一、静脉药物配制中心崭露头角(论文文献综述)
王长志[1](2021)在《化瘀通痹方调控小鼠类风湿关节炎模型关节炎症的作用研究》文中提出目的探究化瘀通痹方调节小鼠类风湿关节炎模型的炎症细胞趋势及JAK/STAT信号通路变化水平,为临床应用化瘀通痹方治疗类风湿关节炎提供理论基础支持。方法通过牛Ⅱ型胶原免疫造模类风湿关节炎DBA/1小鼠模型,正常食水SPF环境饲养。二次免疫19天后分别每日以化瘀通痹方,纯水,来氟米特灌胃一次,连续35天。期间测量并记录小鼠后肢足趾关节厚度。第78天小鼠放血脱颈处死取材,小鼠淋巴结,后肢关节滑膜组织,完整前肢关节。小鼠淋巴结及部分关节滑膜组织剪碎研磨提取细胞,通过流式细胞仪分别检测淋巴结细胞悬液中记忆T细胞及Th17细胞比率,以及滑膜组织悬液中Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)比率,探讨化瘀通痹方灌胃对记忆T细胞、Th17细胞及ILC2s的影响;前肢固定后石蜡切片,通过苏木精-伊红染色(HE染色),抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP染色),番红O-固绿染色观察关节中破骨细胞数量分布、软骨形态及骨质情况,评估化瘀通痹方灌胃对关节炎症水平和关节损伤恢复的影响;通过Western-blot检测关节滑膜组织内细胞的JAK/STAT信号通路相关蛋白表达水平,研究化瘀通痹方灌胃对调控相关炎症细胞基因转录表达的机制。结果小鼠灌胃前后足趾厚度测量结果显示,与灌胃前对比,化瘀通痹方组和来氟米特组足趾厚度均显着降低(P<0.05,P<0.05);灌胃后与模型组对比,化瘀通痹方组和来氟米特组足趾厚度均显着较低(P<0.01,P<0.05)。前肢关节石蜡切片HE染色TRAP染色以及番红O固绿染色结果中观察到在炎症部位关节中,模型组较化瘀通痹方组、来氟米特组和空白组有明显可见的破骨细胞增多,软骨及骨质缺损,部分可见新生小血管,提示化瘀通痹方能够调节炎症关节内炎症细胞的浸润,减轻破骨细胞转化,保护软骨及骨结构改善炎症环境。流式细胞检测结果显示:化瘀通痹方灌胃干预后,模型组淋巴结中Th17比率显着高于空白组、化瘀通痹方组及来氟米特组(P<0.01,P<0.05,P<0.01);淋巴结记忆T细胞在模型组中显着高于空白组、化瘀通痹方组及来氟米特组(P<0.05,P<0.01,P<0.05);滑膜组织中ILC2比率在化瘀通痹方灌胃处理后,与模型组比较,来氟米特组及化瘀通痹方组ILC2比率均显着较高(P<0.01,P<0.05)。Western-blot结果显示,与模型组组比较,化瘀通痹方组及来氟米特组JAK2、p-JAK2、JAK3、p-JAK3、STAT6、p-STAT6表达量均不同程度降低,其中化瘀通痹方组 p-JAK2、JAK3、p-JAK3、p-STAT6(P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05)的降低具有统计学意义。结论化瘀通痹方灌胃干预类风湿关节炎CIA模型小鼠通过调节关节内ILC2细胞水平及外周淋巴结内促炎性T辅助细胞比率,能一定程度上减轻关节炎症和骨质破坏重构,有助于恢复炎症关节内正常比率的免疫细胞群。
王兵[2](2021)在《肿瘤微环境响应的卟啉基金属有机配位聚合物的合成及其肿瘤诊疗应用》文中进行了进一步梳理
唐莎[3](2021)在《肿瘤细胞膜包覆的紫杉醇纳米体系的构建及其抗乳腺癌作用研究》文中研究指明
周铭[4](2021)在《紫草素对肝脏特异性Nf2基因敲除小鼠Hippo信号通路的影响》文中研究表明
张雪琳[5](2021)在《岩藻多糖对鼠胃幽门螺杆菌定植的影响》文中提出目的:建立幽门螺杆菌(H.pylori,HP)感染小鼠模型,研究褐藻提取物岩藻多糖对鼠胃幽门螺杆菌定植的影响。方法:将22只8周龄C57BL/6品系小鼠,随机分为A对照组(灭菌双蒸水):灌服等量灭菌的双蒸水,B单纯幽门螺杆菌感染组:灌服等量HP菌液,C单纯干预组(岩藻多糖):灌服等量岩藻多糖水溶液,D预防干预组:灌服岩藻多糖进行预干预再感染幽门螺杆菌,E治疗干预组:感染幽门螺杆菌后再岩藻多糖干预,整个实验过程为5周,实验结束拉颈将各组小鼠干预杀死,收集其胃组织进行苏木精—伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色、免疫组织化学染色和基因组测序分析。结果:1.干预后的各组小鼠体质量增长率的变化:小鼠灌胃后第4周,单纯幽门螺杆菌感染组B组小鼠体质量增长率低于对照组A组(P<0.05),预防干预组D组小鼠体质量增长率低于对照组A组(P<0.05);单纯岩藻多糖干预组C组小鼠体质量增长率显着高于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.01),治疗干预组E组小鼠体质量增长率显着高于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.01);预防干预组D组小鼠体质量增长率低于单纯干预组C组(P<0.05),治疗干预组E组小鼠体质量增长率相对于单纯岩藻多糖干预组C组无统计学差异(P>0.05);治疗干预组E组小鼠体质量增长率高于预防干预组D组(P<0.05)。2.抑菌环实验:浸染岩藻多糖及水的滤纸片周围没有抑菌环,显示在本实验剂量范围及干预时间内,岩藻多糖无直接抑菌作用;左氧氟沙星滤纸片周围有直径约3.5 cm的抑菌环,表明左氧氟沙星有直接抑菌作用。3.HE染色炎症评分:单纯幽门螺杆菌感染组B组、预防干预组D组及治疗干预组E组小鼠炎症水平均显着高于A组(P<0.01);C组小鼠炎症水平低于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.05),预防干预组D组小鼠炎症水平显着低于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.01),治疗干预组E组小鼠炎症水平较B组无显着统计学差异(P>0.05);预防干预组D组小鼠炎症水平高于治疗干预组E组(P<0.05)。4.定植评分:(1)HE染色图片镜下幽门螺杆菌定植评分:单纯幽门螺杆菌感染组B组、预防干预组D组及治疗干预组E组小鼠胃幽门螺杆菌定植水平均高于对照组A组(P<0.05);预防干预组D组小鼠胃幽门螺杆菌定植水平低于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.05),治疗干预组E组小鼠胃幽门螺杆菌定植水平显着低于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.01)。(2)免疫组织化学染色图片镜下幽门螺杆菌定植评分:单纯幽门螺杆菌感染组B组、预防干预组D组及治疗干预组E组小鼠胃幽门螺杆菌定植水平均高于对照组A组(P<0.05);预防干预组D组及治疗干预组E组小鼠胃幽门螺杆菌定植水平低于单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.05)。5.采用16S rRNA基因测序法分析胃黏膜菌群:单纯幽门螺杆菌感染组B组小鼠胃黏膜菌群中Gardnerella菌相对丰度高于对照组A组、单纯岩藻多糖干预组C组、预防干预组D组及治疗干预组E组(P<0.05);岩藻多糖预干预的D组幽门螺杆菌感染小鼠胃黏膜菌群中金黄杆菌属(Chryseobacterium)相对丰度高于对照组A组、单纯幽门螺杆菌感染组B组、单纯岩藻多糖干预组C组及治疗干预组E组(P<0.05);单纯岩藻多糖干预的C组、岩藻多糖预干预的D组及治疗干预组E组的Alistipe、Erysipelatoclostridium有害菌的相对丰度低于对照组A组和单纯幽门螺杆菌感染组B组(P<0.05);单纯幽门螺杆菌感染组B组和治疗干预组E组的Alistipe相对丰度高于单纯岩藻多糖干预的C组(P<0.05);B组Lachnospiraceae_NK4A136_group的相对丰度高于单纯岩藻多糖干预的C组(P<0.05);治疗干预组E组的双歧杆菌(Bifidobacterium)相对丰度高于单纯岩藻多糖干预的C组(P<0.05);岩藻多糖预干预D组和治疗干预组E组两组的Faecalibaculum相对丰度高于对照组A组和单纯岩藻多糖干预组C组(P<0.05)。结论:1.岩藻多糖干预能促进正常小鼠体质量增加。2.幽门螺杆菌的感染会促进胃黏膜炎症反应的发生,岩藻多糖干预能有效减少胃幽门螺杆菌定植量,且能缓解胃黏膜炎症反应。3.岩藻多糖干预能增加胃黏膜有益菌的丰度(如Bifidobacterium、Faecalibaculum和产丁酸的菌等)以及降低有害菌(如Lachnospiraceae_NK4A316_Group、Alistipe、Gardnerella、Chryseobacterium和Erysipelatoclostridium)的丰度。4.本研究剂量范围及干预时间内,未见岩藻多糖具有直接抑菌作用。
郝凌婉[6](2021)在《新型金属有机骨架复合膜的制备及其抗菌性能的研究》文中研究说明由传统抗生素疗法导致的细菌耐药性的产生,已经成为人类健康和生命的主要威胁之一。因此,迫切需要研究可行的替代方法,在实现高效抗菌的同时不引发细菌耐药性的产生。目前,基于不引发细菌耐药性产生的物理抗菌策略引起了研究者的广泛关注。金属有机骨架(Metal-organic frameworks,MOFs)材料因其丰富的种类与功能、较好的生物相容性等特性成为物理杀菌的潜在平台。然而MOFs材料大多以粉末或块状的形式存在,因此将MOFs粒子组装至所需材料表面形成MOFs膜,可以进一步拓展其在抗菌表面中的应用,为新型抗菌策略的实施提供材料基础。由于MOFs合成条件的固有限制,在不同基底表面构建MOFs膜仍然是一项挑战。基于此,本文针对传统抗菌疗法中依赖抗菌物质释放、易引发细菌产生耐药性等问题,旨在开发快速、高效的MOFs膜构建方法,设计并制备了不同的MOFs膜材料用于增强表面抗菌效果,主要工作如下:1.实现了在温和反应条件下,利用可见光与多巴胺(DA)协助实现了MOFs粒子在基底表面的快速组装。在可见光照射下,DA和MOFs粒子相互作用,仅需4小时即可得到均一且稳固的MOFs膜,并且超声处理后所制备的MOFs膜仍可保持其原有的形貌。其中,待组装粒子UiO-66在此体系中具有关键性作用,其在可见光下产生的适量的活性氧促进了DA聚合;聚合后的PDA又可以促进MOFs粒子在表面的组装。将光敏剂孟加拉红(RB)引入至MOFs膜后,在可见光照射下,仅需5分钟该MOFs膜对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌杀菌效率就可以达到99%以上,表现出优异的光动力抗菌性能。总之,此工作提供了一种在基底上制备MOFs膜的新策略,有助于扩展功能化MOFs材料在抗菌领域中的应用。2.选用生物友好的单宁酸(TA)为主要组分,利用其与三价铁离子的络合作用,实现了MOFs纳米粒子在医用外科口罩(Surgical mask,SM)纤维膜表面的快速、均匀、稳定组装(Fe@UiO-66@TA/SM)。本文中提出其对MOF材料的“光敏化”作用,可潜在地提高表面光动力抗菌效果。具体地,在MOFs膜层-层组装过程中,铁离子和TA相互络合形成网络结构,可以协助MOFs粒子在表面组装,并且Fe@TA的染料“敏化”作用可以增强UiO-66在可见光区的吸收,从而提供光动力抗菌的可能。在模拟太阳光照射下,所制备Fe@UiO-66@TA/SM还具有光热转化性质。常规口罩佩戴和放置过程中表面可能产生细菌污染,而在模拟太阳光照射下,Fe@UiO-66@TA/SM对金黄色葡萄球菌与铜绿假单胞菌展现出有效的杀菌活性。总之,此工作提供了一种便捷、高效且通用的表面修饰方法,为医用抗菌材料表面设计提供了新的思路,具有潜在的应用价值。3.设计并制备了一种MOFs膜基滑移液体灌注的多孔表面(Slippery liquid infused porous surface,SLIPS)。这是首个完全依赖于物理性能实现其抗菌性能的“抗”-“杀”结合表面,避免了对生化抗菌剂的依赖,为进一步解决材料表面细菌粘附与生物膜形成提供了新方法和新思路。首先,利用二次生长的方法在平面与医用导管表面原位生长MOFs膜(ZIF-L)。ZIF-L独特的疏水性质与多孔结构不仅可以作为构建滑移表面的结构基础,而且兼具物理杀菌性能。注入润滑油所得到的滑移表面(ZIF-L-based SLIPS,ZLS)能够由抗细菌粘附表面转化为结构杀菌表面,为抑制细菌在材料表面形成生物膜提供了双重保障。ZLS与铜绿假单胞菌共培养24小时后表面仍可保持99%以上的抗细菌粘附效率,并且可从抗细菌粘附表面转变为杀菌表面。不同于性质单一的杀菌表面,所构建的滑移表面兼具抗细菌粘附与结构杀菌性质,其中“抗菌”与“杀菌”效果均来自于材料表面物理作用。作为应用实例,医用导管表面构建的ZLS可用于体内植入相关的材料表面抗菌修饰。因此,该MOFs膜基滑移表面为多功能、纯物理抗菌表面在实际应用方面提供了新的视角。
徐佳琪[7](2021)在《下丘脑室旁核miRNA-9-5p对糖尿病交感神经活动的影响及机制研究》文中研究指明目的:2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2D)的重要病理特征之一为交感神经过度兴奋,这种持续性的过度兴奋进一步恶化T2D,目前引起T2D大鼠下丘脑室旁核(Paraventricular nucleus,PVN)内交感亢进机制尚不明确。本研究拟探讨T2D大鼠PVN内微小核苷酸-9-5p(MiRNA-9-5p,miR-9-5p)及小电导钙激活钾通道(Small-conductance calcium Ca2+-activated K+channel,SK)对交感神经活动的影响及其内在机制,阐明SK3信号通路介导了PVN内miR-9-5p水平改变对交感神经活动的影响。方法:本研究选用高脂饲料(High fat diet,HFD)联合30 mg/kg链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导T2D大鼠模型(Diabetes mellitus,DM),普通饲料喂养的健康SD大鼠作为DM对照组(Diabetes mellitus control,DC);比较平行饲养12周后DC组和DM组对糖耐量实验的反应并观察肾交感神经放电(Renal sympathetic nerve discharge,RSND)、血浆去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)、平均动脉压(Mean arterial pressure,MAP)、心率(Heart rate,HR)和空腹血糖指标的变化;酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定两组大鼠胰岛素、瘦素及甘油三酯水平;Real-time PCR测定两组大鼠PVN内SK3蛋白的编码基因KCNN3mRNA及miR-9-5p水平;Western blot检测并比较DC和DM大鼠PVN及视上核(Supraoptic nucleus,SON)内SK3蛋白表达量;分别对两组大鼠PVN微量注射人工脑脊液及miR-9-5p的重组腺相关病毒(Recombinate adeno-associated virus,rAAV)(rAAV-miR-9-5p)和/或anti-9-5p重组腺相关病毒(rAAV-anti-9-5p),获取大鼠血糖和交感驱动指标并进行对比;免疫荧光法检测各组PVN内Fos B及SK3阳性细胞数量;分别对两组大鼠PVN微量注射人工脑脊液及KCNN3重组腺相关病毒(rAAV-KCNN3)和/或siKCNN3重组腺相关病毒(rAAV-siKCNN3),获取并比对大鼠血糖和交感驱动指标;免疫荧光法检测各组PVN内Fos B及SK3阳性细胞数量;应用miR-9-5p和/或anti-9-5p及KCNN3和/或siKCNN3分别转染原代脑神经细胞和NG108细胞,检测干预后细胞内SK3蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验检测miR-9-5p与KCNN3的靶向关系。结果:1.与DC大鼠相比,DM大鼠室旁核内miR-9-5p基因表达显着上调(2.22±0.11比1.00±0.00,P<0.05),KCNN3 mRNA表达无明显差异(1.04±0.05比1.00±0.00,P=0.44),而SK3蛋白表达水平显着下调(0.61±0.05比1.00±0.00,P<0.05)。2.PVN过表达miR-9-5p导致DC和DM大鼠RSND[DC:(40.67±2.29比60.00±2.67)%of max,DM:(68.33±2.64比91.17±1.66)%of max,P<0.05]、血浆NE[DC(232.83±8.41比325.83±12.04)pg/mL,DM(372.83±13.99比489.83±18.02)pg/mL,P<0.05]、血糖水平[DC(4.85±0.33比8.53±0.52)mM,DM(13.27±0.37比18.67±0.56)mM,P<0.05]及Fos B阳性神经元数量[DC(4.50±0.56比8.33±0.61个/4×104μm2),DM(8.00±0.58比13.83±0.60个/4×104μm2),P<0.05]明显升高;相反,室旁核敲减miR-9-5p则可导致DC和DM大鼠RSND[DC:40.67±2.29比(29.33±1.02)%of max,DM:(68.33±2.64)比(51.17±2.50)%of max,P<0.05]、血浆NE[DC(232.83±8.41比171.17±10.54)pg/mL,DM(372.83±13.99比283.67±9.19)pg/mL,P<0.05]、血糖水平[DC(4.85±0.33比2.88±0.518)mM,DM(13.27±0.37比8.58±0.56)mM,P<0.05]及Fos B阳性神经元数量[DC(4.50±0.56比2.17±0.31个/4×104μm2),DM(8.00±0.58比4.17±0.31个/4×104μm2),P<0.05]显着降低。3.PVN过表达KCNN3导致DC和DM大鼠RSND[DC(40.00±1.71比30.00±1.41)%of max,DM(65.83±2.98比47.50±2.93)%of max,P<0.05]、血浆NE[DC(232.67±6.38比187.00±6.51)pg/mL,DM(346.00±11.43比257.50±6.60)pg/mL,P<0.05]及血糖水平[DC(5.28±0.32比2.98±0.19)mM,DM(12.88±0.54比8.38±0.68)mM,P<0.05]显着下降;相反,室旁核内敲减KCNN3可引起RSND[DC(40.00±1.71比59.83±2.57)%of max,DM(65.83±2.98比87.50±2.47)%of max,P<0.05]、血浆NE[DC(232.67±6.38比328.00±14.79)pg/mL,DM(346.00±11.43比461.17±13.22)pg/mL,P<0.05]及血糖水平[DC(5.28±0.32比9.23±0.60)mM,DM(12.88±0.54比18.72±0.84)mM,P<0.05]显着升高。4.室旁核内过表达miR-9-5p导致DC和DM大鼠SK3阳性神经元数量显着下调[DC(11.50±0.67比7.33±0.56个/4×104μm2),DM(7.17±0.48比2.67±0.42个/4×104μm2),P<0.05]。细胞转染miR-9-5p可显着下调原代脑神经细胞(1.00±0.00比0.50±0.03,P<0.05)和NG108细胞(1.00±0.00比0.53±0.04,P<0.05)内SK3蛋白水平;转染anti-9-5p则可明显上调原代脑神经细胞(1.00±0.00比0.97±0.04,P<0.05)和NG108细胞(1.00±0.00比0.94±0.05,P<0.05)内SK3蛋白水平。Targetscan预测发现miR-9-5p和KCNN3 mRNA的3’非翻译区(3’UTR)存在序列结合,双荧光素酶报告基因证实miR-9-5p靶向调控KCNN3基因(100.00±0.00比49.58±3.42,P<0.05)。结论:T2D大鼠PVN内上调的miR-9-5p可能通过靶向抑制SK3蛋白表达介导交感神经兴奋亢进。
蔡阳[8](2021)在《两亲性苝酰亚胺的设计合成、组装体构建及生物应用研究》文中提出荧光染料试剂是生物医用材料中重要的分支之一。随着科学技术的发展,荧光染料已经从单一功能的成像试剂发展为集诊断与治疗于一体的分子诊疗材料。目前,人类生命健康仍然被各种疾病所困扰。近年来虽已涌现了大量诊疗材料和策略,但它们各自仍存在一定不足。为探究解决这些生命健康问题,迫切需要开发新材料、新策略。苝酰亚胺是一类摩尔消光系数高,光、热、化学稳定性高,修饰位点多,光物理化学性质可调的芳香稠环类荧光染料,近年来在光学成像、光疗等生命科学领域大放异彩。此外,大的π共轭平面结构使苝酰亚胺具有强烈的自组装倾向,所形成的组装体材料性质与其聚集态存在紧密的联系,是超分子化学(组装)领域重要的研究对象。鉴于苝酰亚胺组装-性能间的强关联性,我们通过分子结构的合理设计和分子组装的精细操控来调控苝酰亚胺分子聚集态,进而调节其理化性质、纳米性质及生物学性能。针对细胞荧光成像,病菌感染,光动力诊疗等方面所面临的问题,本论文以苝酰亚胺为分子基础,从(1)基团位阻效应,(2)溶质-溶剂相互作用及(3)酶促结构转变等三个调控分子组装的角度出发,分别设计合成了不同性能的两亲性苝酰亚胺,并制备了不同功能化的苝酰亚胺组装体,实现了长效细胞荧光成像,可见光光催化增强的抗菌和可活化的深层光动力诊疗,为解决以上问题提供了新的材料设计和分子诊疗策略。本论文具体包括以下几个方面的研究:1.利用修饰基团的位阻效应,调控苝二酰亚胺(PBI)组装体水溶性,粒径及荧光性质。通过一步酰胺化反应,将不同代数的亲水性扇形聚酰胺-胺(PAMAM)树枝偶联在PBI酰亚胺位两端,得到一系列以PBI为核的荧光树枝状分子(PBI-G0.5,PBI-G1.5和PBI-G2.5)。研究比较了不同代数荧光树枝状分子的光学,纳米组装和生物学性质。发现相同条件下,随着树枝代数的增加,PBI树枝状分子的水溶性逐渐增大,荧光发射也更强。PBI-G2.5在水溶液中展现出强的荧光发射,可自组装形成弱正电性(~2.46 mV)的纳米粒子(~30 nm)。此外,PBI-G2.5显示出良好的生物相容性。PBI-G2.5与PBI-L5能被HeLa细胞快速摄取而富集在细胞中,并能在细胞中滞留48小时以上,展现出长效活细胞荧光成像潜力。本章工作报道了一类新型生物成像试剂,提出了一种制备水溶性长效荧光成像分子的有效策略。2.利用溶剂-溶质相互作用调控苝酰亚胺自组装,并以这些组装体为模板制备具有可控纳米结构的银纳米杂化材料,实现了可见光光催化增强的抗菌应用。设计合成了含有胞嘧啶结构的不对称苝酰亚胺PC。PC可在不同溶剂环境中自组装形成不同形貌的组装体。随后,分别以这些组装体为模板,通过化学还原银离子,在组装体表面原位生长银纳米粒子(AgNPs),从而构建出不同结构的银杂化纳米材料PC/AgNPs,稳定了银纳米粒子的分散。验证了 PC纳米纤维(PCF)及其银纳米杂化材料(PCFS)的光催化活性。在可见光照射下,PCFS可产生活性氧,在促进自身银离子释放的同时还可光催化杀菌。由于兼具光催化抗菌和银离子抗菌性能,PCFS可有效杀伤金黄色葡萄球菌。以上结果证明了通过控制苝酰亚胺分子组装来制备具有可控结构的有机-无机纳米杂化材料的可行性,为设计制备新型高效低毒的抗菌材料提供了新的思路。3.利用刺激响应的结构转变来调控分子组装,发展了一种酶诱导解组装触发的可活化和可渗透深层肿瘤的苝酰亚胺基智能纳米光敏剂FHP,实现了可活化的光动力诊疗。设计合成了一种新型的羧酸酯酶(CE)响应的近红外四氯苝单酰亚胺荧光分子P1。通过P1与叶酸修饰的白蛋白共组装,得~100 nm的纳米簇光敏剂FHP。研究发现,一旦P1被肿瘤特异性的CE水解,FHP会解组装成~10 nm的超小纳米粒子,这种尺寸转变使得FHP在实现高效富集肿瘤的同时还能向肿瘤深层部位渗透。同时,该酶诱导解组装过程使FHP荧光增强~8倍,光动力效果提升~4倍。上述光学性能的转变使FHP能进行原位的近红外荧光成像,并提升光动力治疗效果。通过成像指导的,可活化的深层光动力治疗,FHP在活体水平表现出显着的抗肿瘤效果,且具有较小的毒副作用。综上,本章工作证明通过酶诱导分子解组装来触发控制级联多功能响应的策略可实现精准的癌症诊疗。
孙林[9](2021)在《新型HIV-1衣壳蛋白抑制剂和RNase H抑制剂的设计、合成与生物活性评价》文中认为艾滋病(AIDS)的主要致病原为人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)。临床上通常将至少三种作用于HIV-1生命周期不同阶段的药物联合应用来治疗艾滋病,称为“高效抗逆转录病毒疗法”(HAART)。但是,由于HIV-1具有潜伏性,因此需要长期甚至终生接受药物治疗,这不可避免地带来了严重的耐药性等问题。因此,瞄准具有成药潜力的新靶标,尤其是在HIV-1生命周期的多个环节中扮演重要角色的蛋白或酶,如衣壳蛋白(CA)和核糖核酸酶H(RNase H),研发具有新结构、新机制的药物来丰富临床治疗方案,是解决现有药物耐药难题的有效策略。HIV-1 CA是构成一个成熟的病毒颗粒所必需的结构蛋白,并将病毒基因和关键酶包裹其中。此外,CA在病毒复制的早期和晚期阶段还发挥重要的调控作用,与HIV-1的复制及感染性密切相关。目前已有多类CA抑制剂见诸报道,其中作用于CA六聚体相邻亚基N末端-C末端(NTD-CTD)界面的抑制剂尤为引人关注。NTD-CTD界面作用对于CA组装至关重要,干扰该界面可影响CA内在的柔韧性,继而破坏病毒颗粒的完整性。PF74是第一个与NTD-CTD界面的共晶结构得到解析的化合物,但是其存在药理活性低、代谢不稳定等缺陷,未能进入临床研究。最终吉利德公司在PF74基础上经过大量的结构优化发现了抗病毒活性突出的GS-6207,目前已处于临床研究阶段。但是其合成复杂、分子量大、溶解度差、临床研究已诱发病毒耐药等缺陷,使得开发新结构类型的HIV-1 CA抑制剂尤为迫切。HIV-1 RNase H能特异性地水解在逆转录过程中新生成的RNA/DNA杂合链中的RNA链。其一旦受到抑制,逆转录过程将难以延续。目前见诸报道的RNase H抑制剂大都存在抗病毒活性弱和细胞毒性大等缺陷,尚未有RNase H抑制剂进入到临床研究阶段。RNase H作为金属依赖性蛋白,使得对其进行计算机模拟研究存在局限性,从而为基于靶标的药物设计带来困难。而通过对结构多样的化合物库进行细胞水平的抗HIV表型筛选并辅之作用机制研究,以发现具有新作用机制(如RNase H抑制活性)的先导化合物,不失为一种行之有效的途径。一、含三氮唑的苯丙氨酸类HIV-1衣壳蛋白抑制剂的设计、合成与活性评价本章以GS-CA1和GS-6207所共有的PF74苯丙氨酸基本骨架为研究起点,借鉴课题组前期发现的化合物13m的结构特征,综合运用基于靶标的药物设计原理以及骨架跃迁、生物电子等排替换等药物化学策略,将13m的1-(萘-2-亚甲基)-1H-1,2,3-三唑替换为4-苯基-1H-1,2,3-三唑,并在末端苯环上进行多样性导向的取代基修饰,以克服CA柔性靶标与小分子结合模式的难预测性,并丰富此类抑制剂的构效关系,设计并合成了 IA系列共39个结构新颖的含三氮唑的苯丙氨酸类HIV-1 CA抑制剂。体外抗HIV-1活性筛选发现,IA系列大部分化合物表现出中等的抗病毒活性(EC50=3.13μM~14.81 μM)。其中,IA-6a-9、IA-6a-10、IA-6a-11 和 IA-5b 的抗 HIV-1 活性(EC50分别为 3.13 μM、3.30μM、3.46 μM 和 3.30 μM)最为突出,但仍弱于先导 PF74(EC50=0.28μM)。SPR 实验结果显示,IA-6a-9、IA-6a-10和IA-5b与CA六聚体结合的KD值彼此接近(分别为6.04 μM、4.99 μM和4.00μM),与三者抗病毒活性趋势一致,初步验证了作用靶点。作用阶段确证实验结果表明IA-6a-9具有抑制HIV-1复制早期和晚期双重阶段的作用特征,且其更倾向于抑制晚期阶段(IC50=0.32 μM),与PF74活性相当(IC50=0.23 μM)。进一步的机制实验表明,IA-6a-9几乎不影响p24产量和体外CA装配。IA-6a-9的分子动力学模拟显示其与CA形成氢键的频率较低,这可能是其活性弱的原因之一。此外,IA-6a-9在人肝微粒体和血浆中的代谢稳定性与PF74相当或略有提升。总之,IA系列系统的构效关系(SAR)分析及分子动力学模拟结果,为下一轮化合物的结构优化提供了有益的指导。二、含苯磺酰胺的苯丙氨酸类HIV-1衣壳蛋白抑制剂的设计、合成与活性评价第二章中IA系列的SAR分析和分子动力学模拟说明了氢键作用对于提升化合物活性的重要性。在本轮的结构改造中,我们通过基于靶标的药物设计,在PF74骨架基础上,首先将吲哚环替换为含有更多氢键供受体的苯磺酰胺得到ⅡA系列,再运用成环策略得到含苯并噻二嗪环的ⅡB系列,最后在ⅡB结构基础上运用骨架跃迁和生物电子等排策略得到含4-苯磺酰基哌嗪酮环的ⅡC系列,共计3个系列37个结构新颖的含苯磺酰胺的CA抑制剂。体外抗HIV-1实验结果显示,除了 ⅡA-31丧失活性外,其余所有衍生物对HIV-1 NL4-3均表现出中等至优异的抑制活性(EC50=90 nM~10.81μM)。通过从 ⅡA(EC50=5.61 μM~10.81 μM)到 ⅡB(EC50=2.11μM~5.96μM)再到 ⅡC 系列(EC50=90 nM~1.06 μM)的分层次结构优化,活性也得到逐步提升,验证了化合物设计的合理性。由此可见,哌嗪酮片段的引入是ⅡC系列具有高活性的关键。值得一提的是,ⅡC-31(EC50=90nM)作为本章抗病毒活性最好的CA抑制剂,是先导PF74(EC50=520nM)的近6倍。SPR实验显示,ⅡA-3a、ⅡA-3k、ⅡB-2a、ⅡB-2d对CA六聚体的结合亲和力(KD分别为11.80 μM、7.99 μM、1.19 μμM和1.30 μM)与其抗病毒活性趋势近乎一致,初步验证了 CA为其作用靶点。ⅡC-31对病毒复制的早期和晚期阶段均表现出最好的抑制活性(IC50分别为8.96 nM和0.24 μM),其早期抑制活性是先导PF74(IC50=56nM)的6.25倍,这与二者的抗病毒活性水平差距一致(90 nM vs520 nM)。在ⅡA-3k、ⅡB-2a和ⅡC-31存在下,所产生的病毒p24含量相比对照DMSO仅略有改变。在体外CA装配实验中,ⅡA-3k、ⅡB-2a和ⅡC-31明显抑制了 CA的组装,而PF74则可以显着加快组装过程。此外,共晶结构显示ⅡC-31可以同时精准的结合到CA六聚体的6个相邻亚基界面,与PF74构象基本相同。ⅡC-31中新引入的哌嗪酮基团有较高的概率与Arg173、Lys70以及Gln63等形成额外氢键作用力,为其出色的抗病毒活性提供了合理的解释。随后对ⅡC-31 进行了初步的临床前成药性评价:首先,在人肝微粒体和血浆中,ⅡC-31相比PF74代谢稳定性略有提高;其次,在SD大鼠的体内药代动力学实验中,ⅡC-31表现出良好的体内PK性质和口服生物利用度(t1/2=1.2 h,F=23.0%);最后,在昆明小鼠的急毒实验中,ⅡC-31在1000 mg/kg的单次灌胃剂量下无明显的急性毒性。综上,本研究验证了基于PF74的苯丙氨酸优势结构骨架,通过结构优化来提高化合物的抗病毒活性与成药性的可行性。ⅡC-31可以作为结构新颖的先导分子供进一步研究。三、香豆素酰胺类抗HIV-1 RNase H先导化合物的发现发挥药理活性的先导化合物是新药创制的物质基础,而基于化合物库的筛选是先导化合物发现的主要途径。特别是,本课题组经过多年积累获得的大量骨架新颖、结构多样且具有良好成药性的小分子,为表型筛选发现结构新颖的抗HIV先导化合物提供了物质保证。文献调研发现,羟基香豆素骨架具有RNase H抑制活性,同时香豆素及其衍生物可以发挥诸如抗病毒等药理活性。为了提高RNaseH抑制剂的命中率,同时降低活性筛选工作量,在本研究中,我们选取了 in-house化合物库中一类羟基香豆素酰胺类化合物(DW系列),首先进行了细胞水平的抗HIV-1表型筛选。实验结果显示,DW-3、DW-4、DW-11、DW-25和DW-31对双突变株RES056的抑制活性(EC50 分别为 121.86 μM、101.15 μM、208.95 μM、28.56 μM 和 82.78μM)与野生株 ⅢB(EC50 分别为 113.32 μM、107.91 μM、213.06μM、19.63 μM和123.46μM)接近或相当,显示该类化合物具有显着的抗耐药潜力。分析还发现该类活性化合物符合经典的HIV-1 RNase H抑制剂药效团模型。于是进行了HIV-1RNase H抑制实验,结果显示DW-3、DW-4、DW-25、DW-31均能表现出不同水平的RNase H抑制活性(9.9 μM~68.5 μM)。以上实验结果表明此类化合物可通过作用于RNase H来发挥抗病毒活性。为了进一步提高香豆素类HIV-1 RNase H抑制剂的抗病毒活性,我们基于筛选发现的活性化合物结构,以药效团模型和RNaseH靶标结构为指导,综合运用骨架跃迁和生物电子等排策略设计合成了 36个结构新颖的香豆素类化合物。体外抗HIV-1实验显示有8个化合物表现出了不同水平的细胞活性(EC50=3.94μM~237.34 μM),且细胞毒性极低(CC50>220 μM)。其中化合物ⅢB-2a活性最为突出,其抗HIV-1野生株活性(EC50=3.94 μM)是其他化合物的12~60倍,是先导化合物DW-4(EC50=101.15 μM)的近26倍。抗HIV-1突变株活性结果显示ⅢB-2a对5种单突变株抗耐药性良好,大多保持在个位数的耐药倍数(RF=1.43~11.27),与上市药物依曲韦林(ETV)接近或相当(RF=0.85~4.09),显着优于奈韦拉平(NVP)(RF=1.29~45.26)和依法韦仑(EFV)(RF=1.59~86.23)。随后的RNaseH抑制实验表明,在100 μM初筛浓度下,大部分化合物都表现出了中等及以上的靶标抑制率(57.4~87.2%),此外,ⅢB-2a表现出了最优的RNase H抑制活性(IC50=12.3 μM),初步验证了此类化合物可以通过抑制RNase H来发挥抗病毒作用。总之,IIIB-2a可以作为香豆素酰胺类抗RNase H先导化合物继续结构优化,以进一步提高活性和成药性。综上,本论文针对抗艾滋病临床疗法中存在的药物严重耐药性问题,从开发HIV-1新靶标——CA和RNase H抑制剂两方面入手,在基于结构的药物设计与化合物库表型筛选等药物设计和发现方法指导下,综合运用生物电子等排替换、骨架跃迁等药物化学策略,设计并合成了含三氮唑的、含苯磺酰胺的苯丙氨酸类HIV-1 CA抑制剂以及香豆素酰胺类HIV-1 RNase H抑制剂,共计6个系列112个结构全新的化合物。经细胞水平和酶水平的活性测试,以及人肝微粒体和血浆稳定性测试、大鼠PK实验等,发现了多个具有良好抗病毒活性和成药性的抗HIV-1先导化合物。本论文还成功解析了 ⅡC-31与CA六聚体的复合晶体结构,初步阐明了含哌嗪酮化合物发挥高效抗病毒活性的分子机制,为后续基于靶标的合理药物设计奠定了结构生物学基础。
程秋婷[10](2021)在《Hsa_circ_0071106、hsa-miR-607和lncRNA TUG1对2型糖尿病的影响及功能预测》文中认为目的本研究通过circBank、starBase和circIteractome等生物信息学数据库在线预测与hsa_circ_0071106(课题组前期基因芯片和人群验证所得)相互作用的miRNA,并通过实时荧光定量PCR检测相关miRNA在2型糖尿病与对照的差异表达。随后,对有关联的miRNA通过starBase和Diana-lncRNABase生物信息学预测相互作用的lncRNA,结合文献筛选与2型糖尿病有关的lncRNA,通过qRT-PCR检验筛选的lncRNA在2型糖尿病和对照表达的差异。运用ROC曲线探讨hsa_circ_0071106、目标miRNA和lncRNA单独和联合诊断价值,并通过中介效应分析它们之间对糖尿病影响的相互作用。最后通过miRNA靶基因功能富集,预测它们对2型糖尿病影响可能的功能通路,为2型糖尿病的机制研究提供科学依据。方法本研究采用了个体匹配的病例对照研究设计。2019年,在健康筛查基础上选取广州市花都区5个社区人群中的2型糖尿病患者作为病例,纳入标准为空腹血糖≥7.0mmol/L和/或口服葡萄糖耐量试验2小时血糖≥11.1mmol/L和/或经县级以上医院诊断为2型糖尿病,按照性别相同和年龄相差不超5岁的原则从同一居住区抽取空腹血糖<7.0mmol/L,且口服葡萄糖耐量试验2小时血糖<11.1mmol/L且无糖尿病史的人群为对照组。采用流行病学问卷调查人口学资料、吸烟和饮酒状况以及既往史等信息,测量血压以及抽取空腹外周静脉血。结合生物信息学预测结果及既往文献,选择与hsa_circ_0071106相互作用的miRNA和与miRNA相互作用的lncRNA,利用实时荧光定量PCR的方法验证hsa_circ_0071106、目标miRNA和lncRNA在2型糖尿病和对照的差异表达。运用ROC曲线评估hsa_circ_0071106、目标miRNA和lncRNA单独和联合诊断价值。采用多因素条件logistic回归分析hsa_circ_0071106、目标miRNA和lncRNA对2型糖尿病患病风险的影响。采用中介效应分析hsa_circ_0071106、目标miRNA和lncRNA对2型糖尿病影响的相互作用关系。采用GO富集分析和KEGG通路富集分析预测miRNA靶基因对2型糖尿病影响可能的功能通路。最后采用相关分析探讨hsa_circ_0071106、目标miRNA和lncRNA与临床生化指标之间的相关性。结果1、本研究通过circBank、starBase和circIteractome等数据库在线预测hsa_circ_0071106相互作用的miRNA,并通过Cytoscape软件绘成网络图来描述它们之间的关系,三个数据库预测的miRNA有hsa-miR-1206、hsa-miR-607、hsa-miR-450b-3p、hsa-miR-556-5p、hsa-miR-409-3p、hsa-miR-3690和hsa-miR-29a-5p等。2、共纳入病例和对照各101例。通过qRT-PCR检测2型糖尿病病例和对照外周血中hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-409-3p和hsa-miR-3690的相对表达,发现hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607和hsa-miR-3690在糖尿病组外周血中表达明显高于对照组,同时调整年龄、性别、吸烟、饮酒、TG、TC和LDL-C后,多因素条件logistic回归结果显示,hsa-miR-29a-5p高表达是影响2型糖尿病的危险因素(OR=10.28,95%CI:1.95~54.10,P=0.018);hsa-miR-607高表达患2型糖尿病风险是低表达的5.17倍(95%CI:1.48~18.09,P=0.012);hsa-miR-3690高表达患2型糖尿病风险是低表达的26.88倍(95%CI:2.65~272.87,P=0.030)。3、本研究通过starBase和Diana-lncRNABase等数据库在线预测hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607和hsa-miR-3690相互作用的lncRNA,并通过韦恩图取交集发现hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607和hsa-miR-3690相互作用的lncRNA有lncRNA TUG1、lncRNA MALTA1和lncRNA MEG3等27个。4、本研究通过qRT-PCR检测2型糖尿病病例和对照外周血中lncRNA TUG1、lncRNA MALTA1和lncRNA MEG3的相对表达,发现lncRNA TUG1和lncRNA MEG3在糖尿病组外周血中表达明显高于对照组,调整年龄、性别、吸烟、饮酒、TG、TC和LDL-C后结果显示,lncRNA MEG3高表达是影响2型糖尿病的危险因素(OR=5.75,95%CI:1.55~21.36,P=0.014);lncRNA TUG1高表达患2型糖尿病风险是低表达的5.98倍(95%CI:1.62~22.10,P=0.014)。5、本研究采用ROC曲线评估hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-3690、lncRNA MEG3、lncRNA TUG1和hsa_circ_0071106在2型糖尿病中的诊断价值,发现外周血lncRNA TUG1表达水平诊断2型糖尿病时曲线下面积为0.642(95%CI:0.549~0.735),灵敏度是63.4%,特异度是97.0%;hsa-miR-607、lncRNA TUG1和hsa_circ_0071106的联合诊断ROC曲线下面积为0.763(95%CI:0.682~0.844),灵敏度为74.3%,特异度为97.0%。6、本研究采用中介分析发现hsa_circ_0071106和hsa-miR-607对2型糖尿病的影响主要归因于单纯中介效应(超额相对危险度=0.34,95%CI:-0.03~0.66,P=0.031);lncRNA TUG1和hsa-miR-607对2型糖尿病的影响主要归因于单纯中介效应(超额相对危险度=0.32,95%CI:0.03~0.61,P=0.030);hsa_circ_0071106和lncRNA TUG1对2型糖尿病的影响主要归因于单纯中介效应(超额相对危险度=0.32,95%CI:0.04~0.60,P=0.026);lncRNA MEG3和hsa-miR-29a-5p对2型糖尿病的影响主要归因于单纯中介效应(超额相对危险度=0.36,95%CI:0.04~0.68,P=0.025);lncRNA MEG3和hsa-miR-3690对2型糖尿病的影响主要归因于单纯中介效应(超额相对危险度=0.28,95%CI:0.01~0.55,P=0.046)。7、本研究通过starBase、miRwalk、miRDB和Targetscan等数据库对hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607和hsa-miR-3690进行生物信息学靶基因在线预测,并使用韦恩图得到交集,其中,hsa-miR-29a-5p的靶基因交集有122个,hsa-miR-607的靶基因交集有352个,hsa-miR-3690预测的靶基因交集有116个。GO功能富集分析发现hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607和hsa-miR-3690可能在细胞质或细胞核中蛋白质结合、ATP结合等元件上参与DNA模板转录、RNA聚合酶II启动子转录调控等生物过程;KEGG通路富集分析发现可能参与胰岛素抵抗、Fox O和AMPK信号通路等。8、本研究采用相关分析发现hsa-miR-3690与SBP呈正相关(rs=0.19,P=0.008);hsa-miR-29a-5p与LDL-C有正相关关系(rs=0.17,P=0.037);hsa-miR-607与LDL-C呈正相关关系(rs=0.27,P<0.001),与HDL-C则负相关(rs=-0.17,P=0.040)。结论本研究发现hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-3690、lncRNA MEG3、lncRNA TUG1和hsa_circ_0071106与2型糖尿病发病风险有关联。lncRNA TUG1和hsa_circ_0071106通过hsa-miR-607的中介作用来调控2型糖尿病,hsa_circ_0071106通过lncRNA TUG1中介作用调控2型糖尿病,lncRNA MEG3通过中介hsa-miR-29a-5p和hsa-miR-3690影响2型糖尿病。它们可能在细胞质或细胞核中蛋白质结合、ATP结合等元件上的调控DNA模板转录以及RNA聚合酶Ⅱ启动子转录等过程,参与胰岛素抵抗、Fox O和AMPK信号通路等2型糖尿病调控信号通路。lncRNA TUG1、hsa-miR-607和hsa_circ_0071106联合诊断2型糖尿病价值更高。
二、静脉药物配制中心崭露头角(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、静脉药物配制中心崭露头角(论文提纲范文)
(1)化瘀通痹方调控小鼠类风湿关节炎模型关节炎症的作用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
第一部分 文献综述 |
综述一 先天性淋巴细胞在类风湿关节炎病程中的作用 |
1 NK细胞和ILC1细胞 |
2 ILC2 |
3 ILC3 |
4 LTi |
5 血清反应阳性RA不同阶段各种固有淋巴细胞的水平 |
6 靶向ILC相关的生物制剂治疗和前景瞻望 |
结语 |
参考文献 |
综述二 类风湿关节炎中药治疗实验研究进展 |
1 中医病因病机 |
2 中医传统经方疗效及机制的实验研究 |
参考文献 |
前言 |
第二部分 实验研究 实验名称:化瘀通痹方灌胃对DBA/1小鼠牛Ⅱ型胶原诱导类风湿关节炎模型影响 |
1. 材料 |
2 方法 |
3 结果 |
4 讨论 |
结语 |
参考文献 |
致谢 |
在学期间主要研究成果 |
(5)岩藻多糖对鼠胃幽门螺杆菌定植的影响(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
引言 |
材料与方法 |
1 实验材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 菌株 |
1.3 主要仪器和试剂 |
2 构建小鼠感染模型及分组 |
2.1 实验前准备 |
2.2 实验过程 |
3 实验方法 |
3.1 幽门螺杆菌(HP)的复苏和鉴定 |
3.2 HE染色 |
3.3 免疫组织化学染色 |
3.4 抑菌环实验 |
3.5 胃菌群分析 |
4 统计学分析 |
实验结果 |
1 幽门螺杆菌(HP)的培养 |
1.1 菌落性状鉴定 |
1.2 幽门螺杆菌基因组类型 |
2 构建小鼠感染模型及分组 |
2.1 48 h后,根据菌落数计算满盘菌含量 |
2.2 小鼠体质量增长率 |
3 HE染色 |
4 免疫组织化学染色 |
5 抑菌环实验 |
6 胃菌群分析 |
6.1 OTU个数分布图 &Venn图 &物种分布柱状图 |
6.2 α多样性 |
6.3 β多样性——胃组织NMDS分析&LEfSe分析 |
6.4 组间差异显着性分析——Metastats分析 |
讨论 |
结论 |
参考文献 |
综述 岩藻多糖对鼠胃上皮幽门螺旋杆菌定植的影响 |
综述参考文献 |
攻读学位期间研究成果 |
致谢 |
(6)新型金属有机骨架复合膜的制备及其抗菌性能的研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 绪论 |
1.1 抗菌策略现状 |
1.2 不引发细菌耐药性的抗菌策略 |
1.2.1 光动力抗菌策略 |
1.2.2 光热力抗菌策略 |
1.2.3 仿生表面抗菌策略 |
1.3 金属有机骨架膜抗菌材料 |
1.3.1 金属有机骨架膜 |
1.3.2 金属有机骨架膜的制备 |
1.3.3 金属有机骨架膜在抗菌中的应用 |
1.4 本课题的选题背景、研究目的以及主要成果 |
1.4.1 本课题的选题背景与研究目的 |
1.4.2 本课题的主要成果 |
1.5 本论文所涉及的主要试剂与仪器汇总 |
参考文献 |
第二章 可见光介导多巴胺协助金属有机骨架膜的快速组装及其抗菌性能 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 UiO-66 纳米粒子的制备 |
2.2.2 UiO-66 纳米粒子在滤纸纤维膜表面的组装 |
2.2.3 SiO_2纳米粒子的制备 |
2.2.4 UiO-66/DA/Vis@pH=7 吸附实验 |
2.2.5 UiO-66/DA/Vis@pH=7-RB样品的ROS检测 |
2.2.6 紫外光(UV)照射下的ROS检测 |
2.2.7 抗坏血酸ROS捕获实验 |
2.2.8 细菌的培养 |
2.2.9 UiO-66/DA/Vis@pH=7-RB光动力抗菌实验 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 UiO-66 在滤纸表面的快速组装 |
2.3.2 UiO-66/DA/Vis@pH=7 的表征 |
2.3.3 可见光介导多巴胺协助UiO-66 表面共沉积机理 |
2.3.4 UiO-66/DA/Vis@pH=7-RB的制备与表征 |
2.3.5 UiO-66/DA/Vis@pH=7-RB光动力抗菌实验 |
2.4 本章小结 |
参考文献 |
第三章 铁离子/单宁酸协助金属有机骨架膜的构建及其抗菌性能 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 UiO-66 纳米粒子的制备 |
3.2.2 Fe@UiO-66@TA膜与纳米粒子的制备 |
3.2.3 Fe@UiO-66@TA膜的电化学测试 |
3.2.4 光热转化测试 |
3.2.5 细菌的培养 |
3.2.6 Fe@UiO-66@TA膜的抗菌实验 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 纳米粒子的制备与表征 |
3.3.2 Fe@UiO-66@TA膜的制备与表征 |
3.3.3 Fe@UiO-66@TA膜的光催化性质 |
3.3.4 Fe@UiO-66@TA膜的光热转化测试 |
3.3.5 Fe@UiO-66@TA膜的抗菌实验 |
3.4 本章小结 |
参考文献 |
第四章 MOFs基 SLIPS表面及其抗菌性能研究 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 ZIF-L在不同基底表面的组装 |
4.2.2 不同基底表面ZLS的制备 |
4.2.3 表面润湿性测试 |
4.2.4 稳定性测试 |
4.2.5 体外抗生物膜实验 |
4.2.6 ZIF-L结构杀菌实验 |
4.2.7 抑菌圈实验 |
4.2.8 模拟ZLS表面“抗”-“杀”转化 |
4.2.9 体外细胞毒性实验 |
4.2.10 小鼠皮下植入相关感染的体内实验 |
4.2.11 统计学分析 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 ZIF-L的制备与表征 |
4.3.2 ZLS表面润湿性行为表征 |
4.3.3 体外抗生物膜实验 |
4.3.4 ZLS表面“抗”-“杀”性质的转换 |
4.3.5 细胞毒性实验 |
4.3.6 体内抗菌实验 |
4.4 本章小结 |
参考文献 |
第五章 结论与展望 |
5.1 结论 |
5.2 展望 |
作者简介 |
研究成果 |
致谢 |
(7)下丘脑室旁核miRNA-9-5p对糖尿病交感神经活动的影响及机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中英缩略词对照表 |
引言 |
第一章 文献综述 |
1.1 糖尿病中枢室旁核发病机制及治疗研究进展 |
1.1.1 肾素-血管紧张素系统与糖尿病 |
1.1.2 瘦素-谷氨酸通路与糖尿病 |
1.1.3 瞬时受体电位香草酸亚型1 与糖尿病 |
1.1.4 γ-氨基丁酸与糖尿病 |
1.1.5 一氧化氮与糖尿病 |
1.1.6 多巴胺与糖尿病 |
1.1.7 活性氧簇与糖尿病 |
1.1.8 神经肽Y与糖尿病 |
1.1.9 摄食抑制因子1 与糖尿病 |
1.1.10 黑皮质素与糖尿病 |
1.1.11 肿瘤坏死因子-α与糖尿病 |
1.1.12 胃动素、生长抑素与糖尿病 |
1.1.13 胰高血糖素样肽-1 与糖尿病 |
1.1.14 5-羟色胺与糖尿病 |
1.1.15 雌激素与糖尿病 |
1.1.16 酮体与糖尿病 |
1.1.17 垂体腺苷环化酶激活多肽与糖尿病 |
1.1.18 可卡因-苯丙胺调节转录肽与糖尿病 |
1.2 糖尿病的中枢室旁核治疗研究进展 |
1.3 miR-9 在机体生理及病理调节中的作用 |
1.3.1 miR-9 的生物学特性及功能 |
1.3.2 miR-9 在外周各系统中的生理作用 |
1.3.3 miR-9 在外周各系统中的病理作用 |
1.3.4 miRNA-9在中枢神经系统中的生理病理作用 |
1.4 SK通道在机体生理及病理调节中的作用 |
1.4.1 SK离子通道的生物学特性及功能 |
1.4.2 SK离子通道在外周各系统中的生理作用 |
1.4.3 SK离子通道在外周各系统中的病理作用 |
1.4.4 SK离子通道在中枢神经系统中的生理病理作用 |
第二章 材料与方法 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 实验动物 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.3 主要试剂的配制 |
2.1.4 主要实验设备 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 2 型糖尿病大鼠模型的建立 |
2.2.2 尿液中去甲肾上腺素水平的检测 |
2.2.3 血浆葡萄糖和胰岛素水平的检测 |
2.2.4 Targetscan软件预测miR-9-5p与 KCNN3 mRNA的靶向调节关系 |
2.2.5 室旁核微量注射 |
2.2.6 交感驱动指标的检测 |
2.2.7 血液采集及生化指标检测 |
2.2.8 室旁核组织的提取 |
2.2.9 免疫荧光检测SK3和Fos B的蛋白表达水平 |
2.2.10 Real-time PCR检测miR-9-5p和 KCNN3 mRNA的基因表达水平 |
2.2.11 培养原代乳鼠下丘脑神经细胞和NG108 细胞 |
2.2.12 细胞转染miR-9-5p |
2.2.13 Western blot检测SK3 的蛋白表达水平 |
2.2.14 双萤光素酶报告基因检测miR-9-5p与 KCNN3mRNA的靶向调节关系 |
2.2.15 实验设计和分组 |
2.2.16 数据分析 |
第三章 结果与分析 |
3.1 2 型糖尿病大鼠模型的鉴定 |
3.2 Targetscan软件预测miR-9-5p与 KCNN3 mRNA存在靶向调节关系 |
3.3 Real-time PCR鉴定miR-9-5p和 KCNN3 mRNA的基因表达水平 |
3.4 室旁核内微量注射miR-9-5p和/或anti-9-5p对大鼠交感驱动指标和血糖的影响 |
3.5 室旁核内微量注射KCNN3 和/或siKCNN3 对大鼠交感驱动指标和血糖的影响 |
3.6 免疫荧光检测表达FosB和 SK3 蛋白阳性神经元的数量 |
3.7 Western blot检测SK3 的蛋白表达水平 |
3.8 荧光素酶报告基因验证miR-9-5p和 KCNN3 的靶向调节关系 |
3.9 注射位点鉴定 |
第四章 讨论 |
4.1 2 型糖尿病大鼠室旁核内miR-9-5p基因和SK3 蛋白表达失衡 |
4.2 室旁核内上调的miR-9-5p介导2 型糖尿病大鼠交感神经兴奋亢进和血糖升高 |
4.3 室旁核内上调的miR-9-5p有助于2 型糖尿病大鼠中枢神经系统慢性激活 |
4.4 室旁核内下调的SK3 介导2 型糖尿病大鼠交感神经兴奋亢进和血糖升高 |
4.5 室旁核内miR-9-5p/SK3 信号转导通路 |
4.6 室旁核内miR-9-5p在2型糖尿病大鼠治疗中的临床展望 |
4.7 本研究方法学的优势 |
4.8 本研究方法学的局限性 |
结论 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间发表的主要科研成果 |
后记 |
(8)两亲性苝酰亚胺的设计合成、组装体构建及生物应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
符号说明 |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 苝酰亚胺的设计合成 |
1.2.1 苝酰亚胺的结构与性质概述 |
1.2.2 苝酰亚胺的修饰方法 |
1.2.2.1 酰亚胺位修饰 |
1.2.2.2 苝核修饰 |
1.2.3 两亲性苝酰亚胺的合成 |
1.2.3.1 阴离子型 |
1.2.3.2 阳离子型 |
1.2.3.3 两性离子型 |
1.2.3.4 非离子型 |
1.3 苝酰亚胺的自组装 |
1.3.1 苝酰亚胺的自组装方法 |
1.3.1.1 溶液中自组装 |
1.3.1.2 基材界面自组装 |
1.3.2 苝酰亚胺的自组装结构与性能关系 |
1.3.3 苝酰亚胺的组装调控 |
1.3.3.1 空间位阻效应 |
1.3.3.2 溶剂环境 |
1.3.3.3 结构转变 |
1.4 苝酰亚胺的生物应用 |
1.4.1 荧光成像 |
1.4.2 抗菌 |
1.4.3 抗肿瘤 |
1.4.3.1 化疗 |
1.4.3.2 光诊疗(光动力治疗/光热治疗) |
1.5 本论文的设计思想与主要内容 |
1.6 课题创新点 |
第二章 水溶性荧光树枝状分子的合成及其长效活细胞荧光成像 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 实验材料和仪器 |
2.2.2 荧光树枝状分子的设计合成 |
2.2.2.1 水溶性荧光树枝状分子的设计 |
2.2.2.2 水溶性荧光树枝状分子的合成 |
2.2.3 分子结构表征 |
2.2.4 吸收/荧光光谱测试 |
2.2.5 纳米组装表征 |
2.2.6 分子模拟 |
2.2.7 细胞培养条件 |
2.2.8 细胞毒性评价 |
2.2.9 细胞摄取与活细胞成像 |
2.2.10 动态细胞荧光测试 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 荧光树枝状分子的合成 |
2.3.2 荧光树枝状分子的水溶性 |
2.3.3 荧光树枝状分子的光学性质 |
2.3.4 荧光树枝状分子自组装 |
2.3.5 荧光树枝状分子的生物相容性 |
2.3.6 细胞成像 |
2.4 本章小结 |
第三章 模板法制备银纳米杂化材料用于光催化增强的抗菌治疗 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 实验材料和仪器 |
3.2.2 模板分子PC的合成 |
3.2.3 材料表征及测试 |
3.2.4 PC自组装及组装调控 |
3.2.5 银离子还原及杂化材料制备 |
3.2.6 光催化降解罗丹明B |
3.2.7 抗菌实验 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 模板分子PC的设计合成 |
3.3.2 PC的光学与组装性质 |
3.3.3 银纳米杂化材料制备 |
3.3.4 光催化性能评价 |
3.3.5 体外抗菌性能 |
3.4 本章小结 |
第四章 酶响应解组装的苝酰亚胺基纳米簇用于深层光动力诊疗 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 实验试剂与仪器 |
4.2.2 P1及其对照结构的合成 |
4.2.3 FHP及对照纳米粒子制备 |
4.2.4 材料表征及测试 |
4.2.5 分子模拟 |
4.2.6 单线态氧检测 |
4.2.7 细胞实验 |
4.2.8 纳米粒子体外渗透性评价 |
4.2.9 小鼠活体成像及体外成像 |
4.2.10 活体光动力治疗效果 |
4.2.11 生物安全性评价 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 FHP与P1的设计 |
4.3.2 P1的酶解实验 |
4.3.3 P1与P2的光学与组装性质研究 |
4.3.4 FHP纳米结构与光学性质的表征 |
4.3.5 FHP溶液中酶响应性质 |
4.3.6 FHP细胞中酶响应性质 |
4.3.7 体外肿瘤细胞球及体内肿瘤渗透效果 |
4.3.8 活体荧光成像 |
4.3.9 活体光动力治疗评价 |
4.3.10 生物安全性评价 |
4.4 本章小结 |
第五章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
研究成果及发表的学术论文 |
作者与导师简介 |
附件 |
(9)新型HIV-1衣壳蛋白抑制剂和RNase H抑制剂的设计、合成与生物活性评价(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
第一章 绪论 |
第一节 艾滋病与HIV病毒 |
一、艾滋病及其流行现状 |
二、HIV-1病毒结构 |
三、HIV-1生命周期 |
四、抗艾滋病化学治疗 |
第二节 HIV-1衣壳蛋白:抗病毒药物研究新靶标 |
一、HIV-1衣壳蛋白的结构和功能 |
二、HIV-1衣壳蛋白抑制剂研究进展 |
三、HIV-1 CA六聚体相邻亚基NTD-CTD界面:作为药物设计新靶标的优势 |
第三节 HIV-1 RNase H:抗病毒药物研究新靶标 |
一、HIV-1 RNase H的结构和功能 |
二、HIV-1 RNase H抑制剂研究进展 |
第四节 抗病毒先导化合物的发现和结构优化策略 |
一、先导化合物发现策略 |
二、先导化合物优化策略 |
第五节 本章小结 |
第二章 含三氮唑的苯丙氨酸类HIV-1衣壳蛋白抑制剂的设计、合成与活性评价 |
第一节 目标化合物的设计 |
第二节 目标化合物的合成 |
一、仪器与试剂 |
二、目标化合物的合成路线 |
三、目标化合物的合成步骤 |
四、合成实验讨论 |
第三节 目标化合物的活性评价 |
一、体外抗HIV-1活性实验 |
二、化合物与HIV-1衣壳蛋白相互作用研究 |
三、化合物抗HIV-1作用阶段确证实验 |
四、衣壳蛋白(p24)含量测定实验 |
五、体外衣壳蛋白装配实验 |
第四节 化合物在体外人肝微粒体和人血浆代谢稳定性评价 |
一、化合物在人肝微粒体中的代谢稳定性研究 |
二、化合物在人血浆中的代谢稳定性研究 |
第五节 分子动力学模拟研究 |
第六节 本章小结 |
第三章 含苯磺酰胺的苯丙氨酸类HIV-1衣壳蛋白抑制剂的设计、合成与活性评价 |
第一节 目标化合物的设计 |
第二节 目标化合物的合成 |
一、仪器与试剂 |
二、目标化合物的合成路线 |
三、目标化合物的合成步骤 |
四、合成实验讨论 |
第三节 目标化合物的活性评价 |
一、体外抗HIV活性实验 |
二、化合物与HIV-1衣壳蛋白相互作用研究 |
三、化合物抗HIV-1作用阶段确证实验 |
四、衣壳蛋白(p24)含量测定实验 |
五、体外衣壳蛋白装配实验 |
六、体外逆转录酶抑制实验 |
第四节 分子动力学模拟与蛋白共晶结构研究 |
一、IIA-3k和IIB-2a的分子动力学研究 |
二、IIC-31与HIV-1 CA初步的共晶结构研究 |
第五节 IIC-31的初步成药性评价 |
一、体外人肝微粒体和人血浆稳定性实验 |
二、急性毒性实验 |
三、临床前药代动力学实验 |
第六节 本章小结 |
第四章 香豆素酰胺类抗HIV-1 RNase H先导化合物的发现 |
第一节 表型筛选发现香豆素酰胺类HIV-1 RNase H抑制剂 |
一、抗HIV活性筛选 |
二、初步作用机制研究 |
第二节 新型香豆素酰胺类HIV-1 RNase H抑制剂的设计 |
第三节 目标化合物的合成 |
一、仪器与试剂 |
二、目标化合物的合成路线 |
三、目标化合物的合成步骤 |
第四节 目标化合物的生物活性评价 |
一、体外抗HIV活性实验 |
二、RNaseH抑制实验 |
第五节 分子模拟研究 |
第六节 本章小结 |
第五章 总结与展望 |
第一节 总结 |
一、基于结构的新型HIV-1衣壳蛋白抑制剂的设计、合成与活性评价 |
二、表型筛选发现香豆素酰胺类HIV-1 RNase H苗头化合物及其结构优化 |
三、本论文创新点 |
四、本论文不足之处 |
第二节 展望 |
一、对本课题的进一步研究思路 |
二、新一代抗艾滋病药物的研究趋势 |
参考文献 |
附录-部分代表性化合物谱图 |
致谢 |
攻读博士期间科研及奖励情况 |
附件 |
学位论文评阅及答辩情况表 |
(10)Hsa_circ_0071106、hsa-miR-607和lncRNA TUG1对2型糖尿病的影响及功能预测(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 前言 |
1.1 2型糖尿病现状 |
1.2 2型糖尿病与ncRNA |
1.3 2型糖尿病与circRNA |
1.4 2型糖尿病与miRNA |
1.5 2型糖尿病与lncRNA |
第二章 材料与方法 |
2.1 研究对象 |
2.2 资料收集 |
2.3 标本采集与储存 |
2.4 生物信息学预测的数据库 |
2.5 实验主要试剂、仪器和耗材 |
2.5.1 实验主要试剂 |
2.5.2 实验主要仪器 |
2.5.3 实验主要耗材 |
2.6 实验方法 |
2.6.1 全血总RNA提取 |
2.6.2 RNA浓度和纯度的测定 |
2.6.3 miRNA的相对定量 |
2.6.4 lncRNA的相对定量 |
2.7 变量赋值 |
2.8 统计学方法 |
第三章 结果 |
3.1 研究对象的基本情况 |
3.2 circRNA与2型糖尿病关系的芯片结果分析 |
3.3 qRT-PCR验证circRNA差异表达 |
3.4 生物信息学预测hsa_circ_0071106相互作用的miRNA |
3.5 qRT-PCR验证miRNA差异表达 |
3.5.1 实时荧光定量PCR检测miRNA |
3.5.2 miRNA差异表达 |
3.6 生物信息学预测miRNA相互作用的lncRNA |
3.7 qRT-PCR验证lncRNA差异表达 |
3.7.1 实时荧光定量PCR检测lncRNA |
3.7.2 lncRNA差异表达 |
3.8 ROC曲线评估lncRNA MEG3、lncRN ATUG1、hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-3690和hsa_circ_0071106在2型糖尿病中的诊断价值 |
3.9 hsa_circ_0071106、miRNA和lncRNA与T2DM发病风险的关联性分析 |
3.10 外周血差异表达的lncRNA、miRNA与circRNA对2型糖尿病影响的中介交互效应 |
3.11 hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-3690和hsa-miR-607靶基因预测及功能富集分析 |
3.12 外周血差异表达的circRNA与血压和生化指标的相关性 |
3.13 外周血差异表达的miRNA与血压和生化指标的相关性 |
3.14 外周血差异表达的lncRNA与血压和生化指标的相关性 |
第四章 讨论 |
4.1 与hsa_circ_0071106 相互作用的miRNA对2型糖尿病的影响 |
4.2 与hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607和hsa-miR-3690相互作用的lncRNA对2型糖尿病的影响 |
4.3 hsa_circ_0071106、hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-3690、lncRNAMEG3和lncRNA TUG1相互作用对2型糖尿病的影响 |
4.4 hsa-miR-29a-5p和hsa-miR-607和hsa-miR-3690 靶基因预测及功能富集 |
4.5 hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-3690、lncRNA MEG3、lncRNA TUG1和hsa_circ_0071106在2型糖尿病中的诊断价值 |
4.6 hsa_circ_0071106、hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-607、hsa-miR-3690、lncRNA MEG3、和lncRNA TUG1与2型糖尿病临床指标的关系 |
第五章 结论与展望 |
参考文献 |
综述 MiRNA、circRNA和lncRNA与糖尿病关系的研究进展 |
参考文献 |
附录1 英文缩写词表 |
致谢 |
攻读硕士学位期间发表的论文 |
四、静脉药物配制中心崭露头角(论文参考文献)
- [1]化瘀通痹方调控小鼠类风湿关节炎模型关节炎症的作用研究[D]. 王长志. 北京中医药大学, 2021
- [2]肿瘤微环境响应的卟啉基金属有机配位聚合物的合成及其肿瘤诊疗应用[D]. 王兵. 南京邮电大学, 2021
- [3]肿瘤细胞膜包覆的紫杉醇纳米体系的构建及其抗乳腺癌作用研究[D]. 唐莎. 南华大学, 2021
- [4]紫草素对肝脏特异性Nf2基因敲除小鼠Hippo信号通路的影响[D]. 周铭. 南京师范大学, 2021
- [5]岩藻多糖对鼠胃幽门螺杆菌定植的影响[D]. 张雪琳. 青岛大学, 2021
- [6]新型金属有机骨架复合膜的制备及其抗菌性能的研究[D]. 郝凌婉. 吉林大学, 2021(01)
- [7]下丘脑室旁核miRNA-9-5p对糖尿病交感神经活动的影响及机制研究[D]. 徐佳琪. 吉林师范大学, 2021
- [8]两亲性苝酰亚胺的设计合成、组装体构建及生物应用研究[D]. 蔡阳. 北京化工大学, 2021
- [9]新型HIV-1衣壳蛋白抑制剂和RNase H抑制剂的设计、合成与生物活性评价[D]. 孙林. 山东大学, 2021(11)
- [10]Hsa_circ_0071106、hsa-miR-607和lncRNA TUG1对2型糖尿病的影响及功能预测[D]. 程秋婷. 广东药科大学, 2021