿,组织间隙增宽。中药组大鼠胞核未见明显肿胀,间质水肿减轻,心肌细胞排列较为致密整齐。结论:1.心肌缺血再灌注损伤后的大鼠血清中VCAM-1及IL-1β含量明显升高;2.双参通脉颗粒能够降低大鼠血清中VCAM-1及IL-1β的水平,且在一定范围内与药物剂量成正相关;3.双参通脉颗粒能保护心肌组织及细胞的结构,可能的机制是由于降低了大鼠VCAM-1及IL-1β水平。
郑文亚[5]（2019）在《运输应激对山羊主要器官的应激损伤及热休克蛋白表达的影响》文中研究指明畜禽运输是畜牧业生产过程中必不可少的一个重要环节,运输过程中的拥挤、颠簸、震动、噪音、温度变化和禁食禁水等复合应激源均可造成动物机体生理紊乱、发病甚至死亡,同时降低肉品质量和动物福利,给畜牧业带来巨大的经济损失。热休克蛋白参与各种生命活动,主要发挥分子伴侣作用,具有组装、折叠和转运等功能,同时参与抗应激和抗凋亡等生理活动,在运输应激中可能发挥一定的作用。本实验选用12只体重相近（13.89±2.96 Kg）且健康的赣西公山羊为实验动物并将其随机分为3组,即对照组（不运输）、2 h运输处理组和6 h运输处理组,运输处理组在温度为28℃32℃、车速为3545 km/h条件下进行公路运输,运用HE染色、透射电镜技术、实时定量PCR、免疫组织化学和Western blot方法,系统分析了不同运输时间山羊心脏、肝脏、肾脏、肺脏、气管、支气管、脾脏、淋巴结和小肠的显微和超微病理变化,并探讨运输前后HSP27、HSP70和HSP90在山羊主要器官的分布和表达情况,为探讨山羊运输应激发病机制及其解决方案的研究提供基础资料。本研究主要取得了以下结果:（1）山羊心脏实验结果表明运输后心肌纤维发生颗粒变性,线粒体肿胀、破裂,间质水肿、充血出血、炎性细胞浸润,6 h运输处理组病变更严重。3种蛋白主要在心肌细胞胞质中表达,HSP27和HSP90在胞核中也表达。与对照组相比,2 h和6 h运输处理组HSP27、HSP70和HSP90的mRNA水平均升高,并且2 h运输处理组HSP27、HSP70和HSP90的蛋白表达量也有所升高,6 h运输处理组仅HSP70和HSP90的蛋白表达量有所升高。（2）山羊肝脏实验结果表明处理组肝脏发生不同程度的损伤,中央静脉扩张充血,窦间隙变小,肝细胞出现明显的颗粒和水泡变性,少量肝细胞核染色质聚集,线粒体肿大变形、嵴断裂消失,胞质中出现空泡和脂滴,6 h运输处理组更为严重。HSP27在中央静脉和门管区附近的肝细胞、血管内皮细胞及胆小管上皮细胞的胞质中都有分布;HSP70与HSP90主要定位于中央静脉和门管区附近的肝细胞胞质中,HSP90在胞核也有表达。与对照组相比,2 h运输处理组仅HSP27和HSP90的mRNA表达量上调,而6 h运输处理组仅HSP70的mRNA表达量上调,同时两个处理组仅HSP27与HSP70的蛋白表达量高于对照组。（3）山羊肾脏实验结果表明部分肾小管和集合小管结构紊乱,管腔界限不清,管腔可见脱落的上皮细胞和黏液,肾小球充血、肿胀,肾小囊腔变窄,线粒体肿胀且嵴断裂并减少,运输6 h后充血、出血更明显,管腔和肾小球细胞损伤更严重。对照组3种蛋白主要在肾小管和集合小管表达,运输后表达更强,处理组肾小体也可见阳性反应。与对照组相比,2 h运输处理组HSP27与HSP90的mRNA和蛋白表达量均有上调,而HSP70的mRNA的表达量下调,其蛋白表达量上调,6 h运输处理组仅HSP27的mRNA表达上调,而3个分子的蛋白表达均上调。（4）山羊肺脏、气管和支气管实验结果表明运输后气管和支气管黏膜水肿、充血,炎性细胞浸润,纤毛倒伏、断裂和脱落,少量黏膜上皮细胞变性、坏死,纤毛和杯状细胞超微病变明显,线粒体肿胀、嵴溶解减少,血管内皮细胞膜起泡、破损。肺泡腔塌陷或融合,肺泡隔增宽、充血,炎性细胞浸润,部分肺泡上皮细胞变性,肺泡腔可见脱落的细胞和碎片,肺泡II型上皮细胞超微病变明显,肺泡I型上皮细胞膜不平整、胞质空泡化,运输6 h后损伤更严重。HSP27和HSP70在气管和支气管上皮、腺上皮和血管内皮表达,处理组阳性表达的炎性细胞数量增多,在肺泡细胞和细支气管上皮普遍表达,HSP90表达强度较弱,仅在气管和支气管上皮、腺上皮及肺泡II型上皮细胞、细支气管上皮表达。气管HSP70蛋白表达量在2 h和6 h运输处理组与对照组相比明显上调,2 h运输处理组肺脏HSP70的mRNA和蛋白表达量与对照组相比均明显上调。（5）山羊淋巴结和脾脏实验结果表明运输后淋巴结和脾脏均出现急性病理变化,淋巴小结和脾小结增生明显,6 h运输处理组淋巴细胞和网状内皮细胞可见核破碎,细胞超微病变明显,发生凋亡或坏死。运输前后3种蛋白在淋巴结和脾脏中的定位存在差异,HSP27主要分布在弥散淋巴组织,HSP70和HSP90主要分布在淋巴小结和脾小结。与对照组相比,2 h运输处理组HSP27、HSP70和HSP90的mRNA水平在淋巴结和脾脏中均上调,而6 h运输处理组仅淋巴结中HSP70的mRNA水平和脾脏中HSP90的mRNA水平有所上调;两个处理组的淋巴结与脾脏HSP90蛋白表达量均有所上调,并且运输2 h后HSP27的蛋白在脾脏、HSP70的蛋白在淋巴结的表达量上调,运输6 h后HSP70在脾脏中的表达量与对照组相比下调。（6）山羊十二指肠、空肠和回肠实验结果表明运输后肠绒毛黏膜上皮和固有层有炎性细胞浸润、充血和出血,少量上皮细胞变性,微绒毛倒伏,核固缩,线粒体肿胀、增生。3种蛋白主要在肠绒毛上皮表达,HSP27和HSP70主要在胞质表达,HSP90在胞质和胞核均有表达。与对照组相比,十二指肠中HSP27和HSP70的mRNA水平在6 h运输处理组中均上调,2 h运输处理组仅HSP27的mRNA水平上调,而在蛋白水平上,仅HSP90的蛋白表达量在运输6 h后上调;空肠HSP27、HSP70和HSP90的mRNA水平在2 h运输处理组均上调,6 h运输处理组中仅HSP70的mRNA水平上调;回肠中仅HSP70的mRNA水平在2 h运输处理组上调,而HSP27的mRNA水平在两个处理组中均下调,HSP27蛋白表达量在两个处理组均明显降低,在运输2 h后HSP70蛋白表达量与对照组和6 h运输处理组相比均有所升高。总之,运输应激对山羊主要实质器官和空腔器官均造成了一定程度的病理性损伤,随着运输时间的延长损伤加重。运输后,HSP27、HSP70和HSP90的定位情况在不同器官中均出现了不同的变化,其mRNA和蛋白的表达量也有一定的变化,提示这些分子与运输应激对山羊脏器的损伤之间存在一定的联系。
王雪[6]（2019）在《运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响》文中指出目的:观察运动预处理对老龄大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及心肌Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响,探讨其相关机制。方法:将48只雄性SD老龄大鼠随机分成对照组、模型组、运动预处理+模型组、运动预处理+对照组,每组12只。采用Langendorff离体灌流系统建立大鼠离体心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）模型。本实验检测的指标:全程监测并记录平衡灌注末期与再灌注末期各实验组心率与左心室发展压等心功能相关指标;再灌注结束后,选用TTC染色法测量大鼠心肌梗死面积;利用透射电镜观察老龄大鼠心肌细胞超微结构和自噬体的形成;采用Western Blot法检测老龄大鼠心肌内Beclin 1、Atg5蛋白表达含量。结果:1.各组大鼠心功能变化:与模型组比较,对照组、运动+对照组、运动+模型组的心功能指标均升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,运动+对照组心功能指标升高,差异有统计学意义（P<0.05）;2、各组大鼠心肌梗死面积:与模型组相比,运动+模型组心肌梗死面积减小,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组与运动+对照组不存在心肌梗死区域。3、各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的变化:对照组与运动+对照组在透射电镜下的心肌纤维排列均整齐且紧密,心肌细胞形态正常,细胞核膜完整,基本未见自噬体,运动+对照组较对照组的线粒体嵴数量更丰富;模型组出现明显的自噬体,心肌纤维束排列疏松紊乱,心肌细胞线粒体肿胀,嵴密度降低,很难见完整的细胞器结构;运动+模型组的心肌细胞超微结构较模型组明显改善,电镜下可观察到肌原纤维排列整齐,肌小节完整,线粒体形态和结构基本正常,视野内有少量自噬体出现。4、各组大鼠心肌Beclin 1、Atg-5蛋白表达含量:与模型组比较,对照组Beclin1、Atg-5蛋白表达明显降低,差异有显着统计学意义（P<0.01）,运动+模型组Beclin1、Atg-5蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组心肌内Beclin 1、Atg-5蛋白表达处于基础水平,与对照组比较,运动+对照组Beclin 1、Atg-5蛋白增加,差异有统计学意义（P<0.05）;结论:1.运动预处理可改善老龄大鼠心脏功能,减小心肌梗死面积,发挥心脏保护作用。2.运动预处理可通过调节老龄大鼠心肌细胞中Beclin 1、Atg-5蛋白表达,降低心肌细胞过度自噬,减轻心肌缺血/再灌注损伤。
向都,叶启发,王彦峰[7]（2019）在《热休克蛋白保护缺血再灌注损伤的研究进展》文中研究说明热休克蛋白（HSP）是近年来的研究热点,是一个高度保守的蛋白分子,广泛存在于原核生物和真核生物体内。当机体暴露于高温等各种应激条件下,就会刺激热休克蛋白的表达,从而保护机体功能。文章主要就热休克蛋白对心脏、肾脏、肝脏、脑和睾丸缺血再灌注损伤的保护作用进行系统性阐述。
陈勇[8]（2019）在《姜黄素对果蝇和小鼠应激反应的影响及分子机制研究》文中研究指明大量体内外研究报道证实,姜黄素具有多种生物活性（如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等）功效,但其对改善机体应激应答反应及其分子机制尚未阐明。所谓应激是机体在各种内外环境因素及社会、心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应。应激应答反应则是机体在应激源（如高温、极寒、缺氧、力竭运动等）刺激下,机体通过激活一系列应答机制从而适应内外环境变化。当应激超出机体调节能力,持续应激将导致机体应激损伤、组织损伤,甚至细胞凋亡。随着全球气候变暖,环境气候变化对人类健康构成威胁以及对农业生产造成较大影响。本实验室前期试验表明,在高温环境下用姜黄残渣（含姜黄素1.69μg/g）喂养中华鳖,与对照组相对提高存活率51.3%,揭示姜黄素在中华鳖抗高温热应激中起重要作用,为进一步探索姜黄素对机体应激应答反应的改善作用的分子机制,本课题分别采用高温热应激与力竭运动应激两种方式,开展了姜黄素抗热应激与抗运动应激性疲劳作用的研究,主要研究内容和结果如下:1.姜黄素减缓高温热应激诱导的氧化应激损伤,提高果蝇抗热应激能力。以野生型Canton-S果蝇为模式生物,设置四种不同温度处理,研究了姜黄素对高温热胁迫果蝇寿命的影响及分子机制,通过果蝇体内氧化应激水平、抗氧化相关酶活力、抗氧化酶基因表达量以及热休克蛋白相关基因表达量分析,结果表明姜黄素能够显着提高高温热胁迫果蝇的抗氧化酶活力,减缓高温热应激诱导的氧化应激损伤,并抑制热休克相关蛋白基因表达量,减缓热应激反应诱导的机体损伤,从而提高果蝇抗热应激能力,提高果蝇高温环境下的存活率。2.姜黄素缓解高温热应激对小鼠肝脏和心脏的损伤。为探索姜黄素抗热应激作用对哺乳动物的功效,以C57BL/6J雄性小鼠为模式生物,研究了姜黄素对高温热应激处理小鼠肝脏和心脏的保护作用及其分子机制。试验设定了无热应激处理对照组、热应激处理对照组、阿司匹林药物组及三个不同剂量姜黄素干预组。通过对小鼠肝脏和心脏多项生理与生化指标测定,结果表明了姜黄素通过激活Nrf2/Keap1信号通路提高肝脏抗氧化水平,以减缓高温热应激诱导的氧化应激损伤以及抑制心脏血管紧张素受体1和内质网应激介导的细胞凋亡信号通路,减缓高温热应激诱导的心肌损伤。3.姜黄素激活Nrf2/Keap1信号通路提高抗氧化水平,减少运动应激损伤。基于姜黄素抗热应激结果,进一步研究了姜黄素在其他应激条件下的调节机制。采用力竭游泳为运动应激诱导方式,研究了姜黄素对力竭运动小鼠抗疲劳能力的改善作用及其分子机制。试验设定了空白对照组、力竭游泳对照组、维生素C组以及三个不同剂量姜黄素干预组,测定了力竭游泳后小鼠血清、肝脏和骨骼肌中的多项生理与生化指标,结果表明了姜黄素能有效提高小鼠负重游泳时间（姜黄素中剂量干预组小鼠负重游泳是力竭游泳对照组的3.7倍）,其机制主要通过调节糖异生途径相关酶活力以提高能力代谢水平,以及激活Nrf2/Keap1信号通路提高抗氧化水平,减少氧化应激损伤。4.转录组学分析结果提出了姜黄素抗疲劳作用新靶点。基于姜黄素对小鼠运动应激性疲劳的改善作用,选取姜黄素中剂量干预组和力竭游泳对照组小鼠肝脏组织进行转录组高通量测序分析。结果表明姜黄素对力竭游泳小鼠的抗疲劳作用可能是通过调控PI3K-Akt、cAMP-Creb、cGMP-PKG、PPAR-γ以及脂肪细胞脂解作用信号通路实现,试验结果首次提出了Fabp3、Ucp1、Atp2a1、Aqp7、Creb5可能是姜黄素抗疲劳作用关键靶点,为今后天然活性物质抗疲劳功效研究提供新的研究靶点。总结:姜黄素激活Nrf2/Keap1信号通路提高机体抗氧化水平是姜黄素改善机体应对应激应答反应主要调节机制,在运动应激中姜黄素对机体能量代谢的改善作用以及对疲劳代谢产物的清除作用,可能是姜黄素提高力竭游泳小鼠抗运动应激性疲劳的关键调节机制。本研究明确了姜黄素在不同应激条件下调节机制的区别与联系,为姜黄素对机体应激应答反应改善作用提供一定的理论基础。
殷斌[9]（2018）在《Vitamin C-Na诱导Hsps表达保护心肌抵抗热应激损伤的作用及机制》文中认为随着集约化养殖与全球变暖趋势的日益加剧,热应激已成为影响畜禽养殖业发展的重大因素之一。热应激会引起机体各组织、器官的损伤,严重时会引发猝死。研究发现热应激猝死与心肌损伤密切相关,心肌对热敏感,当机体遭受热应激刺激时,心脏成为遭受损伤的重要器官之一。因此,探究热应激导致心肌损伤的机制,以及寻找有效的方法保护心肌细胞免受热应激的损伤已成为科研工作者探索的热点。热休克蛋白（heat shock protein,Hsp）是机体在受到各种应激因素刺激时在细胞内诱导合成或合成增加的一组高度保守的保护性蛋白质,可以帮助肽链的正确折叠、组装、移位、复性和降解。除此以外,Hsp还参与细胞凋亡、细胞周期和免疫信号通路,是机体重要的内源性保护机制。本文以H9C2心肌细胞热应激作为研究模型,探讨了热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞的应激性病理损伤及其Hsps的动态变化规律,以小分子αB-crystallin蛋白为重点,探究其过表达提高H9C2心肌细胞耐热性的分子机制。在此基础上,我们还探究了热休克因子1（Heatshockfactor 1,HSF1）在热应激及恢复条件下调控Hsps表达的分子机制。另外,我们还筛选出抗热应激药物维生素C-钠（vitamin C-Na,VC-Na）,从体内、体外角度验证了其诱导Hsps表达和抵抗热应激损伤作用,并对其作用机制进行了阐述。为了观察热应激及应激恢复条件下心肌细胞的应激性病理损伤,以及心肌细胞启动热休克蛋白转录和表达的变化规律,本文在建立心肌细胞热应激与热应激恢复模型基础上,通过组织病理学、RT-PCR和western blot等方法对心肌细胞应激性病理损伤特点、Hsps的转录和翻译水平进行了研究。试验结果显示,42℃热应激持续0.5 h会导致H9C2心肌细胞出现颗粒变性和水泡变性等急性肿胀,应激2 h时尤为明显,可见形成大的空泡,病变在应激恢复生长12h后逐渐减轻。42℃热应激持续5h可导致细胞坏死,恢复生长12h后未见显着性修复效果;热应激0.5 h时,hsp27和hsp 70表现出极显着的诱导差异,CRYAB、hsp47、hsp60、hsp90、hsp110在热应激2h时出现极显着性诱导差异,在应激恢复12h后CRYAB呈现出持续被诱导的趋势,而hsp27、hsp47、hsp60、hsp70、hsp90、hsp110则表现出下降趋势。热应激条件下Hsps蛋白（Hsp27、Hsp47、Hsp60、Hsp70、Hsp90、Hsp110）的表达量均呈现上升趋势,而 CRYAB的蛋白表达量却呈现出下降趋势,在应激恢复生长12h后,CRYAB、Hsp27、Hsp60、Hsp70、Hsp110的表达量均有增加的趋势,Hsp47的表达量基本恢复至正常水平。由此推断Hsps在抗热应激损伤及热损伤修复过程中发挥着重要作用。本文首先构建稳定过表达CRYAB蛋白的H9C2心肌细胞系,通过对热应激条件下细胞的病理组织学检测、细胞周期检测、CRYAB与骨架蛋白F-actin的共定位检测和细胞凋亡及相关蛋白的检测,研究其在心肌细胞受到热应激时发挥的功能及机制。本研究共筛选出3株细胞,一株转染空白质粒命名为control,另两株分别不同程度过表达CRYAB蛋白,命名为CRYAB-5和CRYAB-7。研究结果发现CRYAB-5和CRYAB-7细胞株都可以明显降低热应激导致的细胞颗粒变性和空泡变性,也可以缓解热应激导致的细胞在G0/G1期的阻滞,且效果与CRYAB的表达量呈正比。间接免疫荧光结果显示,CRYAB在遭受热应激刺激时会由胞质转移至胞核,且CRYAB与F-actin骨架蛋白存在共定位表达,过表达CRYAB可以显着降低热应激导致的F-actin骨架蛋白的聚集。另外,过表达CRYAB蛋白的细胞株可以显着降低热应激导致的细胞凋亡,其可能通过降低cleaved-caspase的表达量发挥抗凋亡的功能。综上结果,过表达CRYAB可以显着提高心肌细胞H9C2的耐热性,且其保护效果与CRYAB过表达量成正相关,但是CRYAB发挥功能的具体机制仍需进一步研究。本研究的目的是通过对HSF1在H9C2心肌细胞遭受热应激与热应激恢复条件下的转录水平、蛋白水平、胞质与胞核的分布变化、三聚化以及HSF1干扰对Hsps转录水平的影响,探究H9C2细胞在遭受热应激及恢复条件下HSF1对Hsps的分子调控机制。研究发现,正常条件下,HSF1主要分布在H9C2细胞的胞质中,当遭受热应激刺激时,HSF1转录水平和蛋白表达量均呈现热应激时间依赖性的显着下调,HSF1的分布会由胞质移位至胞核,且发生磷酸化和三聚化;在热应激消失并恢复12h后,HSF1的转录水平和蛋白表达量会显着上升,HSF1的分布会由胞核重新移位至胞质,磷酸化和三聚化消失。HSF1干扰会导致H9C2细胞在正常条件下Hp47和Hsp60转录水平的升高,而对其他Hsps没有显着性影响。另外,HSF1干扰会显着降低热应激及热应激恢复条件下诱导CRYAB、hsp27、hsp 70、hsp90和hsp110转录水平的升高。本研究将VC和VC-Na作为缓解心肌细胞热应激损伤的备选药物,探究其保护H9C2心肌细胞抗热应激损伤及与Hsps抗应激保护作用间的关系。试验将H9C2细胞随机分为对照组、VC组（20μg/mLVC）和VC-Na组（20 μg/mLVC-Na）,研究在遭受0 h,1 h,3 h和5 h热应激后心肌细胞应激性病理损伤、细胞凋亡、LDH、MDA、SOD、ROS和Hsps表达水平等参数的改变。检测结果显示,添加20 μg/mLVC或VC-Na 可以有效降低热应激导致的心肌细胞颗粒变性、空泡变性、核固缩和线粒体损伤,同时可以有效降低细胞凋亡率以及LDH、MDA和ROS的水平;添加20 μg/mLVC或VC-Na可以增加细胞内SOD活性,在热应激3 h时显着增加心肌细胞内CRYAB、hsp27、hsp60和hsp70 的 mRNA水平（P<0.01）,在热应激Oh（P<0.05）和 1h（5<0.01）时显着增加CRYAB的蛋白水平,在热应激3h和5h时显着增加Hsp70的蛋白水平（P<0.01）。研究结果表明,添加20μg/mLVC或VC-Na可以通过增强抗氧化能力和诱导CRYAB和Hsp70的蛋白水平增加,提高H9C2心肌细胞抗热损伤的能力。为了进一步验证VC和VC-Na抗热应激损伤的作用,我们通过活体试验来探究VC和VC-Na对缓解鸡心肌细胞热应激损伤的作用及作用机制。本研究选用150只30日龄的伊莎褐蛋鸡作为试验动物,并将其随机均分为对照组（正常饮用水）、VC组（50μg/mL VC饮用水）和VC-Na组（50 μg/mL VC-Na饮用水）。在热应激前进行7 d的给药饲养,然后分别进行0h、1h、3 h、5 h和10 h的热应激处理。热应激结束后立即采集受试鸡的血清和心脏组织。通过对血清中LDH、CK、CK-MB的水平检测和组织病理学检查以确定添加VC和VC-Na对缓解心肌细胞热应激损伤的保护性作用;通过对氧化损伤指标MDA、抗氧化能力SOD和T-AOC、以及CRYAB和Hsp70表达量的检测,探究VC和VC-Na缓解热应激损伤的机制。研究结果显示,添加VC和VC-Na可以显着降低血清中心肌细胞损伤指标LDH、CK、CK-MB和MDA的水平,还可以降低热应激所导致的心肌细胞颗粒变性、空泡变性、心肌纤维断裂和坏死的程度;添加VC和VC-Na可以显着提高心肌细胞的总抗氧化能力;VC-Na还可以诱导心肌细胞在正常条件和热应激条件下CRYAB和Hsp70的高表达,VC也可以诱导心肌细胞在正常条件和热应激条件下CRYAB的高表达,以及正常条件下Hsp70的高表达。
宋雅兰[10]（2018）在《针刺后处理对心肌缺血再灌注大鼠心脏阿片δ受体及RISK通路的调控作用研究》文中提出目的:探讨针剌后处理调控阿片δ受体及RISK信号通路保护心肌缺血大鼠再灌注损伤的效应及机制。方法:将SPF级SD大鼠140只,随机分为空白组、模型组、再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组,每组20只。除空白组外,采用手术结扎并再灌注左冠状动脉前降支的方法及腹腔注射ICI174864阻断阿片δ受体表达的方法,建立心肌缺血再灌注模型和拮抗阿片δ受体心肌缺血再灌注模型。造模后分别在再灌注前、再灌注后、再灌注前及后给予大鼠电针内关、神门或非经非穴治疗。通过生理记录仪、TTC染色、Tunel分别检测心电图、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率;运用PCR及Western blot技术检测δ-OPR mRNA及δ-OPR蛋白的表达量;并运用Luminex液相芯片技术检测Akt、Erk、JNK、p38的表达量。结果:1.Ⅱ导联心电图ST段变化与空白组相比,模型组、非经非穴组、再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组的ST段抬高显着升高（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组的ST段抬高显着下降（P<0.01）,非经非穴组略有下降,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后均针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的ST段抬高显着升高（P<0.01）。2.心肌细胞平均凋亡率与模型组相比,再灌注前后均针刺组、δ-OPR拮抗组的心肌细胞平均凋亡率显着下降（P<0.01）,非经非穴组明显下降（P<0.05）;与再灌注前后均针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的心肌细胞平均凋亡率显着升高（P<0.01）。3.心肌梗死面积与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的心肌梗死面积显着减少（P<0.01）,非经非穴组略有减少,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的心肌梗死面积显着增加（P<0.01）。4.MIRI大鼠心肌阿片δ受体的表达4.1δ-OPR mRNA:与空白组相比,模型组、非经非穴组、再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPR mRNA的表达量显着增加（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPR mRNA的表达量显着增加（P<0.01）,非经非穴组略有减少,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后均针刺组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、非经非穴组的δ-OPR mRNA的表达量显着减少（P<0.01）。4.2δ-OPR蛋白:与空白组相比,模型组、非经非穴组、再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPR蛋白的表达量显着增加（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、再灌注前后均针刺组的δ-OPR蛋白的表达量显着增加（P<0.01）,非经非穴组略有增加,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后均针刺组相比,再灌注前针刺组、再灌注后针刺组、非经非穴组的δ-OPR蛋白的表达量显着减少（P<0.01）。5.MIRI大鼠心肌RISK通路相关蛋白的表达5.1 Akt:与空白组相比,模型组、再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组的Akt表达量显着下降（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的Akt表达量显着增加（P<0.01）,非经非穴组略有增加,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的Akt表达量显着降低（P<0.01）。5.2 Erk1/2:与空白组相比,模型组、再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组的Erk1/2表达量显着下降（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的Erk1/2表达量显着增加（P<0.01）,非经非穴组略有降低,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组的Erk1/2表达量明显降低（P<0.05）,非经非穴组显着降低（P<0.01）。5.3 JNK:与空白组相比,模型组、再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组的JNK表达量显着下降（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的JNK表达量显着增加（P<0.01）,非经非穴组略有增加,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组的JNK表达量明显降低（P<0.05）,非经非穴组显着降低（P<0.01）。5.4 p38:与空白组相比,模型组、再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组、非经非穴组的P38表达量显着下降（P<0.01）;与模型组相比,再灌注前后针刺组、δ-OPR拮抗组的P38表达量显着增加（P<0.01）,非经非穴组略有增加,但差异不明显（P>0.05）;与再灌注前后针刺组相比,δ-OPR拮抗组、非经非穴组的P38表达量显着降低（P<0.01）。结论:1.针刺后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤起到了良好的保护作用,表现为可有效地降低大鼠心电图ST段抬高、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积。2.针刺能提高δ-OPR含量和活性,且再灌注前后均进行针刺治疗效果明显好于再灌注前针刺治疗及再灌注后治疗。3.δ-OPR拮抗剂能够明显逆转针刺治疗的效果,提示针刺改善心肌缺血再灌注损伤的效果可能依赖于δ-OPR受体介导信号通路的激活。4.针灸治疗可显着上调δ-OPR的表达,进而增加心肌组织Akt、Erk、JNK和p38的磷酸化水平,激活RISK通路,从而减少心肌缺血再灌注导致的损伤来保护心脏。
二、热休克蛋白70对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、热休克蛋白70对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用（论文提纲范文）
（1）运动预适应干预压力超负荷心肌重构模型小鼠的心肌功能及细胞凋亡（论文提纲范文）
| 文章快速阅读： |
| 文题释义： |
| 0引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.3.1 实验主要试剂与仪器 |
| 1.3.2 实验动物 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.4.1 运动预适应方案及造模方法 |
| 1.4.2 心脏超声测定 |
| 1.4.3 取材 |
| 1.4.4 苏木精-伊红染色观察心肌病理变化 |
| 1.4.5 Masson染色观察心肌纤维化程度 |
| 1.4.6 TUNEL染色观察细胞凋亡情况 |
| 1.4.7 Western blot分析心肌组织中热休克蛋白70、P53蛋白的表达 |
| 1.4.8 Real-Time PCR分析心肌组织中相关凋亡基因的表达 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 实验动物数量分析 |
| 2.2 运动预适应对小鼠心质量体质量比的影响 |
| 2.3 心脏超声检测结果 |
| 2.3.1 左室舒张期前壁厚度、左室收缩期前壁厚度 |
| 2.3.2 左室短轴缩窄率 |
| 2.4 组织病理学检测结果 |
| 2.4.1 苏木精-伊红染色结果 |
| 2.4.2 Masson染色结果 |
| 2.4.3 TUNEL染色结果 |
| 2.5 各组小鼠心肌Western Blot检测结果 |
| 2.6 心肌凋亡相关基因表达结果 |
| 3 讨论Discussion |
| 3.1 运动预适应改善压力超负荷早期小鼠心功能 |
| 3.2 热休克蛋白70对运动预适应压力超负荷小鼠的心肌保护作用 |
| 3.3 运动预适应对压力超负荷小鼠心肌细胞凋亡基因表达的影响 |
（2）亚硒酸钠对氯化汞所致鸡心肌毒性的拮抗作用研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1.前言 |
| 1.1 氯化汞 |
| 1.1.1 氯化汞的理化性质 |
| 1.1.2 氯化汞环境污染现状 |
| 1.1.3 氯化汞所致的心脏毒性 |
| 1.2 氯化汞的生物毒性机制 |
| 1.2.1 钙稳态失衡 |
| 1.2.2 内质网应激 |
| 1.2.3 氧化应激 |
| 1.2.4 热休克蛋白 |
| 1.2.5 细胞凋亡 |
| 1.3 硒 |
| 1.3.1 硒与硒蛋白 |
| 1.3.2 硒拮抗重金属所致的器官毒性机制 |
| 1.3.3 硒拮抗氯化汞器官毒性的研究进展 |
| 1.4 研究目的及意义 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 试验动物 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 主要仪器 |
| 2.4 主要试剂配制 |
| 2.5 试验方法 |
| 2.5.1 动物试验饲养与分组 |
| 2.5.2 心肌组织提取 |
| 2.5.3 血清生化指标检测 |
| 2.5.4 氧化应激指标检测 |
| 2.5.5 石蜡切片 |
| 2.5.6 HE染色 |
| 2.5.7 蛋白免疫印迹 |
| 2.5.8 统计学分析 |
| 3.结果与分析 |
| 3.1 硒缓解氯化汞所致的鸡心肌损伤 |
| 3.2 硒拮抗氯化汞所致的鸡心肌细胞凋亡 |
| 3.3 硒减轻氯化汞所致的鸡心肌氧化应激 |
| 3.4 硒减轻氯化汞所致的鸡心肌内质网应激 |
| 3.5 硒抑制氯化汞所致的鸡心肌热休克蛋白的激活反应 |
| 3.6 硒缓解氯化汞所致的鸡心肌钙稳态紊乱 |
| 3.7 硒抑制氯化汞所致的鸡心肌定居内质网硒蛋白表达的紊乱 |
| 4.讨论 |
| 4.1 硒缓解氯化汞导致的鸡心肌细胞凋亡 |
| 4.2 硒缓解氯化汞导致的鸡心肌氧化应激和内质网应激 |
| 4.3 硒抑制氯化汞导致的鸡心肌热休克蛋白激活 |
| 4.4 硒缓解氯化汞导致的鸡心肌[Ca~(2+)]_(ER)耗竭 |
| 4.5 硒抑制氯化汞所致的心肌内质网定居硒蛋白的表达紊乱 |
| 5.结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
（3）鸡饲料铅污染调查与硒颉颃铅致鸡脾脏毒性效应的评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 1.1 铅污染现状 |
| 1.1.1 铅污染的来源 |
| 1.1.2 土壤和水污染现状 |
| 1.1.3 食品污染现状 |
| 1.1.4 饲料污染现状 |
| 1.2 铅毒性的研究进展 |
| 1.2.1 铅的一般毒性 |
| 1.2.2 铅的免疫毒性 |
| 1.2.3 铅与氧化应激 |
| 1.2.4 铅与细胞凋亡、自噬、坏死 |
| 1.3 程序性坏死与免疫的研究进展 |
| 1.3.1 程序性坏死的发生机理 |
| 1.3.2 程序性坏死与免疫功能 |
| 1.4 程序性坏死与疾病的研究现状 |
| 1.5 研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 鸡饲料样品的采集 |
| 2.1.2 试验动物分组与采样 |
| 2.1.3 淋巴细胞分离培养 |
| 2.2 仪器设备及试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 饲料中铅含量的调查 |
| 2.3.2 鸡脾脏组织显微结构的观察 |
| 2.3.3 鸡脾脏组织中铅、硒含量的检测 |
| 2.3.4 氧化应激相关指标的检测 |
| 2.3.5 细胞因子含量的检测 |
| 2.3.6 AO/EB双重荧光染色 |
| 2.3.7 流式细胞术对细胞坏死的检测 |
| 2.3.8 RT-qPCR检测 |
| 2.3.9 Western blot检测 |
| 2.4 试验数据的统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸡饲料铅污染调查 |
| 3.1.1 不同年份饲料铅污染的调查结果 |
| 3.1.2 不同种类鸡用饲料铅的检测结果 |
| 3.1.3 不同动物种类鸡用饲料铅的检测结果 |
| 3.1.4 不同生长阶段肉鸡饲料铅的检测结果 |
| 3.2 鸡脾脏组织显微结构观察结果 |
| 3.3 鸡脾脏组织中铅和硒含量检测结果 |
| 3.4 氧化应激相关指标检测结果 |
| 3.4.1 鸡脾脏组织氧化应激相关指标检测结果 |
| 3.4.2 淋巴细胞氧化应激相关指标检测结果 |
| 3.5 细胞因子含量的检测结果 |
| 3.5.1 鸡血清中细胞因子含量的检测结果 |
| 3.5.2 淋巴细胞中细胞因子含量的检测结果 |
| 3.6 AO/EB双重荧光染色对细胞坏死的检测结果 |
| 3.7 流式细胞术对细胞坏死的检测结果 |
| 3.8 NF-κB通路中相关因子的检测结果 |
| 3.8.1 鸡脾脏组织NF-κB通路相关因子mRNA水平和蛋白表达检测结果 |
| 3.8.2 淋巴细胞中NF-κB通路相关因子mRNA水平和蛋白的检测结果 |
| 3.9 RIP3依赖型程序性坏死相关基因的检测结果 |
| 3.9.1 鸡脾脏RIP3 依赖型程序性坏死相关基因mRNA水平和蛋白检测结果 |
| 3.9.2 淋巴细胞RIP3 依赖型程序性坏死相关基因mRNA水平和蛋白检测结果 |
| 3.10 MAPK通路相关基因的检测结果 |
| 3.10.1 鸡脾脏MAPK通路相关基因mRNA水平和蛋白的检测结果 |
| 3.10.2 淋巴细胞中MAPK通路相关基因mRNA水平和蛋白的检测结果 |
| 3.11 热休克蛋白基因的检测结果 |
| 3.11.1 鸡脾脏组织中热休克蛋白基因mRNA水平和蛋白的检测结果 |
| 3.11.2 淋巴细胞中热休克蛋白基因mRNA水平和蛋白的检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 鸡饲料铅污染情况、原因及对策 |
| 4.2 硒铅互作对脾组织病理形态学的影响 |
| 4.3 硒铅互作对脾组织硒铅含量的影响 |
| 4.4 硒铅互作对细胞因子表达水平的影响 |
| 4.5 硒铅互作对抗氧化功能的影响 |
| 4.6 硒铅互作对NF-κB通路表达的影响 |
| 4.7 硒铅互作对热休克蛋白表达的影响 |
| 4.8 硒铅互作对MAPK通路相关基因表达的影响 |
| 4.9 硒铅互作对鸡脾脏程序性坏死通路的影响 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
（4）双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血再灌注后VCAM-1及IL-1β的影响实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 心肌缺血再灌注损伤的中西医研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（5）运输应激对山羊主要器官的应激损伤及热休克蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 中英文缩略词表 |
| 第一章 综述 |
| 1 应激对动物机体的影响 |
| 1.1 应激与心脏 |
| 1.2 应激与肝脏 |
| 1.3 应激与肾脏 |
| 1.4 应激与呼吸系统 |
| 1.5 应激与免疫器官 |
| 1.6 应激与肠道 |
| 1.7 运输应激对动物生理、内分泌指标及肉质的影响 |
| 2 热休克蛋白与动物器官保护 |
| 2.1 热休克蛋白与心脏 |
| 2.2 热休克蛋白与肝脏 |
| 2.3 热休克蛋白与肾脏 |
| 2.4 热休克蛋白与肺脏 |
| 2.5 热休克蛋白与免疫器官 |
| 2.6 热休克蛋白与肠道 |
| 第二章 运输应激对山羊心脏的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要仪器设备 |
| 1.2 主要化学试剂 |
| 1.3 实验方案与设计 |
| 1.4 石蜡包埋及HE染色 |
| 1.5 透射电镜技术 |
| 1.6 实时定量PCR |
| 1.7 免疫组织化学 |
| 1.8 Western blot |
| 1.9 统计分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊心脏的显微病理学观察 |
| 2.2 山羊心脏的超微病理学观察 |
| 2.3 山羊心脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.4 山羊心脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第三章 运输应激对山羊肝脏的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊肝脏的显微病理学观察 |
| 2.2 山羊肝脏的超微病理学观察 |
| 2.3 山羊肝脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.4 山羊肝脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第四章 运输应激对山羊肾脏的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊肾脏的病理学观察 |
| 2.2 山羊肾脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.3 山羊肾脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第五章 运输应激对山羊肺脏、气管和支气管的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊气管的病理学观察 |
| 2.2 山羊支气管的病理学观察 |
| 2.3 山羊肺脏的病理学观察 |
| 2.4 山羊气管和支气管三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.5 山羊肺脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.6 山羊气管、支气管和肺脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第六章 运输应激对山羊免疫器官的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊淋巴结和脾脏的病理学观察 |
| 2.2 山羊淋巴结和脾脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.3 山羊淋巴结和脾脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第七章 运输应激对山羊小肠的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊小肠的显微病理学观察 |
| 2.2 山羊小肠的超微病理学观察 |
| 2.3 山羊小肠三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.4 山羊小肠三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（6）运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 现代医学对冠心病的认识 |
| 1.1 流行病学 |
| 1.2 病理生理机制 |
| 2 心肌缺血/再灌注损伤与自噬 |
| 2.1 自噬的发生过程 |
| 2.2 多种信号通路调控自噬 |
| 2.3 心肌缺血再灌注损伤与Beclin1、Atg-5 蛋白 |
| 3 运动预处理 |
| 3.1 运动预处理相关研究 |
| 3.2 运动预处理的心脏保护相关机制 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 指标检测及方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 实验大鼠的情况 |
| 2.2 各组大鼠心功能的差异 |
| 2.3 各组大鼠心肌梗死面积(IS%) |
| 2.4 各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的形成 |
| 2.5 各组大鼠心肌Beclin1、Atg-5 蛋白表达 |
| 讨论 |
| 1 离体心脏Langendorff缺血/再灌注模型的制备及影响模型制备的因素 |
| 1.1 老龄大鼠离体心脏MIRI模型的制备 |
| 1.2 影响模型制备的主要因素 |
| 2 运动预处理方案的选择 |
| 3 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心功能的影响 |
| 4 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌梗死面积的影响 |
| 5 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌细胞超微结构与自噬体的形成的影响 |
| 6 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌Beclin1、Atg-5 蛋白表达的影响 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（7）热休克蛋白保护缺血再灌注损伤的研究进展（论文提纲范文）
| 1 缺血再灌注损伤 |
| 2 热休克蛋白 |
| 3 热休克蛋白对器官缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 3.1 热休克蛋白对心脏的作用 |
| 3.2 热休克蛋白对肾脏的作用 |
| 3.3 热休克蛋白对肝脏的作用 |
| 3.4 热休克蛋白对脑的作用 |
| 3.5 热休克蛋白对睾丸的作用 |
| 4 小 结 |
（8）姜黄素对果蝇和小鼠应激反应的影响及分子机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 姜黄素及其对慢病的预防和治疗功能 |
| 1.1. 姜黄素 |
| 1.2. 姜黄素对慢病的预防和治疗功能 |
| 1.2.1 姜黄素与抗肿瘤 |
| 1.2.2 姜黄素与肝病 |
| 1.2.3 姜黄素与心血管病 |
| 1.2.4 姜黄素与神经退行性疾病 |
| 1.2.5 姜黄素与皮肤病 |
| 1.2.6 抗衰老与抗氧化作用 |
| 1.2.7 姜黄素的其他功能 |
| 2. 姜黄素作用的信号通路 |
| 2.1. 胞内NF-κB蛋白 |
| 2.2. 蛋白激酶B (Akt) |
| 2.3. 人体抑癌基因p53 |
| 2.4. 核因子 E-2-相关因子(Nrf2) |
| 3. 高温热应激对机体的损伤及其作用机制 |
| 3.1. 高温热应激与热射病 |
| 3.2. 高温环境对心脏的影响 |
| 3.3. 机体应对高温热应激机制 |
| 3.3.1 高温热应激诱导机体热休克蛋白表达 |
| 3.3.2 高温热应激与内质网应激介导的细胞凋亡机制 |
| 3.3.3 高温热应激诱导氧化应激 |
| 3.3.4 抗热应激天然活性物质 |
| 4. 运动应激损伤与运动性疲劳 |
| 4.1. 运动应激损伤 |
| 4.2. 运动性疲劳 |
| 4.3. 抗疲劳机制研究 |
| 5. 转录组测序技术与应用 |
| 5.1. 转录组测序技术 |
| 5.2. 转录组测序技术应用 |
| 6. 立题背景、研究意义和研究内容 |
| 6.1. 立题背景和研究意义 |
| 6.2. 研究内容 |
| 6.3. 技术路线 |
| 第二章 姜黄素对受高温胁迫果蝇寿命的影响 |
| 2.1. 前言 |
| 2.2. 材料与仪器 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.3. 实验方法 |
| 2.3.1 扩种培养基的配制 |
| 2.3.2 实验培养基的配制 |
| 2.3.3 果蝇饲养方法 |
| 2.3.4 果蝇高温胁迫实验方法 |
| 2.3.5 数据分析 |
| 2.4. 结果与分析 |
| 2.4.1 果蝇平均寿命3因素方差分析 |
| 2.4.2 姜黄素对 25°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.4.3 姜黄素对 29°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.4.4 姜黄素对 34°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.4.5 姜黄素对 39°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.5. 讨论 |
| 2.6. 本章小结 |
| 第三章 姜黄素对受高温胁迫果蝇抗热应激作用的分子机制研究 |
| 3.1. 前言 |
| 3.2. 材料与仪器 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 果蝇饲养培养基及饲养方法 |
| 3.3.2 果蝇收集 |
| 3.3.3 果蝇MDA水平以及相关抗氧化指标测定 |
| 3.3.4 q-PCR检测果蝇体内相关抗氧化基因及热休克蛋白基因表达量 |
| 3.3.5 数据分析 |
| 3.4. 结果与分析 |
| 3.4.1 姜黄素对热胁迫果蝇体内MDA水平的影响 |
| 3.4.2 姜黄素对热胁迫果蝇体内SOD活力的影响 |
| 3.4.3 姜黄素对热胁迫果蝇体内CAT活力的影响 |
| 3.4.4 姜黄素对热胁迫果蝇体内GSH-Px活力的影响 |
| 3.4.5 姜黄素对热胁迫果蝇体内抗氧化相关基因表达量的影响 |
| 3.4.6 姜黄素对热胁迫果蝇热休克蛋白相关基因表达量的影响 |
| 3.5. 讨论 |
| 3.6. 本章小结 |
| 第四章 姜黄素对高温热应激小鼠肝脏的保护作用及其分子机制研究 |
| 4.1. 前言 |
| 4.2. 材料与仪器 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.3. 实验方法 |
| 4.3.1 动物实验 |
| 4.3.2 小鼠体重及脏器指数 |
| 4.3.3 血清生化分析 |
| 4.3.4 组织形态学观察 |
| 4.3.5 丙二醛含量及抗氧化酶活力测定 |
| 4.3.6 炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α、TGF-β1 测定 |
| 4.3.7 q-PCR检测测定肝组织中Nrf2/Keap1信号通路相关基因表达量 |
| 4.3.8 数据分析 |
| 4.4. 结果与分析 |
| 4.4.1 高温热应激对小鼠体重的影响 |
| 4.4.2 高温热应激对小鼠脏器指数的影响 |
| 4.4.3 高温热应激对小鼠肝脏组织形态的影响 |
| 4.4.4 高温热应激对小鼠血清生化指标的影响 |
| 4.4.5 姜黄素对热应激小鼠肝脏抗氧化水平的影响 |
| 4.4.6 姜黄素对热应激小鼠肝脏炎症因子水平的影响 |
| 4.4.7 姜黄素作用的Nrf2/Keap1信号通路分析 |
| 4.5. 讨论 |
| 4.6. 本章小结 |
| 第五章 姜黄素对高温热应激小鼠心脏的保护作用及其分子机制研究 |
| 5.1. 前言 |
| 5.2. 材料与仪器 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 仪器与设备 |
| 5.3. 实验方法 |
| 5.3.1 动物实验 |
| 5.3.2 血压测量 |
| 5.3.3 直肠温度测定 |
| 5.3.4 心脏脏器指数及组织形态学观察 |
| 5.3.5 血清乳酸脱氢酶含量测定 |
| 5.3.6 心肌肌钙蛋白和血管紧张素Ⅱ测定 |
| 5.3.6 q-PCR检测血管紧张素受体1与内质网应激相关基因 |
| 5.3.7 免疫印迹法测定心脏组织中AT1与内质网应激相关蛋白表达水平 |
| 5.3.8 数据分析 |
| 5.4. 结果与分析 |
| 5.4.1 高温热应激对小鼠直肠温度的影响 |
| 5.4.2 高温热应激对小鼠血压的影响 |
| 5.4.3 高温热应激对小鼠心率的影响 |
| 5.4.4 脏器指数及心脏组织切片病理分析 |
| 5.4.5 高温热应激对小鼠血清中乳酸脱氢酶的影响 |
| 5.4.6 高温热应激对小鼠心肌肌钙蛋白与血管紧张素Ⅱ水平的影响 |
| 5.4.7 姜黄素对热应激小鼠心脏血管紧张素受体1表达量的影响 |
| 5.4.8 姜黄素作用的内质网应激细胞凋亡信号通路分析 |
| 5.5. 讨论 |
| 5.6. 本章小结 |
| 第六章 姜黄素对小鼠的抗疲劳作用分子机制研究 |
| 6.1. 前言 |
| 6.2. 材料与仪器 |
| 6.2.1 材料与试剂 |
| 6.2.2 仪器与设备 |
| 6.3. 实验方法 |
| 6.3.1 动物饲养与实验设计 |
| 6.3.2 负重游泳试验 |
| 6.3.3 小鼠体重及脏器指数 |
| 6.3.4 组织形态学观察 |
| 6.3.4 血清生化指标测定 |
| 6.3.5 肝糖原和肌糖原含量测定 |
| 6.3.6 肝组织能量代谢相关酶水平分析 |
| 6.3.7 肝脏丙二醛含量及抗氧化酶活力测定 |
| 6.3.8 q-PCR测定小鼠肝组织中Nrf2/Keap1信号通路相关基因表达量 |
| 6.3.9 数据分析 |
| 6.4. 结果与分析 |
| 6.4.1 姜黄素对小鼠体重及脏器指数的影响 |
| 6.4.2 肌肉和肾脏组织切片病理分析 |
| 6.4.3 姜黄素对小鼠负重游泳耐力的影响 |
| 6.4.4 姜黄素对力竭游泳小鼠血清生化指标的影响 |
| 6.4.5 姜黄素对力竭游泳小鼠肝糖原和肌糖原含量的影响 |
| 6.4.6 姜黄素对力竭游泳小鼠肝脏能量代谢相关酶活力的影响 |
| 6.4.7 姜黄素对力竭游泳小鼠肝脏丙二醛含量和抗氧化酶活力的影响 |
| 6.4.8 姜黄素作用的Nrf2/Keap1信号通路分析 |
| 6.5. 讨论 |
| 6.6. 本章小结 |
| 第七章 姜黄素对力竭游泳小鼠肝脏影响的转录组学分析 |
| 7.1. 前言 |
| 7.2. 材料与仪器 |
| 7.2.1 材料与试剂 |
| 7.2.2 仪器与设备 |
| 7.3. 实验方法 |
| 7.3.1 RNA提取与质控 |
| 7.3.2 转录组测序 |
| 7.3.2.1 转录组测序实验流程与信息分析流程 |
| 7.3.2.2 测序数据过滤 |
| 7.3.2.3 参考基因组比对 |
| 7.3.2.4 新转录本预测 |
| 7.3.2.5 差异剪接基因检测 |
| 7.3.2.6 基因表达量和差异表达基因分析 |
| 7.3.2.7 差异表达基因GO功能和Pathway功能分析 |
| 7.3.3 q-PCR检测验证差异表达基因 |
| 7.3.4 数据统计与分析 |
| 7.4. 结果与分析 |
| 7.4.1 样品检测结果 |
| 7.4.2 测序分析结果与测序数据过滤 |
| 7.4.3 参考基因组比对 |
| 7.4.4 样品间的相关性 |
| 7.4.5 差异表达基因(DEG)检测 |
| 7.4.6 差异表达基因GO功能分析 |
| 7.4.7 差异表达基因Pathway功能分析 |
| 7.4.8 转录组中差异表达基因q-PCR验证 |
| 7.5. 讨论 |
| 7.6. 本章小结 |
| 第八章 结论与展望 |
| 8.1. 结论 |
| 8.2. 主要创新点 |
| 8.3. 展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 在学期间取得的科研成果 |
（9）Vitamin C-Na诱导Hsps表达保护心肌抵抗热应激损伤的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 部分缩写的中英文对照 |
| 引言 |
| 第一章 热应激与热休克蛋白 |
| 1 应激 |
| 1.1 应激概述 |
| 1.2 全身性适应综合征 |
| 1.3 应激的特异性与非特异性 |
| 2 热应激 |
| 2.1 热应激概述 |
| 2.2 热应激对细胞的影响 |
| 2.3 热应激对畜禽的影响 |
| 3 热休克蛋白 |
| 3.1 热休克蛋白的发现 |
| 3.2 热休克蛋白的分类与生物学特点 |
| 3.3 热休克蛋白的功能 |
| 3.4 Hsps的调控 |
| 3.5 sHSPs的研究进展 |
| 4 维生素C的研究进展 |
| 4.1 维生素C的性质 |
| 4.2 维生素C的作用及机制 |
| 4.3 碳酸氢钠的功能 |
| 参考文献 |
| 第二章 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞的应激性病理损伤及Hsps动态变化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞的应激性病理损伤 |
| 2.2 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中hsps mRNA转录水平的动态变化 |
| 2.3 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中Hsps表达水平的动态变化 |
| 2.4 Hsps在抗损伤机制中的功能预测 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 CRYAB过表达提高H9C2心肌细胞耐热性的分子机制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 真核表达载体Pcdna3.1-CRYAB的构建 |
| 2.2 稳定过表达CRYAB蛋白的H9C2细胞系的筛选 |
| 2.3 过表达CRYAB对热应激导致H9C2细胞应激性病理损伤的影响 |
| 2.4 过表达CRYAB对H9C2细胞周期的影响 |
| 2.5 过表达CRYAB对H9C2细胞骨架蛋白的影响 |
| 2.6 过表达CRYAB对H9C2心肌细胞凋亡的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 心肌细胞遭受热应激及恢复条件下HSF1调控Hsps表达的分子机制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中HSF1转录水平的动态变化 |
| 2.2 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中HSF1蛋白表达水平的动态变化 |
| 2.3 热应激及恢复条件下HSF1在H9C2心肌细胞质和细胞核内的分布变化 |
| 2.4 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中HSF1三聚化的检测 |
| 2.5 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中HSF1基因序列检测 |
| 2.6 H9C2心肌细胞中siRNA-HSF1干扰靶序列的筛选 |
| 2.7 热应激及恢复条件下siRNA-HSF1干扰对H9C2细胞中hsps mRNA转录水平的影响 |
| 2.8 热应激及恢复条件下siRNA-HSF1干扰对H9C2细胞中Hsps表达水平的影响 |
| 2.9 热应激及恢复条件下H9C2心肌细胞中siRNA-HSF1干扰对cleaved-caspase 3表达水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 维生素C联合碳酸氢钠增强抗氧化能力和诱导Hsps缓解H9C2心肌细胞热应激损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 VC和VC-Na保护H9C2心肌细胞抗热应激损伤最佳溶度的筛选 |
| 2.2 H9C2心肌细胞的应激性病理损伤 |
| 2.3 H9C2心肌细胞的亚显微结构观察 |
| 2.4 H9C2心肌细胞凋亡率 |
| 2.5 H9C2心肌细胞损伤相关酶的酶谱检测 |
| 2.6 H9C2心肌细胞的SOD检测 |
| 2.7 H9C2心肌细胞内ROS检测 |
| 2.8 H9C2心肌细胞中hsps mRNA转录水平的检测 |
| 2.9 H9C2心肌细胞中Hsps表达水平的检测 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 维生素C联合碳酸氢钠增强抗氧化能力和诱导Hsps缓解鸡心肌细胞热应激损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 热应激条件下受试鸡血清中VC含量的动态变化 |
| 2.2 热应激条件下受试鸡血清中LDH、CK、CK-MB含量的动态变化 |
| 2.3 热应激条件下受试鸡心肌组织的应激性病理变化 |
| 2.4 受试鸡血清中MDA、SOD、T-AOC的检测 |
| 2.5 受试鸡心肌组织中CRYAB和Hsp70表达量的动态变化 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 攻读博士期间发表论文 |
| 致谢 |
（10）针刺后处理对心肌缺血再灌注大鼠心脏阿片δ受体及RISK通路的调控作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 主要设备 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验分组与处理 |
| 2.2 心肌缺血再灌注模型制备 |
| 2.3 针刺干预方案 |
| 2.4 观察项目及检测方法 |
| 2.5 实验数据统计学方法 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 Ⅱ导联心电图ST段的改变 |
| 3.2 心肌细胞平均凋亡率 |
| 3.3 心肌梗死面积 |
| 3.4 阿片受体表达水平的检测 |
| 3.4.1 δ -OPR mRNA的表达量 |
| 3.4.2 δ -OPR蛋白的表达量 |
| 3.5 RISK传导通路相关蛋白的表达 |
| 3.5.1 Akt的表达量 |
| 3.5.2 Erk1/2 的表达量 |
| 3.5.3 JNK的表达量 |
| 3.5.4 p38 的表达量 |
| 讨论 |
| 1.实验方案的设计 |
| 1.1 动物模型与造模方法的选择 |
| 1.2 缺血时间与再灌注时间的设置 |
| 1.3 针刺穴位与留针时间的选择 |
| 2.针刺后处理对 MIRI 大鼠的心肌保护作用 |
| 2.1 针刺后处理对 MIRI 的临床应用价值 |
| 2.2 针刺后处理对心电图 ST 段的影响 |
| 2.3 针刺后处理对心肌细胞凋亡的抑制作用 |
| 2.4 针刺后处理对心肌梗死面积的降低 |
| 3.针刺后处理对阿片受体的调控作用 |
| 3.1 后处理防治MIRI的作用机制 |
| 3.2 阿片受体对MIRI的保护作用 |
| 3.3 针刺后处理对 δ - OPR 的调控作用 |
| 3.4 拮抗阿片受体对针刺后处理的影响 |
| 4.针刺后处理对RISK通路的调控作用 |
| 4.1 RISK通路对MIRI的保护作用 |
| 4.2 针刺后处理对Akt、Erk、JNK、p38 表达的影响 |
| 4.3 拮抗阿片受体对RISK通路的影响 |
| 结论 |
| 特色与创新 |
| 问题与展望 |
| 1.针刺后处理的作用机制研究 |
| 2.针刺后处理的临床应用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附件一：综述 |
| 参考文献 |
| 附件二：在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
四、热休克蛋白70对大鼠心肌细胞凋亡的保护作用（论文参考文献）
- [1]运动预适应干预压力超负荷心肌重构模型小鼠的心肌功能及细胞凋亡[J]. 邓爽,蒲锐,陈子扬,张建超,袁凌燕. 中国组织工程研究, 2022(05)
- [2]亚硒酸钠对氯化汞所致鸡心肌毒性的拮抗作用研究[D]. 闫玉雪. 山东农业大学, 2021
- [3]鸡饲料铅污染调查与硒颉颃铅致鸡脾脏毒性效应的评价[D]. 张加勇. 东北农业大学, 2020(04)
- [4]双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血再灌注后VCAM-1及IL-1β的影响实验研究[D]. 周桐. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [5]运输应激对山羊主要器官的应激损伤及热休克蛋白表达的影响[D]. 郑文亚. 甘肃农业大学, 2019
- [6]运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响[D]. 王雪. 黑龙江中医药大学, 2019(01)
- [7]热休克蛋白保护缺血再灌注损伤的研究进展[J]. 向都,叶启发,王彦峰. 疑难病杂志, 2019(04)
- [8]姜黄素对果蝇和小鼠应激反应的影响及分子机制研究[D]. 陈勇. 浙江大学, 2019(01)
- [9]Vitamin C-Na诱导Hsps表达保护心肌抵抗热应激损伤的作用及机制[D]. 殷斌. 南京农业大学, 2018(07)
- [10]针刺后处理对心肌缺血再灌注大鼠心脏阿片δ受体及RISK通路的调控作用研究[D]. 宋雅兰. 成都中医药大学, 2018(06)