Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展

一、Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展（论文文献综述）

李敏^[1]（2020）在《基于数据挖掘和网络药理学的子痫前期用药规律分析及机制研究》文中进行了进一步梳理子痫前期（Preeclampsia,PE）是妊娠期特有的疾病,临床上以妊娠20周以后出现高血压、蛋白尿为特征,是孕产妇及围产儿死亡率增高的主要原因之一。临床常见治疗是镇静、解痉、降压、抗凝、利尿等对症治疗,治愈的唯一方法就是终止妊娠,但这一措施对围产儿预后产生较大不良影响。近年来,采用中医尤其中西医联合的方法来治疗子痫前期的报道颇多,中西医联合治疗子痫前期有延长孕周、减少并发症、改善围产结局等优点。数据挖掘技术可以从大量的医药数据中寻找出有效的隐性信息,经一定的技术手段处理之后,找出共性规律与差异性,为中医精准治疗提供依据,在促进医药学术的研究、加速传统医药现代化中起着重要作用。网络药理学可通过网络分析,系统地研究药物与机体之间的复杂网络关系,为研究药物药效作用机制提供了一种新的方法。本论文旨在通过数据挖掘方法分析中医药治疗子痫前期的用药规律,通过网络药理学方法研究中西药联合治疗子痫前期的物质基础和分子机制,以期为该病的临床治疗提供理论依据。[研究目的]1.运用数据挖掘方法探索中医药治疗子痫前期的用药特点和潜在规律,为今后中医治疗本病提供一定的思路及方法。2.根据数据挖掘和文献检索结果,运用网络药理学方法从分子水平探讨中西药联合治疗子痫前期的物质基础和分子机制。[研究方法]1.收集中国知网（CNKI）中的中医药治疗子痫前期相关临床文献,建立中医药治疗子痫前期的方药数据库,统计每味药物使用频次,并对所有药物的功效、四气五味、归经进行分类分析,并用SPSS软件进行中药关联规则分析。2.以通过数据挖掘获得的频次最高的中药及与该中药联合治疗子痫前期文献报道较多的西药为研究基础,运用网络药理学方法获取中药的活性成分和作用靶点、西药作用靶点,及与子痫前期相关靶点,建立化合物—靶点及靶点间相互作用网络,通过GO富集分析、KEGG通路分析对中西药联合治疗子痫前期的物质基础和作用机制进行研究。[研究结果]1.共收录符合纳入标准的文献63篇,涉及中药91味。用药频次≥12的有14味中药,排在前三位的分别是丹参（Salvia miltiorrhiza,SM）、钩藤、茯苓。中药四气以寒为主,五味以甘为主,归经中为肝、心、肾、脾居多。关联规则分析中发现药对关联强度最高的组合为钩藤和天麻,其次为丹参和茯苓。2.文献检索发现丹参联合低分子肝素（low molecular weight heparin,LMWH）治疗子痫前期的临床文献较多。通过网络药理学方法筛选出丹参活性成分30个,联合LMWH治疗子痫前期的关键靶点72个,包括STAT3、KNG1、TNF、VEGFA、IL6、FGFR1、EGFR、F10、IL10等。GO富集分析、KEGG通路分析显示丹参联合LMWH治疗子痫前期主要涉及细胞增殖的正调控、凋亡过程的负调控、MAP激酶活性的阳性调节、血压调节、一氧化氮生物合成过程的正调控等生物过程,PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路、NF-κ B信号通路、VEGF信号通路等信号转导通路。[研究结论]1.通过数据挖掘发现,中医药治疗子痫前期临床以平肝潜阳为基本治法,重视活血化瘀和健脾益肾,进一步揭示用药规律,为临床治疗提供参考。2.通过网络药理学发现,丹参联合LMWH治疗子痫前期主要是通过影响血管功能、炎症反应、糖脂代谢以及免疫4个方面,协同产生控制血压血糖、减轻炎症、调节免疫等作用。

胥红斌^[2]（2020）在《miR-1203沉默亲环蛋白D拮抗子宫内膜细胞氧糖剥夺再加氧损伤的实验研究》文中进行了进一步梳理背景和目的:在产科临床中,产后出血是常见的并发症之一,可引起子宫内膜中度至重度缺血性损伤。而子宫内膜缺血后常伴有再灌注,可导致人子宫内膜细胞明显氧化损伤。在分子水平上,缺血再灌注会引起活性氧簇（ROS）的产生和子宫内膜细胞的过度氧化损伤,导致循环脂质过氧化物的产生和各种抗氧化剂的减少。这些因素将会引起进一步的DNA断裂、蛋白损伤和线粒体功能障碍,最终导致子宫内膜细胞和组织死亡。研究证实亲环蛋白D（Cyp D）依赖性程序性坏死通路介导OGDR对人子宫内膜细胞的细胞毒作用。在体外实验中,常利用氧葡萄糖剥夺（oxygen and glucose deprivation,OGD）和随后的复氧（reoxygenation,OGDR）作用于培养的子宫内膜细胞模型,以模拟机体缺血再灌注和氧化损伤。micro RNAs（mi RNAs）是长约22核苷酸（nt）的内源性非编码RNA（nc RNAs）。mi RNA被证实广泛参与人体各种疾病的发生发展。mi RNAs可以通过直接与3’-非翻译区（3’-UTR）结合来抑制靶向m RNA的翻译和/或表达。在本论文中我们将阐述一种新的鉴定的Cyp D靶向mi RNA,micro RNA-1203（mi R-1203）,我们的结果表明mi R-1203靶向并沉默Cyp D以保护人子宫内膜细胞免受OGDR诱导的程序性坏死。研究方法和内容:通过三种生物信息预测软件（Targetscan,mi Rbase和mi RDB）预测,验证mi R-1203和Cyp D 3’-UTR结合位点,人子宫内膜细胞系T-HESC荧光素酶报告基因验证转染野生型（WT）或两个突变体（Mut1/2）mi R-1203模拟物与Cyp D3’-UTR结合;体外构建pre-mi R-1203慢病毒过表达和干扰载体（lv-pre-mi R-1203/lv-mi RC和lv-antago mi R-1203/anta C）,转染T-HESC和人原代子宫内膜细胞,实时定量聚合酶链反应（q PCR）验证mi R-1203和Cyp D m RNA的表达水平,Western blotting检测Cyp D的蛋白表达变化;分别OGDR诱导后上述稳定mi R-1203过表达和抑制的T-HESC细胞株和人原代子宫内膜细胞后,使用荧光染料DCFH-DA（2’,7’-二氯荧光素乙酸盐）流式细胞术测定ROS水平,JC-1绿色荧光探针检测线粒体去极化,CCK-8（cell counting kit-8）检测细胞活力,Western blotting检测胞浆中细胞色素C的释放,试剂盒检测培养基中LDH的释放。同时在T-HESC细胞株中OGDR不同时间点处理（6h,12h,18h,24h）,检测mi R-1203和Cyp D m RNA的表达水平;使用ROS清除剂NAC（N-acetylcysteine,500μM,1h）预处理T-HESC细胞以及在lv-antago mi R-1203感染的人原代子宫内膜细胞中加入Cyp D阻断剂Cs A后,CCK-8检测细胞活力和培养基LDH释放检测细胞坏死改变;使用CRISPR/Cas9技术完全敲除T-HESC细胞中Cyp D（Cyp D-KO）后分别过表达或抑制mi R-1203表达以及构建UTR-depleted Cyp D载体（UTR-null Cyp D）转染mi R-1203过表达T-HESC细胞,OGDR处理24h后,CCK-8检测细胞活力改变,LDH释放检测细胞坏死,同时q PCR检测mi R-1203表达,Western blotting检测Cyp D蛋白表达;在人原代子宫内膜细胞中,过表达以及抑制mi R-1203表达后,Cyp D抑制剂Cs A预处理,OGDR 24h诱导,LDH释放检测细胞坏死,q PCR检测mi R-1203表达。研究结果:通过生信预测以及荧光素酶报告基因,我们发现mi R-1203靶向Cyp D的3’-UTR（位置为806-813）,T-HESC细胞株和人原代子宫内膜细胞过表达mi R-1203显着抑制Cyp D的m RNA和蛋白表达水平。相反,抑制mi R-1203能明显提高Cyp D表达水平。mi R-1203在子宫内膜细胞中的过表达减轻了OGDR诱导的程序性坏死,抑制了线粒体Cyp D-p53-ANT1（Adenine nucleotide translocator）的关联,线粒体去极化,活性氧的产生和乳酸脱氢酶的释放。相反,OGDR诱导的程序性坏死和细胞毒性随着子宫内膜细胞中mi R-1203的抑制而增强。此外,mi R-1203过表达或抑制未能改变OGDR诱导的Cyp D敲除或抑制的T-HESC细胞毒性。最后当转染UTR缺失的Cyp D过表达载体后,同时mi R-1203的过表达并不能保护OGDR诱导的细胞损伤作用。结论:以上研究结果表明mi R-1203通过靶向并沉默Cyp D以保护人子宫内膜细胞免受OGDR的损伤,外源驱动mi R-1203-Cyp D级联可能是一种保护人子宫内膜细胞免受OGDR侵袭的新策略。

周桂菊^[3]（2019）在《TGF-β1影响汞诱导绒毛滋养细胞凋亡的研究》文中研究指明第一部分HgCl2诱导绒毛滋养细胞凋亡的研究目的:细胞凋亡是多细胞生物体为维持内环境稳定,由基因调控的程序性细胞死亡过程,其在胚胎形成与生长发育方面具有重要作用。环境因素中的重金属暴露对发育中胚胎的影响越来越受到关注。汞是一种广泛存在于自然界的重金属,一定量的汞暴露可引起人类胚胎损伤,导致不良妊娠结局。然而汞损伤人类胚胎的机制尚不清楚。本研究拟采取不同剂量的HgCl2对人绒毛滋养细胞（HTR-8/SVneo）进行处理,研究HTR-8/Svneo细胞的凋亡情况,探讨汞暴露对人绒毛滋养细胞的影响。材料与方法:（1）培养HTR-8/SVneo细胞48小时,不同浓度HgCl2处理细胞24小时,并进行分组,空白对照组细胞未用HgCl2处理。（2）用Annexin V-FITC/7-AAD对HTR-8/SVneo细胞进行染色,流式细胞术分析细胞凋亡的变化。（3）Western Blot检测HTR-8/SVneo细胞裂解型的caspase-3,8,9表达水平。（4）TUNEL实验方法验证不同剂量HgCl2处理的HTR-8/SVneo细胞凋亡情况。（5）对检测结果进行析,组间差异比较采用t检验或单因素方差分析,以P<0.05为有统计学意义。结果:（1）不同浓度HgCl2处理HTR-8/SVneo细胞后,随着HgCl2暴露浓度增加,细胞凋亡数量明显增加,而且裂解型的凋亡蛋白酶caspase-3,8和9的表达水平明显增加,各组间比较,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）与空白对照组细胞相比,在高浓度（10μM和20μM）HgCl2处理组中,HTR-8/SVneo细胞裂解型的caspase-3,8,9的表达水平显着增加,差异有统计学意义（P<0.001）。（3）TUNEL实验验证结果表明HgCl2诱导的HTR-8/SVneo细胞凋亡呈剂量依赖性。结论:本研究采取不同剂量的HgCl2对HTR-8/Svneo细胞进行处理,发现HgCl2暴露后HTR-8/Svneo细胞凋亡增加。但高浓度的HgCl2暴露后,HTR-8/Svneo细胞中裂解型的caspase-3,8和9表达水平和细胞凋亡数量增加更显着,推测高浓度的HgCl2诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡可能占主导地位。初步推断人类妊娠期间的汞暴露可诱导滋养细胞过度凋亡从而导致妊娠相关疾病的发生。第二部分TGF-β1在HgCl2诱导绒毛滋养细胞凋亡中的作用及机制研究目的:转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta,TGF-β1）参与调节绒毛滋养细胞的增殖、分化和入侵过程,有助于胎盘器官发育及胚胎着床。本研究通过观察TGF-β1对Hgcl2诱导滋养细胞凋亡的影响,研究Hgcl2暴露后滋养细胞丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）信号通路中多种蛋白和TGF-β活化激酶-1（TAK1）的变化及其与细胞凋亡的关系,探索TGF-β1调控Hgcl2诱导的滋养细胞凋亡的分子机制,以期为临床上进一步研究汞暴露引起滋养细胞凋亡相关的胚胎损伤的分子指标物和潜在干预措施提供理论依据。材料与方法:（1）不同浓度HgCl2和/或TGF-β1处理HTR-8/SVneo细胞24小时,并进行分组,空白对照组细胞未采用任何试剂处理。（2）Western Blot、q RT-PCR检测细胞TGF-β1表达水平,Annexin V-FITC/7-AAD染色验证分析细胞凋亡情况。Western Blot检测细胞裂解型的caspase-3,8,9表达水平。（3）磷酸-Thr 187 TAK1抗体免疫染色测定分析细胞TAK1表达量和活性变化。TAK1抑制剂5Z-7-oxozeaenol降调TAK1,Annexin V-FITC/7-AAD染色检测分析细胞调亡情况。Western Blot检测caspase-3与裂解型caspase-3表达水平。（4）构建TAK1质粒,转染HTR-8/SVneo细胞上调TAK1,Annexin V-FITC/7-AAD染色检测分析细胞凋亡变化。Western Blot检测分析caspase-3,裂解型caspase-3,P38及p-P38表达水平变化。（5）Western Blot检测MAPK信号通路蛋白p-JNK,p-ERK和p-P38表达水平。MAPK抑制剂下调信号通路蛋白,流式细胞术检测分析细胞凋亡变化。Western Blot检测裂解型的caspase-3,8,9表达水平。（6）分析检测结果,组间差异比较采用t检验或单因素方差分析,以P<0.05为有统计学意义。结果:（1）随着HgCl2处理浓度的增加,逐渐降低了滋养细胞TGF-β1的表达。在HTR-8/SVneo细胞中用TGF-β1联合HgCl2处理后,在一定程度上减弱了HgCl2诱导滋养细胞凋亡。（2）HgCl2处理组滋养细胞p-JNK,p-ERK和p-P38的表达水平明显高于空白对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。HgCl2联合TGF-β1处理组滋养细胞p-JNK,p-ERK和p-P38的表达水平显着低于HgCl2处理组（P<0.01）,裂解型的caspase-3,8,9相对表达水平与HgCl2处理组相比亦显着降低。（3）与空白对照组相比,JNK,ERK和P38抑制剂可使滋养细胞p-JNK,p-ERK和p-P38的表达水平明显降低（P<0.05）。然而,JNK和ERK抑制剂对HgCl2诱导的滋养细胞凋亡不产生影响（P>0.05）。但P38抑制剂SB202190能显着降低HgCl2诱导的滋养细胞凋亡和凋亡蛋白酶的活化（P<0.01）。（4）TGF-β1可激活HTR-8/SVneo细胞TAK1的表达,使滋养细胞凋亡程度下降。而降调TAK1可显着减弱TGF-β1抑制HgCl2诱导的滋养细胞凋亡作用（P<0.01）。（5）通过质粒转染过表达HTR-8/SVneo细胞TAK1,可显着降低HgCl2诱导的滋养细胞凋亡（P<0.01）。结论:TGF-β1对HgCl2诱导的滋养细胞凋亡具有调节作用,可能经p38 MAPK信号通路在一定程度上抑制了HgCl2诱导的HTR-8/SVneo细胞凋亡,并可能涉及TAK1的表达。这些结果可能为临床上进一步研究汞暴露引起的滋养细胞相关的胚胎损伤分子指标物和潜在的干预措施提供理论依据。

任郭英^[4]（2017）在《活血利水法对EMs大鼠异位内膜细胞凋亡的影响》文中提出目的:.通过自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症（EMs）模型,然后将其分为6组,即模型组、桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组、散结镇痛胶囊组、米非司酮组,同时分别给予灌服生理盐水、桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量混悬液、散结镇痛胶囊混悬液以及米非司酮混悬液,观察活血利水代表方桂枝茯苓胶囊对大鼠异位内膜形态学、病理学的影响,以及对细胞凋亡因子caspase-3和survivin表达干预效果,探讨桂枝茯苓胶囊治疗EMs的可能机制,阐释“血不利则为水”导致EMs的学术内涵。方法:1.造模:雌性SD大鼠150只,进行阴道图片、HE染色,建立动情周期档案。选取动情周期规律的135只SD大鼠进行实验,空白组15只,假手术组15只,剩余105只在动情期应用自体移植法建立EMs模型。术后肌注庆大霉素预防感染,苯甲酸雌二醇促进异位内膜生长。造模4周后,开腹观察造模情况。2.分组给药:选取造模成功的大鼠,随机分为模型组、桂枝茯苓胶囊高、中、低剂量组、散结镇痛胶囊组、米非司酮组。3.指标检测:药物治疗4周后,开腹观察异位内膜形态学、病理学变化以及细胞凋亡因子的表达情况。结果:1.应用自体移植法造模成功90只,成功率85.71%。2.模型组异位内膜增生明显,腺体数目多,腺腔增大明显,腺上皮部分呈复层排列,上皮细胞呈高柱状或立方状。各用药组异位内膜腺体萎缩,数目减少,细胞甚至扁平状,排列松散、无极性,间质细胞减少或缺如,周围血管减少。尤以米非司酮组、桂枝茯苓胶囊高剂量组异位内膜萎缩最为明显。3.细胞凋亡因子在内膜组织中表达:模型组异位内膜组织中caspase-3低水平表达,各用药组均能不同程度的上调caspase-3表达,差别具有统计学意义（P<0.05）,以桂高组及米非组最为显着。模型组异位内膜组织中survivin高水平表达,各用药组均能不同程度的下调survivin表达,差别具有统计学意义（P<0.05）,以桂高组及米非组表达最低。结论:1.采用自体移植法成功建立大鼠模型,成模率约85.71%,其异位内膜种植处的形态学表现符合成膜标准。2.采用“注水法”进行子宫内膜分离,分离面完整,分离速度快,不易撕碎或损伤内膜,可作为分离大鼠子宫内内膜的一种方法。3.桂枝茯苓胶囊可缩小异位病灶体积,抑制异位内膜生长,加速其萎缩、坏死,达到治疗EMs的目的,其中桂枝茯苓胶囊高剂量组疗效最佳。4.活血利水代表方桂枝茯苓胶囊治疗EMs的作用机制可能是通过下调survivin在EMs中的高表达,激活细胞中的caspase-3活化途径,从而诱导了异位内膜细胞萎缩、凋亡和坏死,进而起到了治疗EMs的作用,说明血水互结是导致EMs的病机及关键。

何双^[5]（2012）在《米非司酮对人早孕不同时期绒毛组织结构及Survivin、caspase-3表达的影响》文中指出目的：本实验通过应用光镜、采用免疫组织化学方法及HE染色方法了解米非司酮对早孕不同时期绒毛组织病理结构改变及对凋亡抑制基因Survivin和半胱氨酸蛋白酶家族成员caspase-3表达的影响,以探讨米非司酮对早孕不同时期绒毛组织细胞凋亡的影响以及米非司酮抗早孕作用机制。为探讨临床米非司酮延长抗早孕时间,提高流产率,减少副反应提供相应的理论基础。方法：1.实验分组：研究标本取自2011年5月1日至2011年6月30日在天津医科大学总医院计划生育门诊自愿要求终止早孕的妇女60例,其中妊娠40-49天者30例,随机分两组即对照A组和实验A组,每组各15例,妊娠50-63天者30例,随机分两组即对照B组和实验B组,每组各15例。对照组常规行负压吸宫术终止妊娠,实验组在行负压吸宫术前48小时开始服用米非司酮,服药方法：晨起2片,间隔12小时后1片,连服2日,总计150mmg。收集四组绒毛组织,应用显微镜观察各组早孕绒毛组织Survivin及caspase-3的表达情况。2.应用免疫组织化学法检测Survivin及caspase-3在各组早孕绒毛组织中的表达情况。各组绒毛组织HE染色高倍镜下计数绒毛滋养细胞层增生细胞结节数,观察各组之间绒毛滋养细胞层增生细胞结节数的表达差异情况,并与Survivin蛋白和caspase-3蛋白的表达做相关分析。3.利用SPSS17.0统计软件处理实验数据结果,计量资料以（x±s）表示,两样本均数比较采用t检验；计数资料采用χ2检验,用spearman等级相关分析Survivin、caspase-3与增生细胞结节数之间的相关性。P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.HE染色光镜观察结果对照组：绒毛大小比较均一,滋养层细胞结构清晰,外层为合体滋养细胞,胞浆呈细颗粒状或是空泡状,有多个小而深染的细胞核；内层为细胞滋养细胞,呈多边形或是卵圆形,细胞界限清楚、排列比较整齐,胞浆丰富但是胞质染色较浅,有小泡状的胞核。实验组：绒毛滋养层细胞变性、坏死,甚至脱落,炎细胞浸润,绒毛间质水肿,血液淤积和纤维素沉积。两个实验组之间形态改变基本相同。2.HE染色观察滋养细胞增生结节对照组：滋养层细胞可见绒毛叶合体“上皮结节”,合体细胞层向外突出于绒毛间隙中的上皮,结节有的附着在表面,有的相互粘连形成桥样,有的携带有郎罕氏细胞及部分结缔组织。实验组：滋养层细胞形成的增生结节明显减少,合体滋养细胞与细胞滋养细胞之间的连接结构松弛,细胞间隙增宽。两实验组之间形态改变基本相同。对照组与实验组比较,对照组明显高表达于实验组,两组间细胞增生结节数的差异有统计学意义（P<0.05）。3. Survivin在绒毛组织中的表达对照组绒毛组织中Survivin在绒毛细胞核和胞浆内均有阳性表达,实验组Survivin表达低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。Survivin表达在对照组与实验组之间有显着差别。但是针对不同妊娠时限的对照A组与对照B组之间,以及实验A组与实验B组之间,Survivin蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）。4.caspase-3在绒毛组织中的表达实验组绒毛组织中caspase-3呈阳性表达,主要位于合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆中,对照组caspase-3表达明显低于实验组,差异有统计学意义（P<0.05）。caspase-3表达在对照组与实验组之间有显着差别。对高表达caspase-3的实验组进一步分析,不同妊娠时限的实验A组与实验B组之间,caspase-3蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）。5.增生细胞结节与Survivin、caspase-3的相关分析绒毛滋养层细胞增生结节数（x±s）与Survivin经Spearman等级相关分析rs=0.18,P>0.05,未观察到本实验绒毛滋养层细胞增生结节数与抗凋亡蛋白Survivin存在正相关。绒毛滋养层细胞增生结节数（x±s）与caspase-3经Spearman等级相关分析rs=-0.17,P>0.05,未观察到本实验绒毛滋养层细胞增生结节数与促凋亡蛋白caspase-3存在负相关。结论：1.米非司酮可以抑制抗凋亡基因Survivin表达,促进caspase-3的表达,达到促进绒毛组织变性、坏死、凋亡,实现抗早孕的目的。2.正常早孕绒毛组织结构完整,米非司酮作用后结构发生明显改变,绒毛组织变形坏死,绒毛组织滋养细胞增生结节数目明显减少。3. Survivin在正常早孕绒毛组织中正常表达,米非司酮作用后Survivin的表达受到抑制,使绒毛组织的抗凋亡机制受损,促进绒毛组织凋亡,妊娠难以维持。4. caspase-3在实验组绒毛组织中表达增强,促进凋亡的发生。5.绒毛滋养细胞增生结节数目与Survivin的表达无显着正相关,与caspase-3的表达无显着负相关。6.米非司酮对Survivin、caspase-3在不同时期早孕绒毛组织中的表达无显着差异影响,在此凋亡机制理论上可以认为150mg米非司酮终止50-63天早孕与终止≤49天早孕效果相近。

张清华^[6]（2004）在《Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展》文中认为

李耀威^[7]（2012）在《超声联合LHRHa-靶向微泡沉默Survivin基因对卵巢癌A2780/DDP细胞侵袭及转移能力的影响》文中提出第一部分凋亡抑制基因Survivin在卵巢癌细胞中的表达目的：测定Survivin蛋白在三种卵巢癌细胞系中的表达，选择其中Survivin表达较高的细胞系进入后续部分的实验。方法：引入三种卵巢癌细胞系：A2780/DDP、SKOV3、HO8910，分别进行体外培养。通过免疫荧光技术定性、Western-blot方法定量测定Survivin蛋白的表达水平。结果：①免疫荧光测定结果:以各种细胞系中荧光细胞发生率做比较，HO8910、SKOV3、 A2780/DDP三种细胞系的荧光细胞发生率分别为75.34%±2.52%、74.77%±2.65%、81.04%±2.12%；②Western-blot测定结果：以各种细胞系中Survivin/β-actin做比较，HO8910、SKOV3、 A2780/DDP三种细胞系的比值分别为0.624±0.028、0.638±0.029、0.702±0.017。综上，HO8910细胞系和SKOV3细胞系的Survivin蛋白表达量差别不大（P>0.05）；A2780/DDP细胞系的Survivin蛋白表达量较前两者高（P<0.05）。结论：HO8910、SKOV3、A2780/DDP细胞系均有Survivin蛋白高表达，A2780/DDP表达量更高，该细胞株适合进行Survivin基因靶向沉默研究。第二部分超声联合LHRHa-靶向微泡介导psh-Survivin转染对卵巢癌A2780/DDP细胞侵袭及转移能力的影响目的：通过超声破坏LHRHa-靶向微泡转染pshRNA-Survivin，观察RNA干扰对人卵巢癌A2780/DDP细胞survivin基因的沉默效应及对细胞侵袭转移能力的影响。方法：构建靶向survivin基因的短发夹状RNA重组表达质粒pshRNA-Survivin。将对数生长期的A2780/DDP细胞随机分为7组：空白对照组、单纯质粒组、质粒+普通微泡组、质粒+靶向微泡组、质粒+超声辐照组、质粒+普通微泡+超声辐照组及质粒+靶向微泡+超声辐照组。分别给予相应处理，应用western-blot检测survivin蛋白的表达；MTT法检测卵巢癌细胞与细胞外基质粘附能力；利用transwell小室检测卵巢癌细胞侵袭转移能力；western-blot检测细胞中MMP-2、E-cadherin蛋白表达。结果：①与对照组比较，质粒+超声辐照组、质粒+普通微泡+超声辐照组、质粒+靶向微泡+超声辐照组survivin蛋白明显降低（p<0.05），穿透重组基质膜数目明显降低（p<0.05），细胞中MMP-2蛋白表达明显下降（p<0.05），E-cadherin蛋白表达明显增强（p<0.05）。其中质粒+LHRHa-靶向微泡+超声辐照组survivin、MMP-2蛋白表达量，穿透重组基质膜数目明显低于质粒+超声辐照组、质粒+普通微泡组+超声辐照组，而细胞E-cadherin蛋白表达明显高于质粒+超声辐照组、质粒+普通微泡+超声辐照组（p<0.05）。②与对照组比较，质粒+普通微泡+超声辐照组、质粒+LHRHa-靶向微泡+超声辐照组细胞粘附能力明显降低（p<0.05）；质粒+靶向微泡+超声辐照组细胞粘附能力明显低于质粒+普通微泡+超声辐照组（p<0.05）。结论：超声破坏LHRHa-靶向微泡可有效增强pshRNA-Survivin对卵巢癌A2780/DDP细胞Survivin的靶向沉默效应，并降低其侵袭转移能力，可望为卵巢癌提供一种有效的辅助治疗方法。

胡晓玲,朱清仙^[8]（2012）在《EG-VEGF在卵巢周期及卵巢疾病中血管生成作用的研究进展》文中研究表明综述内分泌腺源性血管内皮生长因子（EG-VEGF）在妇产科领域的表达和意义,发现EG-VEGF与血管内皮生长因子（VEGF）一样有强大的促血管生成作用,但EG-VEGF在卵巢中的表达却具有高度的选择性,与VEGF在卵巢的表达有其时间和空间上的差异和互补,为卵巢生理和病理研究开辟了又一新思路。

张理^[9]（2011）在《YAP和Survivin在卵巢浆液性乳头状囊腺癌中的表达及与血清CA125水平的关系》文中认为目的:检测YAP和survivin在正常卵巢组织、卵巢浆液性乳头状囊腺瘤、交界性浆液性乳头状囊腺瘤及浆液性乳头状囊腺癌组织中的表达水平,联合分析患者术前血清CA125值,探讨YAP、Survivin及血清CA125值在卵巢浆液性乳头状囊腺癌中的关系及意义。方法:收集大连医科大学附属第一医院2002年1月-2010年4月妇产科手术病例,采用免疫组织化学方法检测10例正常卵巢组织、10例浆液性乳头状囊腺瘤、20例卵巢交界性浆液性乳头状囊腺瘤及40例卵巢浆液性乳头状囊腺癌组织中YAP蛋白及Survivin蛋白的表达,同时用化学发光免疫测定法联合检测患者术前血清CA125水平。结果⒈YAP在浆乳癌组（92.50%）、交界性浆乳瘤（85%）的阳性率显着高于正常卵巢组织（50%）,P<0.05。YAP在浆乳癌低分化组中的阳性率（95.46%）显着高于高-中分化组（88.89%）,差异具有统计学意义,P<0.05。YAP的阳性率在浆乳癌III-Ⅳ期（96.43%）虽较I-II期（83.33%）有升高趋势,在淋巴结转移组（93.33%）也高于无淋巴结转移组（92.00%）,但差异均不具有统计学意义（P>0.05）。另外,在浆乳癌组中YAP的阳性率与患者年龄无显着关联性,P >0.05。⒉Survivin在正常卵巢组织中未检测出阳性表达,其在浆乳瘤（10%）、交界性浆乳瘤（15%）及浆乳癌（60%）中的阳性率逐渐升高,且在浆乳癌的阳性率显着高于浆乳瘤组及交界性浆乳瘤组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。Survivin在低分化组的阳性率（82.61%）显着高于高-中分化组（29.41%）,在淋巴结转移组的阳性率（86.67%）显着高于无淋巴结转移组（44.00%）,差异均具有统计学意义,P<0.05.虽然Survivin在III-Ⅳ期中阳性率（71.43%）高于I-II期（33.33%）,但差异不具有统计学意义,P>0.05。另外,Survivin在浆乳癌中的表达与患者年龄未发现明显关联性,P >0.05。⒊血清CA125在浆乳癌中的阳性率（100.00%）显着高于浆乳瘤（20%）及交界性瘤（25%）,差异均具有统计学意义,P<0.05;血清CA125值在III-Ⅳ期中显着高于Ⅰ-Ⅱ期,在低分化组显着高于高-中分化,在淋巴结转移组显着高于无淋巴结转移组,差异均具有统计学意义, P<0.05;但血清CA125水平与浆乳癌患者的年龄未发现明显关联性,P>0.05。4. YAP与Survivin在浆乳癌中的表达呈正相关,相关系数r=0.494,P<0.05;YAP的表达与血清CA125的水平呈正相关,r=0.512,P P<0.05;Survivin的表达与血清CA125的水平呈正相关,r=0.378, P<0.05。结论:⒈YAP在正常卵巢组织广泛表达,其在交界性浆乳瘤、浆乳癌中的阳性率显着高于正常卵巢组织;YAP的阳性率在低分化组显着高于高中分化组,提示YAP的过表达可能参与浆乳癌的形成和发展,并与肿瘤的恶性程度相关。⒉Survivin在正常卵巢组织中未检测出表达,其在浆乳癌中的阳性率显着高于交界性浆乳瘤及浆乳瘤,低分化组显着高于高-中分化组,淋巴结转移组显着高于无淋巴结转移组,提示survivin可能在浆乳癌的发生、发展及淋巴结转移过程中发挥重要作用。⒊血清CA125的阳性率在浆乳癌组中显着高于交界性浆乳瘤及浆乳瘤组;血清CA125值在III-Ⅳ期显着高于Ⅰ-Ⅱ期,在低分化组显着高于高-中分化组,在淋巴结转移组显着高于无淋巴结转移组。4.YAP与Survivin在卵巢浆乳癌组织的表达呈正相关;血清CA125值与YAP的表达呈正相关,并与Survivin的表达呈正相关。YAP的异常活化可能直接导致细胞增殖及凋亡的失衡,并诱导凋亡抑制因子survivin的过表达,使浆乳癌肿瘤细胞更易逃避机体的杀伤作用并异常增殖,受损细胞不断保存积蓄,使其恶性程度增加,导致CA125水平升高,在浆乳癌的发生、发展及转移中起重要作用。联合检测组织中YAP、survivin及血清中CA125水平有助于浆乳癌的早期诊断及病情判断。

陈颖^[10]（2010）在《青蒿琥酯对卵巢癌的抑制作用及其对Survivin和Caspase-3活性的影响》文中指出前言青蒿素是从菊科植物黄花蒿中提取的一类倍半萜内酯化合物,以它为原型开发了蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯（artesunate, Art）、双氢青蒿素等衍生物。青蒿素及其衍生物是一类活性很强的抗疟疾药物,主要用于治疗对氯喹耐药的恶性疟疾。近年的研究发现,青蒿素及其衍生物还具有抗肿瘤的效应。青蒿琥酯是青蒿素一个重要衍生物。Efferth等从美国国家癌症研究所中挑选55株人体肿瘤细胞作为研究青蒿琥酯的抗肿瘤活性时显示,最敏感的为人白血病及结肠癌细胞,中度敏感的有黑色素瘤、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、中枢神经系统肿瘤及肾癌细胞等,小细胞肺癌的敏感性最差。本实验通过MTT比色法、流式细胞术、透射电镜法研究青蒿琥酯对人卵巢癌细胞株CAOV3细胞的抑制作用及和顺铂对抑制卵巢癌细胞生长的协同作用。通过建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,在体实验证实青蒿琥酯对卵巢癌的抑制作用；通过Western blot（免疫印迹法）检测青蒿琥酯作用后的CAOV3细胞中Survivin和Caspase-3蛋白活性的变化,探讨青蒿琥酯抑制卵巢癌生长的机制。材料与方法一、材料1、药品制备青蒿琥酯临用前用NaHC03溶解再用生理盐水稀释至所需浓度,0-4℃冰箱保存。2、细胞培养人卵巢癌细胞株CAOV3细胞在含10%胎牛血清,100U／ml青霉素,100μg／ml链霉素的DMEM培养基中贴壁生长,于37℃、5%CO2培养箱中传代培养。3、裸鼠BALB/C裸小鼠,4-6周龄,雌性,体重18-22g,购于上海斯莱克实验动物实验中心,饲养于中国医科大学实验动物中心SPF（无特定病原体）级环境的层流架中,经高压灭菌的标准饲料和水供动物自由食用。二、方法1、MTT比色法检测青蒿琥酯对人卵巢癌细胞株CAOV3细胞的体外增殖抑制作用及与顺铂对抑制卵巢癌细胞生长的协同作用；2、透射电镜观察青蒿琥酯对人卵巢癌细胞株CAOV3细胞形态学的影响；3、流式细胞仪检测人卵巢癌细胞株CAOV3细胞周期的变化和细胞凋亡率；4、建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,研究青蒿琥酯对卵巢癌细胞的抑制作用；5、Western blot法检测青蒿琥酯作用后的卵巢癌裸鼠移植瘤中Survivin和Caspase-3蛋白活性的变化。三、统计学方法实验数据采用SPSS 13.0软件进行t检验及相关分析。P<0.05提示差异具有显着意义。结果1、MTT实验表明青蒿琥酯对人卵巢癌细胞株CAOV3细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性,随着浓度的增加和时间的延长,抑制率逐渐增加（P＜0.01或P<0.05）。顺铂与青蒿琥酯联合给药对CAOV3细胞的抑制率明显增加（P<0.01）；2、透射电镜可以看出CAOV3细胞形态规则,胞膜完整。青蒿琥酯作用后的CAOV3细胞多个细胞核膜模糊,核内染色质凝聚边集明显,胞膜有破损,呈现凋亡的特征性改变；3、流式细胞仪检测出在青蒿琥酯作用后的CAOV3细胞,在DNA直方图上,G1左侧出现亚二倍体细胞群的峰型即凋亡峰（亚G1峰）,且随着浓度的增加凋亡率逐渐增加（P＜0.01）,在细胞周期中,随着药物浓度的增加G1+S期细胞减少,G2期细胞明显增加,与对照组相比差异显着（P<0.01）,表明青蒿琥酯可以抑制人卵巢癌细胞株CAOV3细胞增殖,诱导其凋亡；4、成功建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型,给予三组不同剂量青蒿琥酯药物干预,可以得出青蒿琥酯对移植瘤具有抑制作用,且随着药物浓度的增加抑瘤率逐渐增加,与对照组相比有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。5.Western blot法检测裸鼠移植瘤中Survivin和Caspase-3蛋白的表达,结果显示与对照组比较,各青蒿琥酯给药组Survivin表达均明显下调,而Caspase-3表达均上调。结论1、青蒿琥酯对卵巢癌细胞具有抑制作用；2、青蒿琥酯与传统化疗药顺铂对抑制卵巢癌细胞生长具有协同作用；3、青蒿琥酯对卵巢癌细胞的抑制作用可能通过抑制Survivin表达,激活Caspase-3促进卵巢癌细胞凋亡的途径实现。

二、Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展（论文提纲范文）

（1）基于数据挖掘和网络药理学的子痫前期用药规律分析及机制研究（论文提纲范文）

（2）miR-1203沉默亲环蛋白D拮抗子宫内膜细胞氧糖剥夺再加氧损伤的实验研究（论文提纲范文）

（3）TGF-β1影响汞诱导绒毛滋养细胞凋亡的研究（论文提纲范文）

（4）活血利水法对EMs大鼠异位内膜细胞凋亡的影响（论文提纲范文）

（5）米非司酮对人早孕不同时期绒毛组织结构及Survivin、caspase-3表达的影响（论文提纲范文）

（7）超声联合LHRHa-靶向微泡沉默Survivin基因对卵巢癌A2780/DDP细胞侵袭及转移能力的影响（论文提纲范文）

（9）YAP和Survivin在卵巢浆液性乳头状囊腺癌中的表达及与血清CA125水平的关系（论文提纲范文）

（10）青蒿琥酯对卵巢癌的抑制作用及其对Survivin和Caspase-3活性的影响（论文提纲范文）

四、Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展（论文参考文献）

• [1]基于数据挖掘和网络药理学的子痫前期用药规律分析及机制研究[D]. 李敏. 扬州大学, 2020(04)
• [2]miR-1203沉默亲环蛋白D拮抗子宫内膜细胞氧糖剥夺再加氧损伤的实验研究[D]. 胥红斌. 苏州大学, 2020(06)
• [3]TGF-β1影响汞诱导绒毛滋养细胞凋亡的研究[D]. 周桂菊. 安徽医科大学, 2019(07)
• [4]活血利水法对EMs大鼠异位内膜细胞凋亡的影响[D]. 任郭英. 陕西中医药大学, 2017(04)
• [5]米非司酮对人早孕不同时期绒毛组织结构及Survivin、caspase-3表达的影响[D]. 何双. 天津医科大学, 2012(03)
• [6]Survivin在妇产科相关疾病中的研究进展[J]. 张清华. 中国厂矿医学, 2004(06)
• [7]超声联合LHRHa-靶向微泡沉默Survivin基因对卵巢癌A2780/DDP细胞侵袭及转移能力的影响[D]. 李耀威. 重庆医科大学, 2012(01)
• [8]EG-VEGF在卵巢周期及卵巢疾病中血管生成作用的研究进展[J]. 胡晓玲,朱清仙. 现代妇产科进展, 2012(04)
• [9]YAP和Survivin在卵巢浆液性乳头状囊腺癌中的表达及与血清CA125水平的关系[D]. 张理. 大连医科大学, 2011(06)
• [10]青蒿琥酯对卵巢癌的抑制作用及其对Survivin和Caspase-3活性的影响[D]. 陈颖. 中国医科大学, 2010(10)

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